膠原納米復合膜的研制及其引導骨再生的初步研究
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《浙江大學》 2015年
殼聚糖—膠原納米復合膜的研制及其引導骨再生的初步研究
高波
【摘要】:目的 引導骨再生(Guided Bone Regeneration,GBR)作為一種有效的骨增量技術(shù),已被廣泛用于臨床,其中屏障膜的性能是決定療效的關(guān)鍵。本實驗以殼聚糖和膠原為材料,采用靜電紡絲技術(shù)制備納米纖維膜,對其成分結(jié)構(gòu)及生物相容性檢測;初步評級納米纖維膜與凍干膜聯(lián)合應(yīng)用于引導骨缺損再生的效果。 方法1)、對殼聚糖、膠原、聚環(huán)氧乙烷(PEO)三者不同配比混合液的可紡性研究,制備殼聚糖-膠原納米纖維膜;通過戊二醛蒸汽交聯(lián),獲得結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的納米纖維膜。 2)、通過掃描電鏡(SEM)、傅里葉紅外光譜(FT-IR)分析殼聚糖-膠原納米纖維膜交聯(lián)前后的結(jié)構(gòu)及成分變化;通過細胞毒性實驗及細胞體外生長實驗,評估納米纖維膜的生物相容性。 3)、殼聚糖-膠原混合液序列冷凍,經(jīng)真空低溫干燥獲得多孔凍干膜;常溫機械加壓處理后,進行拉伸強度檢測。 4)、構(gòu)建SD大鼠臨界顱骨缺損模型,應(yīng)用殼聚糖-膠原納米纖維膜和凍干膜雙層膜、Bio-gide膜、凍干膜覆蓋骨缺損,通過影像學及組織學方法評價其引導骨再生的效果。 結(jié)果 1)、當PEO濃度為3.5%時,殼聚糖為1%,膠原為0~6%或殼聚糖為1.5%,膠原為0~3.5%,三者的混合液具有良好的紡絲性,電紡制備的納米纖維結(jié)構(gòu)均一、表面光滑,且通過連續(xù)電紡可制備具有一定厚度的納米纖維膜。 2)、經(jīng)過戊二醛蒸汽交聯(lián),納米纖維膜在水中的穩(wěn)定性明顯增加,同時SEM觀察發(fā)現(xiàn)交聯(lián)后的纖維直徑變大。 3)、MTT實驗結(jié)果顯示殼聚糖-膠原納米纖維膜無明顯細胞毒性,并可促進細胞早期快速增殖;SEM觀察發(fā)現(xiàn)納米纖維膜能為細胞的快速附著、增殖提供良好的微環(huán)境。 4)、殼聚糖-膠原凍干膜加壓處理后,拉伸強度由0.69+0.28MPa增至11.9+2.9MPa;彈性模量達到192.2+39MPa,基本滿足了臨床應(yīng)用的強度要求。 5)、大鼠顱骨缺損再生實驗中,雙層膜和Bio-gide膜覆蓋組的新骨面積百分比分別為43.1±1.49%和41.36±2.6%,其骨再生效果明顯優(yōu)于單純凍干膜和空白對照組。 結(jié)論 通過靜電紡絲法制備的殼聚糖-膠原納米纖維膜具有良好的生物相容性,能為細胞生長增殖提供理想的微環(huán)境;納米纖維膜和凍干膜雙層屏障膜具有良好的引導骨再生能力。
【關(guān)鍵詞】:
【學位授予單位】:浙江大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R318.08
【目錄】:
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本文編號:163711
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