本文關(guān)鍵詞：TLR3信號通路在人卵巢顆粒細(xì)胞內(nèi)源性抗病毒反應(yīng)中的作用研究

  更多相關(guān)文章： 卵巢顆粒細(xì)胞 Poly(I:C) TLR3 P450芳香化酶 雌二醇

【摘要】：背景：Toll樣受體(TLRs)是天然免疫系統(tǒng)的重要組成部分,是一類重要的模式識別受體,能識別病原體相關(guān)模式分子、引起炎性介質(zhì)的釋放。TLR3識別病毒來源的dsRNA及其擬似物Poly (I:C),在機(jī)體抗病毒免疫反應(yīng)中起重要作用。人類卵巢組織可被不同的病毒感染,卵母細(xì)胞及卵泡液中都曾發(fā)現(xiàn)有病毒感染存在。排卵和分泌性激素是卵巢的兩大主要功能。卵巢顆粒細(xì)胞的重要作用是合成雌二醇、以及為卵母細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì)。目的：研究人卵巢組織及顆粒細(xì)胞TLR3的表達(dá)情況及其在內(nèi)源性抗病毒反應(yīng)過程中的作用,進(jìn)一步探討病毒感染對卵巢排卵及內(nèi)分泌功能的影響。方法：收集因輸卵管因素或男性因素不孕在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院生殖中心接受IVF-ET的患者取卵后的卵泡液,分離、體外培養(yǎng)。免疫組織化學(xué)及免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測TLR3在卵巢組織及顆粒細(xì)胞中的表達(dá)；以FSH和(或)Poly (I:C)刺激后檢測細(xì)胞增殖活力；不同時間點(diǎn)終止培養(yǎng)收集上清及細(xì)胞,ELISA法檢測培養(yǎng)上清中的細(xì)胞因子IL-6、IL-8、RANTES (regulated uponactivation normal T cell expressed and secreted,調(diào)節(jié)活化正常T細(xì)胞表達(dá)與分泌的趨化因子,又名CCL5)水平；電化學(xué)發(fā)光法檢測上清中的雌二醇濃度；熒光定量PCR檢測TLR3 mRNA表達(dá)水平及雌二醇合成關(guān)鍵酶P450芳香化酶mRNA表達(dá)水平的變化；Western blot檢測TLR3及P450芳香化酶蛋白表達(dá)水平。結(jié)果：TLR3在人卵巢顆粒細(xì)胞中固有表達(dá),Poly (I:C)刺激后TLR3 mRNA表達(dá)上調(diào)(P0.05), FSH刺激對TLR3的表達(dá)無明顯影響；FSH提高顆粒細(xì)胞的增生活力,Poly (I:C)或Poly (I:C)與FSH聯(lián)合處理對顆粒細(xì)胞活力的影響與對照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；Poly (I:C)刺激顆粒細(xì)胞后炎癥因子IL-6、IL-8及RANTES分泌增加,在48小時內(nèi)表現(xiàn)為明顯的時間依賴效應(yīng)；Poly (I:C)與FSH聯(lián)合處理與單獨(dú)FSH處理相比,培養(yǎng)基中E2的濃度下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Poly (I:C)與FSH聯(lián)合處理與單獨(dú)FSH處理相比,P450芳香化酶mRNA和蛋白的表達(dá)水平下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：TLR3在人卵巢顆粒細(xì)胞中固有表達(dá)。體外病毒擬似物Poly (I:C)刺激顆粒細(xì)胞后,誘導(dǎo)TLR3表達(dá)上調(diào),及其下游炎癥因子釋放增加。Poly (I:C)對FSH誘導(dǎo)顆粒細(xì)胞合成雌激素的過程具有抑制作用,該作用通過抑制P450芳香化酶的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)。綜上,推測卵巢病毒感染可以激活顆粒細(xì)胞TLR3信號通路、誘導(dǎo)免疫反應(yīng)、抑制雌二醇的合成,最終導(dǎo)致卵巢功能失調(diào)和卵子質(zhì)量下降。
【關(guān)鍵詞】：卵巢顆粒細(xì)胞 Poly(I:C) TLR3 P450芳香化酶 雌二醇
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R711.75
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 縮略詞表9-11
• 1 引言11-13
• 2 材料與方法13-34
• 3 結(jié)果34-45
• 4 討論45-50
• 5 結(jié)論50-51
• 參考文獻(xiàn)51-56
• 綜述56-68
• 參考文獻(xiàn)62-68
• 作者簡歷及科研成果68

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本文編號：727311