七葉蓮總?cè)瓶诡愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥效及其機(jī)制探究
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【摘要】：類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是世界范圍內(nèi)嚴(yán)重危害公眾健康的全身性自身免疫性疾病,發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,致殘率高。本研究以中藥七葉蓮提取物七葉蓮總?cè)茷檠芯繉?duì)象,從體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)兩方面,考察其抗類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥效學(xué)作用,并初步探討七葉蓮總?cè)瓶诡愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制。本課題的主要研究?jī)?nèi)容包括以下五個(gè)方面:1.采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)考察七葉蓮總?cè)频淖罴烟崛」に?并利用AB-8型大孔吸附樹脂對(duì)七葉蓮總?cè)拼痔嵛镞M(jìn)行純化,考察其最佳純化工藝。研究表明,七葉蓮總?cè)频淖罴烟崛」に嚍橐?5%乙醇為溶劑,料液比1:10,回流提取60min,提取1次。通過(guò)AB-8型樹脂純化七葉蓮總?cè)茖?shí)驗(yàn)可得最佳純化工藝為:以自然pH條件下的樣液上樣,上樣濃度為0.884 mg/mL,最大上樣量6 BV,用8 BV的80%乙醇進(jìn)行洗脫。2.建立小鼠耳廓腫脹,羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)致白細(xì)胞游走急性炎癥模型,考察七葉蓮總?cè)频目寡鬃饔�。研究表�?七葉蓮總?cè)瓶娠@著抑制二甲苯致小鼠耳腫脹程度,并可顯著抑制CMC-Na致白細(xì)胞游走,表明其具有抗急性炎癥作用。3.建立醋酸致小鼠扭體反應(yīng)疼痛模型,考察七葉蓮總?cè)频逆?zhèn)痛作用。結(jié)果證實(shí),七葉蓮總?cè)瓶娠@著抑制醋酸所致的小鼠疼痛反應(yīng),鎮(zhèn)痛作用顯著,較七葉蓮片作用更為明顯。4.建立大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎模型,從佐劑性關(guān)節(jié)炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠足跖腫脹度、關(guān)節(jié)炎評(píng)分、免疫器官系數(shù)變化、血清中細(xì)胞因子以及關(guān)節(jié)滑膜組織中皮質(zhì)醇(Cor)和循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)的水平變化這幾個(gè)方面來(lái)考察七葉蓮總?cè)瓶筊A的作用和機(jī)理。研究表明,七葉蓮總?cè)瓶梢愿纳艫A大鼠的足跖腫脹及多發(fā)性關(guān)節(jié)炎現(xiàn)象,恢復(fù)AA大鼠細(xì)胞免疫功能,并可顯著抑制AA大鼠血清中炎癥因子及滑膜組織中Cor和CIC的分泌,提示這可能是其抗RA作用機(jī)制。5.利用脂多糖(LPS)刺激,建立RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞體外炎癥模型,分別采用ELISA法和Griess法,檢測(cè)巨噬細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子及炎癥介質(zhì)的水平變化,考察七葉蓮總?cè)频捏w外抗炎活性。研究表明,七葉蓮總?cè)颇軌蛟隗w外拮抗LPS誘導(dǎo)的炎癥模型的損傷程度,具有較強(qiáng)的抗炎作用。七葉蓮總?cè)瓶寡祖?zhèn)痛效果顯著,可明顯改善AA大鼠各項(xiàng)炎癥指標(biāo),具有良好的抗RA作用,其抗炎機(jī)制為對(duì)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)平衡的調(diào)節(jié)。
【關(guān)鍵詞】：七葉蓮總?cè)?/strong> 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 抗炎鎮(zhèn)痛 巨噬細(xì)胞 細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】：華僑大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R593.22
【目錄】：
- 摘要3-5
- Abstract5-11
- 第1章 引言11-17
- 1.1 課題的立題依據(jù)及意義11
- 1.2 七葉蓮藥理作用研究進(jìn)展11-16
- 1.2.1 化學(xué)成分12-13
- 1.2.2 藥理作用13-15
- 1.2.3 展望15-16
- 1.3 研究思路16-17
- 第2章 七葉蓮總?cè)频奶崛」に嚰凹兓に?/span>17-27
- 2.1 引言17
- 2.2 實(shí)驗(yàn)材料17-18
- 2.2.1 實(shí)驗(yàn)藥品17
- 2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑17
- 2.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器17-18
