本文關(guān)鍵詞：早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中蛋白激酶C與內(nèi)皮素系統(tǒng)、核因子-kB的相關(guān)性研究

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【摘要】：目的:觀察在糖尿病早期階段視網(wǎng)膜內(nèi)蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)活性及各亞型蛋白表達(dá)的情況,并連續(xù)動態(tài)觀察糖尿病早期狀態(tài)下視網(wǎng)膜內(nèi)皮素(endothelin,ET)系統(tǒng)及核因子-Kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-k B)的表達(dá)變化。觀察非選擇性PKC抑制劑GF109203X對視網(wǎng)膜內(nèi)ET系統(tǒng)及NF-k B表達(dá)的影響,以探討PKC在糖尿病早期誘導(dǎo)視網(wǎng)膜細(xì)胞損傷的作用機(jī)制。方法:采用Sprague Dawley(SD)大鼠為實(shí)驗(yàn)對象,使用一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法誘導(dǎo)糖尿病大鼠動物模型。酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)檢測12周病程的糖尿病大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)PKC活性。免疫印跡法(western blottiog,WB)檢測12周病程的糖尿病大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)相關(guān)PKC亞型的蛋白表達(dá)情況。實(shí)時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(quantitative real time-polymerase chain reaction,QRT-PCR)檢測不同病程的糖尿病大鼠視網(wǎng)膜ET系統(tǒng)和NF-k B p65 m RNA的表達(dá)情況。對12周病程的糖尿病大鼠玻璃體腔內(nèi)注射不同濃度(10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L)的非選擇性PKC抑制劑后,運(yùn)用QRT-PCR檢測ET系統(tǒng)及NF-k B m RNA表達(dá)的變化。結(jié)果:1、12周病程的糖尿病大鼠視網(wǎng)膜組織內(nèi)細(xì)胞膜組份的PKC活性較正常對照組明顯增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),細(xì)胞漿組份的PKC活性無明顯變化(P0.05)。2、12周病程的糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中,PKC-α、β1、β2、δ表達(dá)較正常對照組增多,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其中以PKC-β1、β2最為明顯,PKC-ε無明顯變化(P0.05)。3、在糖尿病早期大鼠視網(wǎng)膜組織內(nèi)ETs及NF-k B的m RNA表達(dá)均較正常對照組明顯增加,其中ET-1及NF-k B在2周既已出現(xiàn)明顯升高,ET-3及ET-A在第4周檢測出m RNA表達(dá)水平的升高,而ET-B m RNA的升高出現(xiàn)在第12周,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。4、對12周病程的糖尿病大鼠進(jìn)行玻璃體注射10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L的PKC抑制劑后,視網(wǎng)膜內(nèi)ETs及NF-k B p65 m RNA表達(dá)均不同程度的降低,且呈劑量依賴性反應(yīng),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。結(jié)論:1、在糖尿病早期大鼠視網(wǎng)膜組織內(nèi)即已出現(xiàn)PKC的激活及ETs、NF-k B表達(dá)的增加。2、PKC抑制劑GF103209X可不同程度地降低視網(wǎng)膜內(nèi)ETs及NF-k B的表達(dá),且成劑量依賴性反應(yīng)。3、在糖尿病早期階段PKC可能通過破壞ET系統(tǒng)及NF-k B的平衡狀態(tài)從而誘導(dǎo)早期糖尿病視網(wǎng)膜細(xì)胞的損傷。
【關(guān)鍵詞】：糖尿病視網(wǎng)膜病變 蛋白激酶C 內(nèi)皮素系統(tǒng) 核因子-kB
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R587.2;R774.1
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-11
• 第1章 引言11-15
• 第2章 材料與方法15-29
• 2.1 主要材料與試劑15-17
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動物15
• 2.1.2 主要試劑和產(chǎn)地15-16
• 2.1.3 主要儀器設(shè)備和產(chǎn)地16-17
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法17-29
• 2.2.1 常用試劑的配制17-19
• 2.2.2 糖尿病大鼠模型的建立19
• 2.2.3 ELISA測定視網(wǎng)膜內(nèi)PKC活性19-21
• 2.2.4 Western Blot測定視網(wǎng)膜內(nèi)PKC亞型21-24
• 2.2.5 視網(wǎng)膜HE染色24-25
• 2.2.6 QRT-PCR檢測視網(wǎng)膜內(nèi)ET系統(tǒng)及NF-k B的mRNA表達(dá)水平25-27
• 2.2.7 PKC抑制劑GF109203X干預(yù)27-28
• 2.2.8 統(tǒng)計(jì)方法28-29
• 第3章 結(jié)果29-35
• 3.1 組間基本情況的比較29-30
• 3.2 視網(wǎng)膜HE染色結(jié)果30-31
• 3.3 PKC活性的比較31
• 3.4 PKC亞型的表達(dá)情況31-32
• 3.5 不同時間點(diǎn)視網(wǎng)膜內(nèi)ETs及NF-k B p65 mRNA的表達(dá)情況32-34
• 3.6 不同劑量GF109203X處理后ETs及NF-k B p65 mRNA的表達(dá)34-35
• 第4章 討論35-42
• 4.1 PKC與早期糖尿病視網(wǎng)膜35-37
• 4.1.1 DAG/PKC信號通路35-36
• 4.1.2 PKC在早期糖尿病視網(wǎng)膜病變化36-37
• 4.2 PKC、ET系統(tǒng)與早期糖尿病視網(wǎng)膜37-38
• 4.3 PKC、NF-k B與早期糖尿病視網(wǎng)膜38-40
• 4.3.1 NF-k B38-39
• 4.3.2 PKC對早期糖尿病視網(wǎng)膜組織中NF-k B的影響39-40
• 4.4 總結(jié)40
• 4.5 本研究的創(chuàng)新之處40
• 4.6 本研究的不足之處40-42
• 第5章 結(jié)論與展望42-43
• 5.1 結(jié)論42
• 5.2 展望42-43
• 致謝43-44
• 參考文獻(xiàn)44-50
• 附圖50-53
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果53-54
• 綜述 糖尿病視網(wǎng)膜病變的系統(tǒng)綜合性治療進(jìn)展54-64
• 參考文獻(xiàn)60-64

