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無標記磁性氧化石墨烯二維復合材料對CTCs的高效捕獲與毒性評價

發(fā)布時間:2020-12-24 11:13
  癌癥是全世界都在關(guān)注的致死性疾病,而轉(zhuǎn)移被認為是造成癌癥死亡最主要的原因。在轉(zhuǎn)移過程中,腫瘤細胞從原發(fā)腫瘤脫離,進入血液并同血液循環(huán)行進入到人體的不同組織。外周血中的這些從原位“脫離”的腫瘤細胞稱為循環(huán)腫瘤細胞(CTCs)。生物學家認為CTCs是造成原發(fā)腫瘤向遠端轉(zhuǎn)移的主要原因,也是理解轉(zhuǎn)移生物學問題的關(guān)鍵。作為“實時液體活檢”的CTCs分析技術(shù)對腫瘤早期診斷、愈后復發(fā)檢測、治療效應評估、抗癌藥物篩選及治療靶點的選擇等方面具有很大的臨床價值。而對血液中數(shù)目極其稀有的CTCs的有效分離操作是CTCs的檢測過程中具有挑戰(zhàn)性的重要環(huán)節(jié)。而在對CTCs的分離操作中除了要考慮對上億血細胞中稀有的CTCs進行有效分離外,還需考慮大量血細胞的背景干擾帶來對捕獲純度的影響以及在捕獲分離過程中對細胞的活性影響,因為這些因素會影響對CTCs捕獲分離后下游的分子分析及擴增培養(yǎng)。目前建立在CTCs與血液正常細胞的物理特性及表面標志物的差異基礎(chǔ)之上的分離操作都存在一定的局限性而不能應用于臨床檢測。與正常血液細胞不同的糖代謝方式造成腫瘤細胞膜強負電性的廣譜性標識或許可以為CTCs的有效分離提供新的解決方案。本課題... 

【文章來源】:西北大學陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:82 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略語對照表
第一章 緒論
    1.1 研究背景
        1.1.1 循環(huán)腫瘤細胞(CTCs)分離技術(shù)的研究意義
        1.1.2 CTCs常見的分離技術(shù)及存在問題
        1.1.3 氧化石墨烯及其磁性復合物在CTCs捕獲領(lǐng)域的應用研究
        1.1.4 CTCs捕獲分離面臨的問題總結(jié)
    1.2 研究目的與意義
    1.3 論文研究內(nèi)容及技術(shù)路線
    1.4 本文創(chuàng)新點
第二章 材料的制備及表征
    2.1 材料與設(shè)備
        2.1.1 試劑
        2.1.2 儀器與設(shè)備
    2.2 材料合成方法
        2.2.1 超順磁四氧化三鐵納米顆粒的制備(IO-PAA)
2)">        2.2.2 熒光磁性納米顆粒的制備(RBITC-IO@SiO2
        2.2.3 超順磁納米顆粒表面羧基化修飾(IO-COOH)
        2.2.4 超順磁納米顆粒的表面正電修飾(IO-PEI)
3O4@GO的可控制備">        2.2.5 2D磁性氧化石墨烯復合材料Fe3O4@GO的可控制備
    2.3 磁性材料濃度測定方法
    2.4 0D與2D磁性材料的表征與分析
    2.5 結(jié)果與分析
        2.5.1 材料粒徑、電位表征與分析
        2.5.2 磁性材料的形貌表征與分析
        2.5.3 磁性材料的濃度確定(以含F(xiàn)e量為準)
        2.5.4 納米材料熒光性能表征與分析
        2.5.5 磁性材料磁性能的表征與分析
    2.6 本章小結(jié)
第三章 材料對細胞的捕獲及毒性評價
    3.1 材料與設(shè)備
        3.1.1 試劑與耗材
        3.1.2 儀器與設(shè)備
    3.2 實驗方法與儀器
        3.2.1 細胞培養(yǎng)方法
        3.2.2 磁性材料對大量癌細胞的捕獲
        3.2.3 磁性材料對白細胞的捕獲
        3.2.4 在模擬血樣中捕獲稀有GFP細胞
        3.2.5 熒光顯微分析方法
        3.2.6 激光共聚焦分析方法
        3.2.7 掃描電鏡分析方法
        3.2.8 細胞切片透射電子顯微分析
        3.2.9 CCK-8試劑盒檢測細胞毒性
        3.2.10 LDH試劑盒檢測細胞毒性
        3.2.11 貼壁細胞瑞氏染色
        3.2.12 懸浮細胞瑞氏染色
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 正、負電熒光磁性材料與癌細胞的結(jié)合能力分析
        3.3.2 磁性材料對大量癌細胞的捕獲分析
        3.3.3 正電磁性材料對白細胞的捕獲分析
        3.3.4 正電磁性材料對模擬血樣中GFP細胞的捕獲分析
        3.3.5 由正電介導的正電磁性材料與細胞結(jié)合—SEM形貌分析
        3.3.6 材料的毒理性分析
        3.3.7 細胞與材料的相互作用—細胞切片TEM分析
        3.3.8 0D和2D正電磁性材料對細胞形態(tài)的影響
    3.4 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
攻讀碩士期間取得的學術(shù)成果
致謝



本文編號:2935556

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