發(fā)布時(shí)間：2018-07-16 19:49

【摘要】：目的:明確生物活性玻璃(bioactive glass,BG)和牙本質(zhì)浸提蛋白(extracted dentin proteins,EDP)對(duì)人牙髓細(xì)胞增殖、成牙本質(zhì)向分化、礦化的作用。方法:采用酶消化法培養(yǎng)牙髓細(xì)胞,傳代至第4代用于實(shí)驗(yàn)。分別用含BG-EDP浸提液、BG浸提液、EDP浸提液的達(dá)爾伯克必需基本培養(yǎng)基(Dulbecco’s minimum essential medium,DMEM)培養(yǎng)牙髓細(xì)胞,對(duì)照組為DMEM培養(yǎng)組;通過(guò)細(xì)胞活性噻唑藍(lán)比色法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性檢測(cè)及real-time PCR檢測(cè)細(xì)胞成牙本質(zhì)向分化能力,茜素紅鈣化結(jié)節(jié)染色及氯化十六烷基吡啶半定量分析檢測(cè)細(xì)胞礦化能力。結(jié)果:BG-EDP組3、7、9 d時(shí)(光密度值1.36±0.06、2.52±0.20、2.72±0.29)能夠增強(qiáng)人牙髓細(xì)胞增殖活性,同BG組(光密度值1.20±0.26、2.33±0.26、2.50±0.30)、EDP組(光密度值1.13±0.15、2.10±0.13、2.38±0.22)和對(duì)照組(光密度值0.84±0.17、1.84±0.18、1.95±0.19)比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。7 d時(shí),BG-EDP組ALP活性與EDP組、對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,分化相關(guān)基因(DSPP、DMP-1)表達(dá)無(wú)明顯升高。14 d時(shí),BG-EDP組ALP活性升高(56.67±1.83),顯著高于EDP組(41.98±9.71)及對(duì)照組(30.82±6.70),P0.05,但同BG組(56.29±6.20)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);BG-EDP組DSPP表達(dá)量明顯升高(5.79±1.94),顯著高于BG組(2.62±0.46)、EDP組(2.66±1.06)及對(duì)照組(1.84±0.76),P0.05;BG-EDP組DMP-1表達(dá)升高(3.87±1.87),略高于BG組(1.89±0.90)、EDP組(2.38±1.04)和對(duì)照組(2.25±0.93),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。誘導(dǎo)2周后,BG-EDP組形成較多礦化結(jié)節(jié),氯化十六烷基吡啶半定量分析顯示BG-EDP組鈣化量最高(0.27±0.01)。結(jié)論:同單純的BG及EDP相比,BG-EDP復(fù)合后具有更強(qiáng)的促進(jìn)人牙髓細(xì)胞的增殖、成牙本質(zhì)向分化、礦化作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of bioactive glassglass (BG) and dentin extraction protein (extracted dentin proteinsen on the proliferation, differentiation and mineralization of human dental pulp cells. Methods: dental pulp cells were cultured by enzyme digestion. Dental pulp cells were cultured in Dulbeccos minimum essential mediumentum (DMEM) medium containing BG-EDP extract and BG extract, respectively, and the proliferation of dental pulp cells was detected by cell activity thiazolyl blue colorimetry. The activity of alkaline phosphatase (ALP) and the ability of odontoblast differentiation were detected by real-time, alizarin red calcified nodule staining and semi-quantitative analysis of cetylpyridine chloride. Results the proliferation activity of human dental pulp cells was significantly increased in the BG-EDP group (light density 1.36 鹵0.06 鹵2.52 鹵0.202.72 鹵0.29) on the 9th day (optical density 1.20 鹵0.262.33 鹵0.260.50 鹵0.30). The ALP activity in the BG-EDP group was significantly higher than that in the EDP group (optical density 1.13 鹵0.152.10 鹵0.132.38 鹵0.22) and the control group (0.84 鹵0.17 鹵1.84 鹵0.18 鹵1.95 鹵0.19). The ALP activity in the BG-EDP group was significantly higher than that in the EDP group on the 7th day (P 0.05). There was no significant difference between the control group and the control group. The activity of ALP in BG-EDP group (56.67 鹵1.83) was significantly higher than that in EDP group (41.98 鹵9.71) and control group (30.82 鹵6.70) (P0.05), but there was no significant difference between BG-EDP group and BG group (56.29 鹵6.20) (P0.05). The expression of DSPP in BG-EDP group was significantly higher than that in BG group (5.79 鹵1.94), significantly higher than that in BG group (2.62 鹵0.46). DMP-1 expression in BG-EDP group (2.66 鹵1.06) and control group (1.84 鹵0.76) increased (3.87 鹵1.87), slightly higher than that in BG group (2.38 鹵1.04) and control group (2.25 鹵0.93), but there was no significant difference (P0.05). After 2 weeks of induction, more mineralized nodules were formed in BG-EDP group. The results of semi-quantitative analysis of cetylpyridine chloride showed that the highest amount of calcification was found in BG-EDP group (0.27 鹵0.01). Conclusion: compared with BG and EDP alone, BG-EDP can promote the proliferation, dentin differentiation and mineralization of human dental pulp cells.
【作者單位】： 北京大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院·口腔醫(yī)院牙體牙髓科口腔數(shù)字化醫(yī)療技術(shù)和材料國(guó)家工程實(shí)驗(yàn)室口腔數(shù)字醫(yī)學(xué)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(51372005)資助~~
【分類(lèi)號(hào)】：R783.1

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本文編號(hào)：2127492