本文關(guān)鍵詞：報(bào)告基因法檢測促胰島素分泌肽融合蛋白生物學(xué)活性

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【摘要】：目的:建立報(bào)告基因法檢測促胰島素分泌肽融合蛋白(Exendin-4-HSA,Byetalog)生物學(xué)活性。方法:將胰高血糖素樣肽-1受體(glucagon-likepeptide 1 receptor,GLP-1R)表達(dá)載體和c AMP反應(yīng)元件(c AMP response element,CRE)報(bào)告基因載體共轉(zhuǎn)染CHO-K1細(xì)胞,經(jīng)加壓篩選和單克隆分離培養(yǎng)獲得穩(wěn)定的單克隆細(xì)胞株;使用藥物反應(yīng)強(qiáng)的單克隆細(xì)胞株建立報(bào)告基因方法;對新建方法進(jìn)行條件優(yōu)化,并用優(yōu)化的方法對促胰島素分泌肽融合蛋白原液和成品進(jìn)行生物學(xué)活性測定。結(jié)果:經(jīng)加壓篩選和單克隆分離培養(yǎng)后獲得對Byetalog強(qiáng)反應(yīng)性的細(xì)胞株CHOglpar/crec14;新建方法劑量反應(yīng)曲線符合四參數(shù)方程,R~2大于0.99;對促胰島素分泌肽融合蛋白的原液和成品分別測定3次,RSD值均低于5.0%,回收率在70%~130%之間。結(jié)論:報(bào)告基因法操作簡便,重復(fù)性和準(zhǔn)確性都較高,有望作為替代方法應(yīng)用于促胰島素分泌肽融合蛋白的生物學(xué)活性測定。
【作者單位】： 北京市藥品檢驗(yàn)所;中國食品藥品檢定研究院;
【關(guān)鍵詞】： 促胰島素分泌肽融合蛋白 轉(zhuǎn)基因細(xì)胞 報(bào)告基因法 CRE GLP-R 生物學(xué)活性測定
【基金】：國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)(2012ZX09304010) 博士后基金(2015M571230)
【分類號】：R587.1
【正文快照】： 糖尿病是世界性疾病,發(fā)病率居高不下,嚴(yán)重威脅人類健康。糖尿病主要分為1型和2型,后者占糖尿病患者的90%以上。胰高血糖素樣肽-1(glucagon-like peptide 1,GLP-1)及其類似物近年來成為2型糖尿病治療領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)[1-4]。GLP-1可以有效解決當(dāng)前2型糖尿病治療的多重挑戰(zhàn):可有效

【相似文獻(xiàn)】

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3 曹建平;哈佛博士后造“濟(jì)世良藥”[N];無錫日報(bào);2010年

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本文編號：762612