本文關鍵詞：糖尿病足感染與自噬相互作用的初步研究

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【摘要】：目的:1:分析糖尿病足感染(Diabetic foot infection,DFI)與非糖尿病但合并足感染患者的臨床特點。2:通過與非糖尿病足感染患者創(chuàng)面肉芽組織中細胞的自噬相關蛋白表達情況進行比較,探討糖尿病(Diabetes mellitus,DM)對肉芽組織總的細胞自噬及巨噬細胞自噬水平的影響;合并銅綠假單胞菌感染時,對兩組患者的自噬表達有無影響;并且研究缺血對糖尿病足感染患者細胞自噬的影響。方法:1.收集2014年6月-2015年11月于天津醫(yī)科大學代謝病醫(yī)院糖尿病足科住院治療的90例糖尿病足感染患者(糖尿病組)及天津市武警醫(yī)院創(chuàng)傷科住院治療的51例非糖尿病足感染患者(對照組)的臨床資料,分析其一般臨床特點;根據(jù)細菌培養(yǎng)結果及藥敏結果,分析兩組感染細菌的分布特點,比較銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)的檢出率及耐藥情況,以及多重耐藥銅綠假單胞菌(Multi-drug resistant pseudomonas aeruginosa,MDRPA)的檢出率。2.兩組患者足感染創(chuàng)面清創(chuàng)后深部組織取材,將取得的肉芽組織制作石蠟切片,首先進行HE染色觀察比較兩組患者肉芽組織病理學的變化;其次,將兩組患者的組織切片進行免疫組織化學染色,半定量檢測兩組患者肉芽組織內細胞自噬標志性蛋白LC3-II(Microtubule-associated protein1 light chain 3-II)及自噬正調節(jié)蛋白Beclin-1的表達,比較兩組患者肉芽組織中總自噬體的形成情況、兩組患者PA感染后細胞自噬的形成情況及缺血對糖尿病足感染患者細胞自噬的影響;最后,將兩組患者的組織切片行巨噬細胞標記物CD14及自噬體標志蛋白LC3-II的免疫熒光雙染色,定性檢測兩組患者肉芽組織中巨噬細胞的自噬體水平。結果:1.兩組患者臨床資料比較,在一般資料方面:兩組患者年齡、性別、潰瘍面積、體重指數(shù)、高血壓、冠心病、腦血管病、脂質代謝紊亂方面均無統(tǒng)計學差異(P0.05);但糖尿病組患者糖化血紅蛋白值明顯高于對照組(P0.05)。在炎癥指標方面:兩組患者的中性粒細胞百分比及血沉值無明顯的統(tǒng)計學差異(P0.05),但是與對照組相比,糖尿病組患者白細胞計數(shù)明顯降低(P0.05),而C反應蛋白明顯升高(P0.05)。糖尿病組患者共檢出105株病原體,對照組共檢出病原體71株,均以革蘭氏陽性菌感染為主(糖尿病組59.0%,對照組57.7%),且兩組患者感染革蘭氏陽性菌及革蘭氏陰性菌的分布無統(tǒng)計學差異(P0.05),兩組患者感染的革蘭氏陽性菌均以金黃色葡萄球菌為主,革蘭氏陰性菌均以銅綠假單胞菌為主,感染細菌的種類無統(tǒng)計學差異(P0.05)。與對照組相比,DM組患者PA檢出率無差異,但有升高趨勢,PA耐藥率及MDRPA檢出率明顯升高;2.與對照組相比,糖尿病組患者肉芽組織內新生的毛細血管數(shù)目及浸潤的炎癥細胞較少;LC3-II及Beclin-1蛋白陽性著色細胞數(shù)量較少,顏色較淺;與對照組PA感染患者相比,糖尿病組PA感染患者肉芽組織中LC3-II及Beclin-1的表達明顯減弱;與糖尿病非缺血組患者相比,糖尿病缺血組患者創(chuàng)面肉芽組織LC3-II及Beclin-1表達降低;與對照組相比,糖尿病組患者肉芽組織中巨噬細胞內自噬體標志物LC3-II的表達明顯比對照組降低。結論:糖尿病足感染患者多重耐藥銅綠假單胞菌的檢出率及銅綠假單胞菌的耐藥率較高;糖尿病足感染患者創(chuàng)面肉芽組織毛細血管內皮細胞、成纖維細胞及炎癥細胞均可發(fā)生自噬,但自噬水平尤其是巨噬細胞的自噬水平降低;合并銅綠假單胞菌感染時,糖尿病足感染患者創(chuàng)面肉芽組織內細胞自噬水平也降低;糖尿病足感染合并缺血時,糖尿病足感染患者創(chuàng)面肉芽組織內細胞自噬水平降低更加明顯;因此,誘導足創(chuàng)面肉芽組織中的細胞自噬增強可能是治療糖尿病足感染患者的一種新思路。
【關鍵詞】：糖尿病足 感染 自噬 銅綠假單胞菌 巨噬細胞
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-12
• 前言12-16
• 研究現(xiàn)狀、成果12-15
• 研究目的、方法15-16
• 一、糖尿病足感染與非糖尿病足感染患者臨床特點分析16-25
• 1.1 研究對象和方法16-18
• 1.1.1 研究對象16
• 1.1.2 臨床資料的收集16-17
• 1.1.3 診斷標準17-18
• 1.1.4 統(tǒng)計學方法18
• 1.2 結果18-21
• 1.2.1 兩組患者一般臨床資料比較18-19
• 1.2.2 兩組患者感染病原菌的比較19-21
• 1.3 討論21-24
• 1.4 小結24-25
• 二、糖尿病足感染患者自噬表達的研究25-42
• 2.1 實驗材料25-27
• 2.1.1 實驗試劑25
• 2.1.2 實驗儀器25-26
• 2.1.3 常用試劑的配制26-27
• 2.2 實驗方法27-31
• 2.2.1 標本的獲取27
• 2.2.2 石蠟標本的制作27-28
• 2.2.3 HE染色觀察肉芽組織病理學改變28
• 2.2.4 免疫組織化學染色檢測自噬體標志物LC3-II及自噬調節(jié)蛋白Beclin-1的表達28-30
• 2.2.5 免疫熒光雙染色觀察肉芽組織巨噬細胞自噬體標志蛋白LC3-II的表達30
• 2.2.6 統(tǒng)計學方法30-31
• 2.3 實驗結果31-34
• 2.3.1 兩組患者肉芽組織HE染色結果31
• 2.3.2 自噬體標志物LC3-II及自噬調節(jié)蛋白Beclin-1 的免疫組化染色結果.2031-33
• 2.3.3 自噬體標志物LC3-II及巨噬細胞特異性標記物CD14免疫熒光雙染色結果33-34
• 2.4 討論34-41
• 2.4.1 兩組患者肉芽組織病理學的比較35-36
• 2.4.2 兩組患者肉芽組織自噬發(fā)生情況分析36-39
• 2.4.3 兩組患者肉芽組織巨噬細胞自噬發(fā)生情況分析39-41
• 2.5 小結41-42
• 結論42-43
• 參考文獻43-49
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明49-50
• 綜述 2型糖尿病與自噬關系的研究進展50-61
• 綜述參考文獻55-61
• 致謝61-62
• 個人簡歷62

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本文編號：850308