本文關(guān)鍵詞：促甲狀腺激素對男性骨代謝的影響及其機(jī)制的研究

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【摘要】：骨質(zhì)疏松癥在中老年人群中發(fā)病率越來越高,但其具體的發(fā)病機(jī)制仍未十分明確。近幾年研究發(fā)現(xiàn),促甲狀腺激素(TSH)可能直接影響骨代謝。本研究總共分為兩部分：臨床分析及體外實(shí)驗(yàn),針對TSH對男性骨代謝的影響及其進(jìn)一步作用于成骨細(xì)胞的可能機(jī)制進(jìn)行了相關(guān)探討。第一部分臨床分析：甲狀腺功能正常男性骨密度與血清TSH水平的關(guān)系目的：分析甲狀腺功能正常男性血清TSH水平與骨密度(BMD)變化的關(guān)系。方法：以2009年10月-11月在濟(jì)南市陽光舜城社區(qū)調(diào)查的年齡在20-75歲之間731例男性常住居民為研究對象(居住年限5年),嚴(yán)格按照排除標(biāo)準(zhǔn)納入,共有114名男性納入分析。采用羅氏檢測血清FT3、FT4、TSH,應(yīng)用雙能X線方法測量受檢者前臂BMD。記錄并整理研究對象基本資料,并分別根據(jù)TSH和BMD水平,將研究對象進(jìn)行分組,分析比較TSH與BMD的關(guān)系。結(jié)果：低TSH組與高TSH組兩組對象在年齡、BMI、FT3、FT4上相匹配,TSH水平與BMD呈正相關(guān),隨血清TSH濃度的升高,甲功正常男性BMD也隨之升高。結(jié)論：甲狀腺功能正常男性血清中TSH與BMD呈正相關(guān),表明TSH能夠直接影響骨代謝。第二部分體外實(shí)驗(yàn)：TSH對原代成骨細(xì)胞增殖及分化的影響目的：觀察在大鼠原代成骨細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中,TSH對成骨細(xì)胞的增殖以及分化過程中相關(guān)基因mRNA、蛋白表達(dá)的影響。方法：取新生SD大鼠顱骨,采用改良二次酶消化法體外分離培養(yǎng)原代成骨細(xì)胞并進(jìn)行鑒定,加入不同濃度(1、10、100 mu/m1)TSH進(jìn)行處理,分別于加入處理后第12、24、48 h進(jìn)行MTT比色試驗(yàn),觀察對其增殖的影響。利用Real-TimePCR檢測成骨細(xì)胞分化及調(diào)節(jié)相關(guān)基因堿性磷酸酶(ALP)、I型膠原(COI1)、骨形成蛋白(BMP2)、Runx2 mRNA的表達(dá)變化；應(yīng)用ELISA法檢測TSH對ALP、BMP2蛋白表達(dá)的影響；應(yīng)用Western blot方法檢測TSH對成骨細(xì)胞分化過程中關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子Runx2、Osterix蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果：1.經(jīng)鑒定,體外分離提取的細(xì)胞為原代成骨細(xì)胞。2.在TSH為100mu/ml時(shí)對成骨細(xì)胞的增殖具有促進(jìn)作用并且作用最強(qiáng),TSH為10mu/m1時(shí)對其增殖也有一定的促進(jìn)作用,但弱于前者,TSH為lmu/ml對成骨細(xì)胞的增殖無促進(jìn)作用。3. RT-PCR表明與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組OB分化調(diào)節(jié)相關(guān)基因ALP、C0I1、BMP2、Runx2mRNA表達(dá)呈增加趨勢,并且不同濃度TSH可劑量依賴性增加這些基因mRNA表達(dá)。4. ELISA結(jié)果示：與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組ALP、BMP2蛋白表達(dá)水平增高,與RT-PCR結(jié)果相一致。5. Western-Blot結(jié)果示：與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組隨著TSH濃度增加Runx2、 Osterix表達(dá)呈增高趨勢。結(jié)論：TSH可以促進(jìn)原代成骨細(xì)胞的增殖及分化,這也可能是TSH促進(jìn)由成骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨形成的部分作用機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：骨代謝 TSH BMD 成骨細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R580
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 符號說明10-11
• 第一部分 甲狀腺功能正常男性密度與血清促甲狀腺技術(shù)水平的關(guān)系11-20
• 前言11-13
• 資料和方法13-14
• 結(jié)果14-16
• 討論16-19
• 結(jié)論19-20
• 第二部分 TSH對原代成骨細(xì)胞增殖及分化的影響20-50
• 前言20-23
• 資料和方法23-38
• 結(jié)果38-44
• 討論44-49
• 結(jié)論49-50
• 參考文獻(xiàn)50-57
• 致謝57-58
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文58-59
• 學(xué)位論文評閱及答辯情況表59

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10 沈曉o，

本文編號：958789