本文關(guān)鍵詞：PLGA微球的制備及其作為腫瘤藥物遞送載體的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：人參皂苷Rg3(Gs-Rg3)是存在于天然藥物人參中的一種四環(huán)三萜皂苷,具有多方面的藥理作用,如抗腫瘤、提高免疫、促進(jìn)記憶、抗血管增生等。但是,通過(guò)對(duì)人參皂苷Rg3的藥代動(dòng)力學(xué)研究發(fā)現(xiàn),Rg3口服之后吸收快,代謝快,且血液濃度很低,使其藥物利用率降低。聚乳酸-羥基乙酸共聚物(poly(lactic-co-glycolic acid), PLGA)是一種可降解的高分子有機(jī)化合物,具有良好的生物相容性、安全性和靶向性修飾等優(yōu)點(diǎn),其制備成納米微球后,隨著其在體內(nèi)的逐漸降解,可以釋放出其中包載的藥物,實(shí)現(xiàn)緩慢釋藥,達(dá)到長(zhǎng)效給藥的目的,是一種良好的藥物遞送載體。 本論文第一部分旨在探究PLGA/Rg3緩釋微球的制備工藝和體外抑瘤性能,通過(guò)In-situ S/O/W方法制備PLGA/Rg3緩釋微球,改變微球的制備條件包括Rg3溶液濃度、超聲功率以及超聲時(shí)間來(lái)制備包載Rg3的微球。掃描電鏡觀察微球形狀及表面形態(tài),測(cè)定微球包封率及體外釋放特性,并采用MTT法檢測(cè)空白納米微球以及Rg3緩釋微球?qū)θ烁伟┘?xì)胞HepG2的體外增殖抑制作用。 掃描電鏡圖片顯示出通過(guò)乳化溶劑揮發(fā)法制備的微球形態(tài)完整,大小較為均勻。藥物包封率可達(dá)到68%。在PBS中測(cè)定的體外釋放曲線結(jié)果表明,微球能夠在40d內(nèi)持續(xù)釋放其中包載的Rg3。 MTT結(jié)果顯示,在體外實(shí)驗(yàn)中,隨著PLGA/Rg3微球作用時(shí)間的延長(zhǎng)和微球濃度的增加,HepG2細(xì)胞的存活率呈現(xiàn)下降趨勢(shì),具有時(shí)間和劑量依賴性,而且比Rg3藥物直接作用于細(xì)胞的抑瘤作用更為顯著。 殼聚糖(chitosan,CS)是一種具有良好生物吸附性的堿性多糖,由于其分子結(jié)構(gòu)中帶正電荷,可與帶負(fù)電荷的黏膜相互作用。因此,其修飾在PLGA微球表面時(shí)可提高其對(duì)細(xì)胞的藥物遞送率。白喉毒素(diphtheria toxin, DT)是白喉?xiàng)U菌產(chǎn)生的一種外毒素,它及其突變體(DT389)對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有殺傷作用,可以用于腫瘤治療。本課題組已經(jīng)探索了PLGA/DT389微球的制備工藝及其抑瘤性能。 本論文第二部分旨在研究殼聚糖的表面修飾對(duì)PLGA/DT389微球抑瘤性能的影響,通過(guò)W/O/W乳化溶劑揮發(fā)法制備PLGA/DT389-CS微球,改變外水相中殼聚糖濃度制備表面吸附不同質(zhì)量殼聚糖的PLGA/DT389微球,MTT法檢測(cè)其對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2體外增殖的抑制作用。 MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,隨著制備微球時(shí)外水相殼聚糖濃度的增加,HepG2細(xì)胞的存活率呈現(xiàn)下降趨勢(shì),具有時(shí)間和劑量依賴性,表明殼聚糖對(duì)PLGA微球的藥物遞送作用具有增強(qiáng)效果。 總之,本實(shí)驗(yàn)采用In-situ S/O/W法制備PLGA/Rg3微球,W/O/W乳化溶劑揮發(fā)法制備PLGA/DT389-CS微球,使用掃描電子顯微鏡觀察其形狀和表面形態(tài),并測(cè)定包封率及體外釋放曲線。MTT結(jié)果表明,PLGA/Rg3和PLGA/DT389-CS微球?qū)epG2細(xì)胞體外增殖有抑制作用。這些微球在癌癥治療方面的應(yīng)用值得進(jìn)一步探究。
【關(guān)鍵詞】：人參皂苷Rg3 PLGA微球 殼聚糖 抑瘤性能
【學(xué)位授予單位】：北京交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R318.08
【目錄】：