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 寧國潤;;低密度脂蛋白膽固醇與視網(wǎng)膜病的嚴(yán)重性有關(guān)[J];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào);1982年04期

2 王偉琴;;血小板與視網(wǎng)膜病[J];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào);1982年02期

3 李玉琴，寧宏;干擾素性視網(wǎng)膜病[J];日本醫(yī)學(xué)介紹;1995年03期

4 曹向陽;黎蕾;;糖尿病性視網(wǎng)膜病變中血視網(wǎng)膜屏障損傷機(jī)制研究進(jìn)展[J];中國眼耳鼻喉科雜志;2006年02期

5 車松天;王桂云;隋桂琴;李旭;;微量全氟加萘對家兔視網(wǎng)膜毒性作用的劑量關(guān)聯(lián)性[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年04期

6 湯國雄;;二硫化碳引起視網(wǎng)膜病的流行病學(xué)研究,二硫化碳接觸水平與視網(wǎng)膜病的發(fā)展[J];廣醫(yī)通訊;1977年03期

7 Mark.O.M.Tso;張惠容;;血—視網(wǎng)膜屏障的病理[J];眼科新進(jìn)展;1983年02期

8 管懷進(jìn);視網(wǎng)膜病的基礎(chǔ)和臨床研究[J];南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1998年03期

9 徐國興;;視網(wǎng)膜病國內(nèi)外研究現(xiàn)狀與進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2014年02期

10 鄧娜,王學(xué)民,曹紅寶;人體視網(wǎng)膜圖像的提取[J];醫(yī)療衛(wèi)生裝備;2004年09期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 戴儀;王一雪;石文靜;陳超;;重組人色素上皮衍生因子對氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病新生血管的抑制作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國兒科學(xué)術(shù)大會論文匯編（上冊）[C];2010年

2 范玉華;陳玲;曾進(jìn)勝;裴中;;遺傳性內(nèi)皮細(xì)胞病伴視網(wǎng)膜病、周圍神經(jīng)病和腦病-病例報(bào)告[A];第十一屆全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

