本文關(guān)鍵詞：IgG糖基化修飾在SLE發(fā)病中的意義

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【摘要】：系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種以自身抗原暴露、多種自身抗體產(chǎn)生、補(bǔ)體系統(tǒng)的激活及免疫復(fù)合物沉積為主要環(huán)節(jié)的累及多系統(tǒng)的自身免疫性疾病。由于目前本病的致病原因不明確,近年來伴隨著糖組學(xué)的不斷發(fā)展,證實了免疫球蛋白糖基化修飾參與了自身免疫性疾病的發(fā)病及誘導(dǎo)免疫耐受。目的:探討系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清IgG-Fc段N糖鏈結(jié)構(gòu)的改變與SLE發(fā)病的相關(guān)性。方法:(1)收集50例SLE患者及26例健康孕婦(代表一定程度的免疫耐受狀態(tài))的空腹靜脈血,離心后取上清置于-80℃冰箱保存。10例混合人丙種球蛋白(正常人的血清)。收集所有SLE患者一般情況、臨床特征資料及實驗室檢查結(jié)果,并且根據(jù)SLE疾病活動性指標(biāo)(SLEDAI-2000)對50例SLE患者進(jìn)行臨床分期,評分"f4分為靜止期,評分"g5分為活動期。(2)利用Protein G對血清中總免疫球蛋白進(jìn)行分離純化,經(jīng)過SDS-PAGE驗證后得到IgG,將純化得到的IgG用PNGase酶酶切,經(jīng)過進(jìn)一步的富集與純化得到N-糖鏈,利用凝集素芯片能夠特異性地親和免疫球蛋白(IgG)表面糖鏈的特性,激光掃描檢測凝集素信號測定SLE(靜止期、活動期),孕婦同IVIG的IgG表面糖鏈的結(jié)構(gòu)。(3)對比SLE(活動期,靜止期)與正常妊娠及IVIG的糖基化異常并且分析SLE活動期與靜止期患者血清糖鏈結(jié)構(gòu)的改變與狼瘡疾病活動度及腎損傷實驗指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果:1.SLE患者血清中IgG-Fc段G2型半乳糖(15.92%±2.12%)、核心鹽藻糖(71.76%±1.83%),唾液酸含量(3.05%±0.63%)與IVIG(22.2%±1.3%)(80.43%±1.61%)(8.38%±0.93%)及正常妊娠者(32.81%±1.56%)(85.4%±1.82%)(9.06%±1.89%)的IgG相比明顯降低(P0.05),G0型半乳糖(23.29%±2.54%)及高甘露糖(13.75%±2.27%)含量較IVIG(19.33%±3.35%)(11%±3.86%)及正常妊娠期婦女(14.65%±1.58%)(6.22%±0.77%)明顯增高(P0.05),G1型半乳糖在SLE(46.98%±2.94%),IVIG(48.48%±4.66%),正常妊娠期婦女(46.33%±2.26%)差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2.在SLE活動期患者其血清IgG表面G2型半乳糖(15.42%±3.78%)、唾液酸(2.86%±0.62%)含量較SLE靜止期(17.86%±0.94%)(3.37%±0.52%)患者明顯降低(P0.05),而G0型半乳糖(24.57%±2.21%)及高甘露糖(15.28%±1.05%)含量較SLE靜止期(21.01%±1.08%)(11.04%±0.79%)明顯升高(P0.05),SLE活動期的核心鹽藻糖(71.7%±1.20%)水平與靜止期(71.6%±1.55%)無明顯差異(P0.05)。SLE患者體內(nèi)IgG表面G0型半乳糖含量與SLEDAI評分呈正相關(guān)(r=0.704 P0.000),G2型半乳含量與SLEDAI評分呈負(fù)性相關(guān)(r=-0.792 P0.000),高甘露糖含量與SLEDAI評分呈正相關(guān)(r=0.731 P0.000),唾液酸與SLEDAI評分無明顯相關(guān)性(r=0.004 P0.05)。3.SLE患者體內(nèi)IgG G0型半乳糖(r=0.504 P0.000)、高甘露糖(r=0.571P0.000)與ds-DNA抗體呈正相關(guān),G2型半乳糖與ds-DNA抗體呈負(fù)相關(guān)(r=-0.572 P0.000).SLE患者體內(nèi)IgG G0型半乳糖(r=0.485 P0.000)、高甘露糖(r=0.754 P0.000)與24h尿白蛋白呈正相關(guān),G2型半乳糖與24h尿白蛋白呈負(fù)相關(guān)(r=-0.513 P0.000)。SLE患者體內(nèi)IgG G0型半乳糖(r=0.417P0.05)、高甘露糖(r=0.460 P0.05)與β2-微球蛋白呈正相關(guān),G2型半乳糖與β2-微球蛋白呈負(fù)相關(guān)(r=-0.422 P0.05)。結(jié)論:1.SLE患者與正常妊娠期婦女及IVIG相比體內(nèi)IgG表面存在異常的糖基化修飾,提示IgG表面糖鏈結(jié)構(gòu)的改變與SLE發(fā)病有關(guān)。2.與SLE穩(wěn)定期的患者相比活動期的SLE患者IgG表面糖基化存在明顯差異,提示IgG表面異常的糖基化修飾與SLE疾病活動性有關(guān)。SLE患者血清IgG表面糖鏈的含量與SLEDAI、C3、C4、CPR有相關(guān)性,提示IgG表面糖鏈與SLE疾病的活動有相關(guān)性。3.SLE活動期患者其ds-DNA抗體、24h尿蛋白、β2-微球蛋白水平明顯高于靜止期患者,且其IgG表面糖鏈與ds-DNA抗體、24h尿蛋白、β2-微球蛋白有相關(guān)性,提示IgG表面的糖鏈結(jié)構(gòu)的改變與腎臟功能的損害有相關(guān)性。
【關(guān)鍵詞】：免疫球蛋白G 糖基化 系統(tǒng)性紅斑狼瘡
【學(xué)位授予單位】：廣西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R593.241
【目錄】：

• 摘要3-6
• Abstract6-11
• 引言11-13
• 1、實驗材料13-16
• 1.1 研究對象13-16
• 1.2 主要試劑16
• 1.3 主要儀器16
• 2、實驗方法16-21
• 2.1 總免疫球蛋白純化16-17
• 2.2 IgG抗體純化17
• 2.3 SDS-Page實驗17-19
• 2.4 N-糖鏈釋放及分離純化19
• 2.5 凝集素芯片19-21
• 2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計及分析21
• 3、實驗結(jié)果21-28
• 3.1 實驗中各組的臨床數(shù)據(jù)21-22
• 3.2 抗體IgG純化22
• 3.3 凝集素芯片對 N-糖鏈結(jié)構(gòu)的分析22-28
• 4、討論28-35
• 結(jié)論35-37
• 參考文獻(xiàn)37-42
• 附錄42-45
• 綜述45-55
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 致謝55-57
• 個人簡歷及攻讀學(xué)位論文期間獲得的科研成果57

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號：815729