• 致謝5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 目錄10-13
• 第一部分 人參皂苷Rg3緩釋微球的制備與體外抑瘤性能的研究13-35
• 1 引言13-17
• 1.1 人參皂苷Rg3(GS-Rg3)在腫瘤治療中的重要應(yīng)用13-14
• 1.2 PLGA納米微球在藥物遞送中的應(yīng)用研究14-16
• 1.3 本課題的研究目的與內(nèi)容16-17
• 2 實(shí)驗(yàn)材料、儀器與試劑配制17-19
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料17
• 2.2 實(shí)驗(yàn)儀器17-18
• 2.3 試劑配制18-19
• 2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)所用試劑配制18
• 2.3.2 其他試劑配制18-19
• 3 實(shí)驗(yàn)方法19-23
• 3.1 Rg3溶液配制19
• 3.1.1 溶劑選擇19
• 3.1.2 S/O兩相臨界析出比的考察19
• 3.2 PLGA/Rg3緩釋微球的制備及其性質(zhì)測(cè)定19-20
• 3.2.1 乳化溶劑揮發(fā)法制備PLGA微球19
• 3.2.2 測(cè)定PLGA微球表面形態(tài)19-20
• 3.2.3 測(cè)定PLGA/Rg3微球包封率20
• 3.2.4 測(cè)定PLGA/Rg3微球體外釋放曲線20
• 3.3 PLGA/Rg3緩釋微球體外抑瘤性能的研究(MTT法)20-23
• 3.3.1 細(xì)胞復(fù)蘇20-21
• 3.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)21
• 3.3.3 細(xì)胞凍存21-22
• 3.3.4 MTT法測(cè)定空白PLGA微球毒性22
• 3.3.5 PLGA/Rg3微球體外抑瘤活性測(cè)定(MTT法)22-23
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-32
• 4.1 PLGA/Rg3微球的性質(zhì)23-27
• 4.1.1 PLGA/Rg3微球的表面形態(tài)23-25
• 4.1.2 PLGA/Rg3微球的包封率及控釋曲線25-27
• 4.2 PLGA/Rg3微球體外抑瘤活性27-32
• 4.2.1 空白PLGA微球的細(xì)胞毒性27-28
• 4.2.2 PLGA/Rg3緩釋微球的體外抑瘤活性28-32
• 5 討論32-34
• 5.1 微球制備工藝的探索32-33
• 5.1.1 S/O體積比對(duì)微球成球的影響32
• 5.1.2 超聲功率對(duì)微球成球的影響32-33
• 5.2 微球體外控釋33
• 5.3 PLGA納米微球毒性33
• 5.4 PLGA/Rg3緩釋微球毒性33-34
• 6 結(jié)論34-35
• 第二部分 表面修飾殼聚糖的PLGA微球緩釋性能及體外抑瘤性能的研究35-53
• 1 引言35-37
• 1.1 白喉毒素PLGA微球在腫瘤治療中的應(yīng)用35
• 1.2 殼聚糖在藥物遞送載體中的應(yīng)用35-36
• 1.3 本課題的研究目的與內(nèi)容36-37
• 2 實(shí)驗(yàn)材料、儀器與試劑配制37-41
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料37
• 2.2 實(shí)驗(yàn)儀器37-38
• 2.3 試劑配制38-41
• 2.3.1 細(xì)菌培養(yǎng)所用試劑配制38
• 2.3.2 質(zhì)粒大提試劑配制38-39
• 2.3.3 細(xì)胞培養(yǎng)所用試劑配制39-40
• 2.3.4 其他試劑配制40-41
• 3 實(shí)驗(yàn)方法41-45
• 3.1 PLGA/DT_(389)-CS微球的制備及其性質(zhì)測(cè)定41-43
• 3.1.1 乳化溶劑揮發(fā)法制備PLGA/DT_(389)-CS微球41-42
• 3.1.2 測(cè)定PLGA/DT_(389)-CS微球包封率42
• 3.1.3 測(cè)定PLGA/DT_(389)-CS微球體外釋放曲線42-43
• 3.2 PLGA/DT_(389)-CS緩釋微球體外抑瘤性能的研究(MTT法)43-45
• 3.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇43
• 3.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)43-44
• 3.2.3 細(xì)胞凍存44
• 3.2.4 PLGA/DT_(389)-CS微球體外抑瘤活性測(cè)定(MTT法)44-45
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果45-51
• 4.1 PLGA/DT_(389)-CS微球的性質(zhì)45-46
• 4.1.1 PLGA/DT_(389)-CS的包封率45
• 4.1.2 PLGA/DT_(389)-CS微球體外釋放曲線45-46
• 4.2 PLGA/DT_(389)-CS微球體外抑瘤活性46-51
• 4.2.1 PLGA/DT_(389)-CS微球的細(xì)胞毒性46-48
• 4.2.2 不同殼聚糖含量的PLGA/DT_(389)-CS微球的細(xì)胞毒性48-51
• 5 討論51-52
• 5.1 殼聚糖(CS)對(duì)微球性能的影響51
• 5.2 殼聚糖(CS)對(duì)微球體外抑瘤性能的影響51-52
• 6 結(jié)論52-53
• 參考文獻(xiàn)53-56
• 附錄A56-57
• 作者簡(jiǎn)歷57-59
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集59

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

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  本文關(guān)鍵詞：PLGA微球的制備及其作為腫瘤藥物遞送載體的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：273970