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脂聯(lián)素亞型及濃度對(duì)類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞促炎作用的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-09-29 19:23

  本文關(guān)鍵詞:脂聯(lián)素亞型及濃度對(duì)類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞促炎作用的影響


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【摘要】:目的:1.明確不同亞型脂聯(lián)素對(duì)類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞分泌相關(guān)炎癥因子的作用是否存在差異;2.探討同一亞型脂聯(lián)素的濃度與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞分泌炎癥因子作用程度的關(guān)系。方法:獲取明確診斷為類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的患者及健康人的關(guān)節(jié)滑膜組織,分離培養(yǎng)出類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞(RASF)及健康人滑膜成纖維細(xì)胞(HFLS);分別用Native、HMW/MMW、Trimeric三種脂聯(lián)素以25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml三個(gè)濃度刺激上述兩種滑膜成纖維細(xì)胞15小時(shí),收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液;應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)分別檢測(cè)其中基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-3、MMP-10、腫瘤壞死因子(TNF)-α、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)及前列腺素E2(PGE2)的濃度。結(jié)果:三種脂聯(lián)素在25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml濃度水平均可刺激RASF和HFLS分泌MMP-3、MMP-10、TNF-α、VEGF、PGE2的水平升高,且與未刺激細(xì)胞相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.01)。與相同濃度脂聯(lián)素刺激的HFLS相比,脂聯(lián)素刺激后RASF分泌炎癥因子的水平明顯升高,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。各亞型脂聯(lián)素刺激RASF分泌炎癥因子的作用隨濃度增加而增大,并以HMW/MMW亞型作用最顯著。結(jié)論:1.三種脂聯(lián)素可能通過(guò)刺激RASF分泌MMP-3、MMP-10、TNF-α、VEGF、PGE2發(fā)揮促炎作用,并且HMW/MMW亞型的作用最強(qiáng);2.由于HMW/MMW亞型脂聯(lián)素可導(dǎo)致RASF分泌MMP-3、MMP-10、TNF-α、VEGF、PGE2增多,因此提示HMW/MMW亞型脂聯(lián)素在類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)內(nèi)基質(zhì)破壞及滑膜血管生成等發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用;3.降低關(guān)節(jié)液中脂聯(lián)素濃度,特別是HMW/MMW亞型,可能是治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的新策略。
【關(guān)鍵詞】:脂聯(lián)素 亞型 類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎 滑膜成纖維細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R593.22
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 英文縮略詞表10-11
  • 第1章 引言11-13
  • 第2章 文獻(xiàn)綜述13-19
  • 2.1 類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎與滑膜成纖維細(xì)胞13-14
  • 2.2 脂聯(lián)素14-19
  • 2.2.1 脂聯(lián)素及其亞型的發(fā)現(xiàn)14-15
  • 2.2.2 脂聯(lián)素受體15-16
  • 2.2.3 RA患者的脂聯(lián)素水平16-17
  • 2.2.4 脂聯(lián)素在RA中的作用17-19
  • 第3章 材料與方法19-28
  • 3.1 主要標(biāo)本19-20
  • 3.2 主要試劑20
  • 3.3 主要儀器20-21
  • 3.4 主要試劑的配置21
  • 3.4.1 DMEM培養(yǎng)基的配置21
  • 3.4.2 PBS的配置21
  • 3.4.3 脂聯(lián)素的溶解21
  • 3.5 實(shí)驗(yàn)方法21-28
  • 3.5.1 滑膜成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)21-24
  • 3.5.1.1 RASF和HLFS的原代培養(yǎng)22
  • 3.5.1.2 RASF和HLFS的傳代培養(yǎng)22-23
  • 3.5.1.3 細(xì)胞凍存23
  • 3.5.1.4 細(xì)胞復(fù)蘇23-24
  • 3.5.2 脂聯(lián)素刺激RASF及HLFS24
  • 3.5.3 酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)炎癥因子24-27
  • 3.5.3.1 MMP-10的檢測(cè)25
  • 3.5.3.2 PGE2的檢測(cè)25-26
  • 3.5.3.3 MMP-3、TNF-α及VEGF的檢測(cè)26-27
  • 3.5.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析27-28
  • 第4章 研究結(jié)果28-35
  • 4.1 不同亞型脂聯(lián)素對(duì)RASF的刺激作用28-31
  • 4.1.1 HMW/MMW亞型脂聯(lián)素對(duì)RASF的刺激作用28-29
  • 4.1.2 Trimeric亞型脂聯(lián)素對(duì)RASF的刺激作用29-30
  • 4.1.3 Native脂聯(lián)素對(duì)RASF的刺激作用30-31
  • 4.2 不同濃度脂聯(lián)素對(duì)RASF的刺激作用31-35
  • 第5章 討論35-38
  • 第6章 結(jié)論38-39
  • 第7章 本研究的創(chuàng)新之處39-40
  • 參考文獻(xiàn)40-54
  • 作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果54-55
  • 致謝55

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本文編號(hào):943793

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