本文關鍵詞：氟對大鼠骨組織RBPJ及相關基因表達的影響

  更多相關文章： 氟 骨組織 成骨細胞 Notch經典通路 RBPJ

【摘要】：目的:通過研究氟中毒大鼠骨組織中RBPJ、Notch3、Jag1和Hes5基因表達變化,探討Notch通路與氟骨癥關系,為氟骨癥發(fā)生機制提供理論依據(jù)。方法:成年SD大鼠24只,隨機分為3組:對照組(飲水含氟1mg/L),低氟組(飲水含氟50mg/L),高氟組(飲水含氟100 mg/L),每組8只,組內雌雄各半。飼養(yǎng)6個月后,收集動物尿樣,觀察氟斑牙發(fā)生情況,采用氟離子選擇電極法測定尿氟和骨氟,常規(guī)石蠟切片HE染色觀察骨組織學變化并采用圖像分析軟件測定骨組織形態(tài)學指標,免疫組化法(Immunohistochemistry,IHC)觀察成骨細胞中RBPJ、Notch3、Jag1和Hes5蛋白表達情況,免疫印跡法(Western blot)和實時熒光定量PCR法(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)分別檢測骨組織RBPJ、Notch3、Jag1和Hes5蛋白與mRNA表達量。結果:1.氟骨癥大鼠模型復制成功,表現(xiàn)為染氟組出現(xiàn)不同程度氟斑牙,同時與對照組(2.00±0.34 mg/L、1753.67±184.68μg/g)比較,低氟組(11.80±1.08 mg/L、5974.76±2036.13μg/g)、高氟組(18.08±1.13 mg/L、7996.51±2669.93μg/g)大鼠尿氟和骨氟明顯升高(P0.05);且染氟組大鼠骨皮質厚度、骨小梁寬度、骨小梁密度、成骨細胞指數(shù)明顯升高(P0.05),表現(xiàn)骨質硬化病理改變特征。2.Western blot法檢測顯示,高氟組大鼠骨組織Notch3蛋白(0.201±0.093)顯著低于對照組(0.434±0.218,P0.05);Jag1蛋白在高氟組(0.112±0.024)大鼠的表達水平不僅明顯低于對照組(0.516±0.144),也明顯低于低氟組(0.475±0.189,P0.05);而低氟組(4.985±0.913),高氟組(4.279±1.507)大鼠RBPJ蛋白表達升高,與對照組(2.892±1.001)比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);低氟組(0.147±0.039),高氟組(0.128±0.039)Hes5蛋白表達則又明顯低于對照組(0.282±0.099,P0.05)。3.采用免疫組化法觀察成骨細胞上述因子表達情況,并對陽性成骨細胞Notch3、Jag1、RBPJ、Hes5平均光密度的檢測發(fā)現(xiàn),低氟組,高氟組大鼠Notch3平均光密度(0.022±0.007,0.019±0.005)、Jag1平均光密度(0.024±0.008,0.029±0.009)水平明顯低于對照組(0.045±0.016、0.044±0.023,P0.05),而低、高氟組RBPJ平均光密度(分別為0.032±0.017,0.033±0.017)明顯高于對照組(0.021±0.013,P0.05);但染氟組與對照組之間Hes5平均光密度差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。4.RT-qPCR法檢測骨組織內上述因子mRNA水平,結果顯示高氟組大鼠骨組織Notch3 mRNA(0.0044±0.0040)、Jag1 mRNA(0.0057±0.0054)相對表達量明顯低于對照組(0.0116±0.0072、0.0087±0.0059,P0.05),同時高氟組大鼠骨組織Jag1 mRNA相對表達量也明顯低于低氟組(0.0066±0.0060,P0.05);而低氟組(0.0058±0.0037),高氟組(0.0055±0.0044)大鼠RBPJ mRNA相對表達量明顯低于對照組(0.0122±0.0059,P0.05);但染氟組與對照組之間Hes5 mRNA相對表達量差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。5.相關性分析顯示大鼠成骨細胞中RBPJ蛋白水平與成骨細胞指數(shù)呈正相關關系(r=0.465,P0.05),Notch3蛋白水平與骨皮質厚度、骨小梁寬度、骨小梁密度、成骨細胞指數(shù)均呈負相關關系(r=-0.612、-0.557、-0.640、-0.716,P0.05),Jag1蛋白水平與骨小梁寬度、骨小梁密度均呈負相關關系(r=-0.446、-0.609,P0.05),而Hes5蛋白水平與骨小梁密度呈負相關關系(r=-0.452,P0.05)。結論:過量氟可能抑制骨組織Notch經典信號通路,抑制下游靶基因表達,從而減弱對成骨細胞的分化抑制作用,使成骨作用增強,該過程可能參與氟骨癥發(fā)病機制。
【關鍵詞】：氟 骨組織 成骨細胞 Notch經典通路 RBPJ
【學位授予單位】：貴州醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R599.1
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-11
• 略縮詞表11-12
• 引言12-14
• 材料與方法14-28
• 結果28-35
• 討論35-41
• 結論41-42
• 參考文獻42-46
• 綜述46-58
• 參考文獻54-58
• 作者簡歷58-59
• 致謝59-60
• 學位論文數(shù)據(jù)集60

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫磊;全逸先;;《骨組織庫管理》標準出臺 我國骨組織庫管理邁出第一步[J];中國衛(wèi)生標準管理;2010年05期

2 李章;;骨組織的無機和有機成分在~(239)钚代謝中的作用[J];國外醫(yī)學參考資料(放射醫(yī)學分冊);1978年03期

3 王金華;用非損傷方法研究長期低動態(tài)條件下骨組織的狀態(tài)[J];航天醫(yī)學與醫(yī)學工程;1988年02期

4 危小燕;;碰撞骨組織微觀力學模型[J];國外醫(yī)學.生物醫(yī)學工程分冊;1989年02期

5 楊耀林,沈陽;介紹一種骨組織快速制片法[J];臨床與實驗病理學雜志;1992年03期

6 孫慶妹,金巖,常青,楊連甲;微波技術在牙齒和骨組織標本制備中的應用[J];實用口腔醫(yī)學雜志;1993年04期

7 談勤明,朱靜;骨組織快速制片改良法[J];江西醫(yī)學院學報;2004年06期

8 姜秀英，賴晃文，楊傳紅，江悅華，劉連璞;含骨組織的電鏡樣品制備技術探討[J];第一軍醫(yī)大學學報;1995年02期

9 陳元棟,陳同鈺,虞華明,萬曉莉;骨組織脫鈣的超聲處理[J];江西醫(yī)藥;2001年04期

10 毛萌;鈣與人體 第4講鈣元素怎樣進出骨組織[J];中國臨床醫(yī)生;2001年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 葉銘;張紹祥;王成燾;;力學虛擬人骨組織曲面模型重建及有限元建模技術[A];第八屆全國生物力學學術會議論文集[C];2006年

2 王軍;呂榮;;圖象融合重疊技術在骨組織顯微圖象采集中的應用[A];第十一屆中國體視學與圖像分析學術會議論文集[C];2006年

3 彭若龍;錢夢，

本文編號：805891