3 丁格林;丁鄉(xiāng)客;蘇紅玉;;中西醫(yī)結(jié)合治療視網(wǎng)膜靜脈周圍炎(附11例報(bào)告)[A];全國首屆中青年中醫(yī)眼科學(xué)術(shù)研討會資料匯編[C];1996年

4 向圣錦;郜忠海;林寶仁;黃新平;;Coats病臨床特征分析[A];浙江省中醫(yī)藥學(xué)會眼科分會2008繼續(xù)教育研討會論文集[C];2008年

5 廖品正;;中醫(yī)對糖尿病視網(wǎng)膜病變的治療[A];糖尿�。ㄏ什。┲嗅t(yī)診治薈萃——全國第五次中醫(yī)糖尿病學(xué)術(shù)大會論文集[C];1999年

6 張學(xué)東;李波;;促紅細(xì)胞生成素在早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜表達(dá)的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2007年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 記者鄭曉春;傳統(tǒng)矯正兒童近視方法欠妥[N];科技日報(bào);2002年

2 郭卿哲;何為中心性漿液性視網(wǎng)膜病[N];中國醫(yī)藥報(bào);2001年

3 胡永秋;研究發(fā)現(xiàn)超重或肥胖可能引起眼疾和失明[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2008年

4 網(wǎng)侃;戴近視鏡不是矯正近視的正確方法[N];市場報(bào);2003年

5 本報(bào)記者 白軼南;早期癥狀不重視 待到治療已無望[N];保健時報(bào);2005年

6 劉國信;給嬰兒拍照不宜用閃光燈[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

7 謝明霞;用藥謹(jǐn)防眼睛受傷害[N];科技日報(bào);2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 黃禮彬;CX3CL1基因修飾骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對光損傷視網(wǎng)膜的保護(hù)作用[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 李蓉;早產(chǎn)對大鼠視網(wǎng)膜發(fā)育及氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 陳虹霞;532nm激光對兔視網(wǎng)膜生物效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)及理論研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2005年

4 楊軍;早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變基礎(chǔ)和臨床研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2007年

5 石文靜;吸氧和血管生長因子在新生小鼠視網(wǎng)膜病發(fā)病中的作用[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

6 王玉環(huán);不同吸氧方式在新生小鼠視網(wǎng)膜病變發(fā)病中的作用[D];復(fù)旦大學(xué);2006年

7 劉新玲;氧誘導(dǎo)小鼠視網(wǎng)膜病變定量蛋白質(zhì)組研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

8 孫康明;高性能視網(wǎng)膜修復(fù)芯片的研究[D];重慶大學(xué);2010年

9 范聰;抗VEGF藥物貝伐單抗對視網(wǎng)膜安全性的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

10 劉燕;不同光環(huán)境對兔眼球發(fā)育的影響及中藥干預(yù)作用的研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳煬;FoxO1在糖尿病大鼠視網(wǎng)膜和視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞IL-1β誘導(dǎo)的自刺激中的作用及其機(jī)制[D];鄭州大學(xué);2015年

2 李曉琴;炎癥對大鼠氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變的影響[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 章薇;色素上皮衍生因子多肽對氧誘導(dǎo)小鼠視網(wǎng)膜病新生血管的抑制作用[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 黃海香;紅景天對模擬高海拔缺氧的大鼠視網(wǎng)膜的影響[D];蘭州大學(xué);2015年

5 邢薇;絲膠對2型糖尿病大鼠視網(wǎng)膜蛋白激酶C、血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的影響[D];承德醫(yī)學(xué)院;2015年

6 姚微微;抗CXCR4單克隆抗體對糖尿病大鼠血—視網(wǎng)膜屏障及視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的影響[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2015年

7 冀璐;2型糖尿病視網(wǎng)膜血管管徑與中醫(yī)證候相關(guān)性研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2015年

8 章瑩;早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中蛋白激酶C與內(nèi)皮素系統(tǒng)、核因子-kB的相關(guān)性研究[D];南昌大學(xué);2016年

9 劉飛;基于單目視覺的視網(wǎng)膜三維重建技術(shù)研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

10 藺濤;脂聯(lián)素及其受體在正常人和1型糖尿病小鼠視網(wǎng)膜中的表達(dá)[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

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本文編號：808628