本文選題：他卡西醇 + 黑素細(xì)胞��； 參考：《暨南大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：目的 探討他卡西醇對體外培養(yǎng)的人表皮黑素細(xì)胞增殖、黏附、遷移的調(diào)控作用及其對c-kitmRNA相對表達(dá)量的影響。通過上述實(shí)驗(yàn)，為他卡西醇在白癜風(fēng)復(fù)色治療中的作用機(jī)制提供一定的理論及實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。 方法 用不同濃度的他卡西醇干預(yù)體外培養(yǎng)的人表皮黑素細(xì)胞，采用XTT法分別檢測培養(yǎng)24h、48h及72h后黑素細(xì)胞的增殖活性，用纖維連接蛋白包被細(xì)胞培養(yǎng)板檢測培養(yǎng)72h后黑素細(xì)胞的黏附率，用Transwell微孔膜法檢測培養(yǎng)24h后黑素細(xì)胞在纖維連接蛋白上的遷移情況，經(jīng)RT-PCR法檢測培養(yǎng)72h后黑素細(xì)胞c-kit mRNA相對表達(dá)量。 結(jié)果 1.他卡西醇在濃度為10-10~10-6mol/l范圍內(nèi)對人表皮黑素細(xì)胞增殖無明顯抑制作用。當(dāng)濃度為10-8mol/l的他卡西醇與黑素細(xì)胞共同培養(yǎng)48h、72h，與對照組（不加藥僅添加完全培養(yǎng)基）相比，能顯著促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P分別為0.029、0.044）。 2.他卡西醇濃度為10-8~10-7mol/l范圍內(nèi)與對照組（不加藥僅添加完全培養(yǎng)基）相比，可顯著促進(jìn)人表皮黑素細(xì)胞在纖維連接蛋白（FN）上的黏附，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P分別為0.003、0.007）。 3.依據(jù)前面細(xì)胞增殖活性的結(jié)果，各濃度他卡西醇對人表皮黑素細(xì)胞無明顯毒性反應(yīng)，，選擇共同培養(yǎng)24h的細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)的遷移實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，濃度為10-9~10-8mol/l的他卡西醇與對照組（不加藥僅添加完全培養(yǎng)基）相比，在培養(yǎng)24h時能顯著促進(jìn)黑素細(xì)胞遷移（P分別為0.003、0.000）。 4.經(jīng)RT-PCR半定量分析結(jié)果表明，濃度為10-9~10-7mol/l的他卡西醇與對照組（不加藥僅添加完全培養(yǎng)基）相比，在培養(yǎng)72h均能顯著增加黑素細(xì)胞c-Kit mRNA的相對表達(dá)量，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P均為0.000）。 結(jié)論 1.他卡西醇能夠促進(jìn)體外培養(yǎng)的人表皮黑素細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)黑素細(xì)胞在FN上的黏附能力及誘導(dǎo)黑素細(xì)胞在FN上的遷移作用； 2.他卡西醇可部分上調(diào)人表皮黑素細(xì)胞c-kit mRNA的相對表達(dá)量，且c-kit mRNA表達(dá)的變化與黑素細(xì)胞黏附及遷移作用有一定相關(guān)性，他卡西醇可能通過上調(diào)c-kit表達(dá)從而促進(jìn)人表皮黑素細(xì)胞的黏附、遷移。
[Abstract]:Purpose To investigate the effects of tacrazol on the proliferation, adhesion and migration of cultured human epidermal melanocytes and its effect on the relative expression of c-kitmRNA. These experiments provide a theoretical and laboratory basis for the mechanism of tacacicol in the treatment of vitiligo. Method Human epidermal melanocytes were treated with different concentrations of tacoxiol in vitro. The proliferation activity of melanocytes was detected by XTT assay after cultured for 24 h or 72 h, respectively. The adhesion rate of melanocytes after 72 h culture was detected with fibronectin coated cell culture plate, and the migration of melanocytes on fibronectin after 24 h culture was detected by Transwell microporous membrane method. The relative expression of c-kit mRNA in melanocytes was detected by RT-PCR assay after 72 h culture. Result 1. Tacarbazol had no inhibitory effect on the proliferation of human epidermal melanocytes in the range of 10-10~10-6mol/l. When the concentration of 10-8mol/l was cocultured with melanocytes for 48 h or 72 h, the proliferation of melanocytes was significantly increased compared with the control group (without adding only complete medium), with a significant difference (P = 0.029, 0.044, respectively). 2. Compared with the control group (the control group), the concentration of tacoxiol in the range of 10-8~10-7mol/l could significantly promote the adhesion of human epidermal melanocytes to fibronectin (FN). The difference was statistically significant (P = 0.003, P = 0.007, respectively). 3. According to the results of proliferative activity of the former cells, there was no obvious toxic effect on human epidermal melanocytes in each concentration of tacoxiol, and the cells co-cultured for 24 hours were selected for subsequent migration test. The results showed that tacoxiol at the concentration of 10-9~10-8mol/l could significantly promote the migration of melanocytes in 24 hours compared with the control group (without adding only complete medium) (P = 0.003 ~ 0.000). 4. The results of RT-PCR semi-quantitative analysis showed that the relative expression of c-Kit mRNA in melanocytes was significantly increased at 72 h after cultured with 10-9~10-7mol/l, compared with that of the control group (without adding only complete medium), and the difference was statistically significant (P = 0.000). Conclusion 1. Tacrazol could promote the proliferation of human epidermal melanocytes in vitro, enhance the adhesion of melanocytes on FN and induce the migration of melanocytes on FN. 2. The relative expression of c-kit mRNA in human epidermal melanocytes was partly upregulated by tacrazol, and the change of c-kit mRNA expression was related to the adhesion and migration of melanocytes. Tacassicol may promote the adhesion and migration of human epidermal melanocytes by upregulating the expression of c-kit.
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R758.41

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本文編號：1980513