改良的羥基磷灰石納米載體性能及其體外基因轉(zhuǎn)染研究
發(fā)布時(shí)間:2017-04-09 10:17
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【摘要】:目的測(cè)試課題組改良的納米基因載體的理化參數(shù),并觀察其體外基因轉(zhuǎn)染的性能。 方法通過化學(xué)共沉淀-水熱合成法合成羥基磷灰石納米顆粒,用PEI做表面修飾以提高羥基磷灰石納米載體的DNA結(jié)合能力和轉(zhuǎn)染效率,并應(yīng)用穿透肽進(jìn)一步提高其基因轉(zhuǎn)染率。通過透射電鏡觀察納米顆粒的形態(tài)和粒徑、測(cè)定修飾前后的納米羥基磷灰石在室溫的懸浮穩(wěn)定性、與DNA的結(jié)合和保護(hù)能力及體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染能力. 結(jié)果1)制備改良的羥基磷灰石納米顆粒,有較高的DNA結(jié)合力(與DNA結(jié)合的質(zhì)量比為50:1)。2)經(jīng)PEI修飾后的nHAP具有更好的懸浮穩(wěn)定性、DNA結(jié)合力更高(與DNA結(jié)合的質(zhì)量比為12.5:1),體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染率由原來的1.83%提升至8.14%。3)通過穿透肽進(jìn)一步將轉(zhuǎn)染效率提升至10.12%。 結(jié)論1)經(jīng)PEI修飾的羥基納米磷灰石載體的懸浮穩(wěn)定性和DNA結(jié)合能力都要優(yōu)于單純羥基納米磷灰石顆粒。2)結(jié)合穿透肽后,可進(jìn)一步提高PEI修飾的羥基磷灰石納米載體的體外轉(zhuǎn)染效率。(圖28幅,表3個(gè),參考文獻(xiàn)52篇)
【關(guān)鍵詞】:納米羥基磷灰石 聚乙烯亞胺 化學(xué)共沉淀-水熱合成法 基因載體 基因轉(zhuǎn)染率 穿透肽
【學(xué)位授予單位】:中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R318.08
【目錄】:
- 資助本課題的科研基金4-5
- 摘要5-6
- ABSTRACT6-8
- 目錄8-9
- 符號(hào)說明9-10
- 第一章 前言10-13
- 第二章 實(shí)驗(yàn)部分13-23
- 2.1 實(shí)驗(yàn)試劑13-14
- 2.2 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備14
- 2.3 實(shí)驗(yàn)所需培養(yǎng)基及試劑14-15
- 2.4 其他15
- 2.5 實(shí)驗(yàn)方法及步驟15-23
- 2.5.1 pEGFP-N1/pEGFP-N1-NT3質(zhì)粒的獲取15-18
- 2.5.2 nHAP/PEI-nHAP的制備18
- 2.5.3 nHAP/PEI-nHAP的性能研究18-21
- 2.5.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染21-23
- 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-31
- 3.1 nHAP及PEI-nHAP的性能研究23-31
- 3.1.1 nHAP及PEI-nHAP的電鏡表征23
- 3.1.2 nHAP、PEI-nHAP的懸浮穩(wěn)定性23-25
- 3.1.3 保存質(zhì)粒的測(cè)序25-26
- 3.1.4 nHAP/PEI-nHAP與質(zhì)粒DNA的結(jié)合試驗(yàn)26-27
- 3.1.5 MTT實(shí)驗(yàn)27-29
- 3.1.6 轉(zhuǎn)染結(jié)果29-31
- 第四章 討論31-34
- 4.1 羥基碑灰石納米的合成31
- 4.2 羥基碑灰石納米的理化性質(zhì)31-33
- 4.3 基因轉(zhuǎn)染及效率提氋33-34
- 第五章 結(jié)論34-35
- 參考文獻(xiàn)35-38
- 綜述38-46
- 參考文獻(xiàn)43-46
- 致謝46-47
【共引文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 黃容琴,裴元英;基因治療中非病毒載體的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊(cè);2005年02期
2 王鳳華;劉俊;唐冬英;薛昌剛;童春義;吳憲遠(yuǎn);劉選明;;基于殼聚糖納米顆粒的基因槍法轉(zhuǎn)化洋蔥細(xì)胞研究[J];湖南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2009年05期
3 余紅偉;王源升;李瑜;蔣健暉;吳海龍;魏_
本文編號(hào):295033
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