- 2.3 實(shí)驗(yàn)方法18-21
- 2.3.1 七葉蓮總?cè)铺崛》椒ǖ目疾?/span>18-19
- 2.3.2 七葉蓮總?cè)萍兓に嚨目疾?/span>19-21
- 2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-25
- 2.4.1 七葉蓮總?cè)铺崛」に嚱Y(jié)果分析21-22
- 2.4.2 上樣液濃度對(duì)吸附性能的影響22-23
- 2.4.3 上樣液pH值對(duì)吸附性能的影響23
- 2.4.4 最大上樣量的考察23-24
- 2.4.5 最適洗脫劑濃度的考察24
- 2.4.6 洗脫劑用量的考察24-25
- 2.4.7 驗(yàn)證試驗(yàn)25
- 2.5 討論25-27
- 第3章 七葉蓮總?cè)频目寡祖?zhèn)痛作用27-51
- 3.1 引言27
- 3.2 實(shí)驗(yàn)材料27-28
- 3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物27
- 3.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑27-28
- 3.2.3 實(shí)驗(yàn)儀器28
- 3.3 實(shí)驗(yàn)方法28-33
- 3.3.1 七葉蓮總?cè)茖?duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響28-29
- 3.3.2 七葉蓮總?cè)茖?duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響29
- 3.3.3 七葉蓮總?cè)茖?duì)CMC-Na致白細(xì)胞游走的影響29
- 3.3.4 七葉蓮總?cè)茖?duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的作用29-32
- 3.3.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析32-33
- 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-45
- 3.4.1 七葉蓮總?cè)茖?duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響33
- 3.4.2 七葉蓮總?cè)茖?duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響33-34
- 3.4.3 七葉蓮總?cè)茖?duì)CMC-Na致白細(xì)胞游走的影響34
- 3.4.4 七葉蓮總?cè)茖?duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎的作用34-45
- 3.5 討論45-51
- 3.5.1 七葉蓮總?cè)茖?duì)急性炎癥的作用45
- 3.5.2 七葉蓮總?cè)奇?zhèn)痛活性的研究45-46
- 3.5.3 七葉蓮總?cè)茖?duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的作用46-51
- 第4章 七葉蓮總?cè)茖?duì)LPS誘發(fā)RAW264.7 巨噬細(xì)胞炎癥模型的作用51-59
- 4.1 引言51
- 4.2 實(shí)驗(yàn)材料51-52
- 4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑51-52
- 4.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器52
- 4.3 實(shí)驗(yàn)方法52-54
- 4.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)52
- 4.3.2 七葉蓮總?cè)茖?duì)RAW264.7 巨噬細(xì)胞活力的影響52-53
- 4.3.3 七葉蓮總?cè)茖?duì)LPS誘導(dǎo)RAW264.7 巨噬細(xì)胞炎癥介質(zhì)NO的影響53
- 4.3.4 七葉蓮總?cè)茖?duì)LPS誘導(dǎo)RAW264.7 巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子分泌的影響53-54
- 4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果54-57
- 4.4.1 七葉蓮總?cè)茖?duì)RAW264.7 巨噬細(xì)胞活力的影響54
- 4.4.2 七葉蓮總?cè)茖?duì)LPS誘導(dǎo)RAW264.7 巨噬細(xì)胞釋放NO的影響54-55
- 4.4.3 七葉蓮總?cè)茖?duì)LPS誘導(dǎo)RAW264.7 巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子分泌的影響55-57
- 4.5 討論57-59
- 第5章 總結(jié)與展望59-61
- 5.1 結(jié)論59
- 5.2 展望59-61
- 參考文獻(xiàn)61-67
- 致謝67-69
- 個(gè)人簡(jiǎn)歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究進(jìn)展69
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，本文編號(hào)：988847
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