發(fā)布時間：2021-12-17 03:26

　　背景近年來,損傷腦組織的修復一直是國內(nèi)外研究的重點與難點。研究發(fā)現(xiàn)谷氨酸可以促進神經(jīng)干細胞（NSC:Neural Stem Cells）的增殖與分化,為損傷腦組織的修復提供了新的理論基礎(chǔ)和思路。腦梗死及腦組織缺血損傷后會導致細胞凋亡,從而使大量谷氨酸（glutamic acid）外流,引起局部谷氨酸升高。雖然濃度升高的谷氨酸對組織有毒害作用,但是一定濃度的谷氨酸卻可以促進NSC的增殖與分化。隨著研究的不斷深入,我們發(fā)現(xiàn)谷氨酸是通過其受體及Shh（sonic hedgehog）信號通路來促進NSC的增殖和分化。和以往的細胞學角度的研究相比,近年來不斷進步與完善的分子生物學技術(shù)為我們提供新的研究方法和思路。在本文中,我們從分子層面深入地對谷氨酸及其受體及Shh （sonic hedgehog）信號通路介導的NSC的增殖和分化進行了研究。目的體外培養(yǎng)3日齡SD大鼠海馬區(qū)原代神經(jīng)干細胞,并使用傳代三代以上神經(jīng)干細胞來篩選目的基因最適濃度,向三代神經(jīng)干細胞中加入目的基因,上調(diào)和沉默Shh基因后觀察神經(jīng)干細胞中谷氨酸刺激下Nesting的表達,Shh信號通路對神經(jīng)干細胞增殖能力的影響,同時阻斷上游... 

【文章來源】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院河南省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１神經(jīng)干細胞生長情況ｌＯＯＸ??

我們將不同分組的病毒質(zhì)粒依次進行ＲＮＡ提取，為了驗證病毒質(zhì)粒??的準確性，將各組進行瓊脂糖電泳鑒定，鑒定結(jié)果表明各組病毒質(zhì)粒均??能正常表達。（圖２）??２３??

＞０．０５）；?Ｓｈｈ－ｓｈＲＮＡ組Ｓｈｈ蛋白表達明顯受爵Ｊ抑制（尸＜０．０５），而Ｎｅｓｔｉｎ蛋白表達未??受到明顯影響（戶＞０．０５）?；?ＮＣ－ｓｈＲＮＡ組中Ｓｈｈ、Ｎｅｓｔｉｎ蛋白檢測結(jié)果顯示，Ｓｈｈ??及Ｎｅｓｔｉｎ蛋白表達均明顯增加（戶＜０．０５）。（圖７）??ＧＡＰＤＨ?ｉＭＭ?ａｍｉ?ｎｉｌ?ｉｎｉ?４＾＾’?誦??ｒｎｍｍ?線公拳潮ｐｉｔｏ?１７邸??－?＇??Ｎｅｓｔｉｎ?善凌順誦??務?游?滬??＊難?＃?滬??－?＃?如ｗ－－——??滲?垃??文５?ｆ??Ｕｎ?’?１＇??銀?效＊?巧加ｃ傑店?欽卸據(jù)獻?竊材艦ｊｔｉ萊睞??爲＾？州。??圖７谷氨酸刺激下Ｓ化及Ｎｅｓｔｉｎ表達量均升高，當ＮＭＤＡ民１抑制存在化Ｓ化及Ｎｅ巧ｉｎ表達??量均無明顯變化，當Ｓｈｈ被ＲＮＡｉ沉默后Ｓｈｈ?ｍＲＮＡ表達量明顯下降；??２９??


本文編號：3539324