發(fā)布時(shí)間：2017-08-21 16:18

  本文關(guān)鍵詞：人外周血單個(gè)核細(xì)胞的尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因表達(dá)譜及其在原發(fā)性痛風(fēng)患者表達(dá)量變化的意義

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【摘要】：目的:從20種尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(ABCG2、LGALS9、ABCC4、PDZK1、GCKR、LRRC16A、SLC2A9、SLC5A8、SLC5A12、SLC13A2、SLC13A3、SLC17A1、SLC17A3、SLC16A9、SLC22A6、SLC22A7、SLC22A8、SLC22A11、SLC22A12、SLC22A13)中篩選出在外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中可明確表達(dá)的尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因,檢測(cè)原發(fā)性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎(gouty arthritis,GA)患者PBMCs中可表達(dá)的尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因mRNA表達(dá)量變化,分析其與GA患者臨床實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的關(guān)系,初步探討PBMCs可表達(dá)的尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在GA患者發(fā)病中可能的作用。方法:1.采集40例GA患者[包括20例痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎急性期(acute gouty arthritis,AGA)、20例痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎間歇期(interval gouty arthritis,IGA)]和20例健康體檢者(health control,HC)的外周血標(biāo)本以及人體正常腎臟、小腸粘膜、肝臟組織的標(biāo)本,分離提取所有標(biāo)本的總RNA,并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。2.逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)篩選出PBMCs中可明確表達(dá)的尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因。3.采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法檢測(cè)PBMCs中可表達(dá)的尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因mRNA表達(dá)水平,并分析各基因mRNA表達(dá)量與血常規(guī)、肝腎功能、血脂的相關(guān)性以及各基因mRNA表達(dá)量之間的相關(guān)性。結(jié)果:1.7種尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(abcg2、lgals9、abcc4、pdzk1、lrrc16a、slc2a9、slc17a3)可在ga患者及健康人pbmcs中表達(dá)。2.ga患者abcg2、lgals9基因mrna表達(dá)量高于健康人(p0.05);ga患者abcc4、slc2a9、slc17a3基因mrna表達(dá)量低于健康人(p0.05);ga患者pdzk1、lrrc16a基因mrna表達(dá)量與健康人未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05)。組間比較,aga、iga患者中abcg2、lgals9基因mrna表達(dá)量均顯著高于健康人(p0.05),aga、iga患者中abcg2、lgals9基因mrna表達(dá)量未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);aga、iga患者中abcc4基因mrna表達(dá)量顯著低于健康人(p0.05),aga、iga患者中abcc4基因mrna表達(dá)量未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05);ga患者與健康人的pdzk1、lrrc16a基因mrna表達(dá)量均未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p0.05),但aga患者lrrc16a基因mrna表達(dá)量顯著低于iga患者(p0.05);aga、iga患者中slc2a9基因mrna表達(dá)量均顯著低于健康人(p0.05),aga患者slc2a9基因mrna表達(dá)量顯著高于iga患者(p0.05);aga、iga患者中slc17a3基因mrna表達(dá)量均顯著低于健康人(p0.05),aga患者slc17a3基因mrna表達(dá)量顯著低于iga患者(p0.05)。3.spearman相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),ga患者abcg2基因表達(dá)量與血液尿酸濃度呈正相關(guān)(r=0.24,p0.05),abcc4基因表達(dá)量與血液甘油三酯濃度呈正相關(guān)(r=0.308,p0.05),slc17a3基因表達(dá)量與血液淋巴細(xì)胞數(shù)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.354,p0.05),而上述指標(biāo)在健康人均未見(jiàn)明顯相關(guān)性。4.ga患者中abcc4基因與lrrc16a、slc17a3基因的mrna表達(dá)量均呈正相關(guān)(r=0.24,p0.05),健康人中abcc4基因與lrrc16a基因的mrna表達(dá)也呈正相關(guān)(p0.05),ga患者中LRRC16A基因與PDZK1、SLC17A3基因的mRNA表達(dá)量均呈正相關(guān),健康人中LRRC16A與PDZK1、SLC17A3的mRNA表達(dá)量也呈正相關(guān)(P0.05)。結(jié)論:尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因ABCG2、LGALS9、ABCC4、PDZK1、LRRC16A、SLC2A9、SLC17A3均可在人PBMCs中表達(dá),并且在GA患者的表達(dá)量呈現(xiàn)不同程度變化,提示通過(guò)研究這7種基因在健康人及GA患者PBMCs中的表達(dá)差異的生理病理意義,可能從新的角度闡釋原發(fā)性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制。
【關(guān)鍵詞】：原發(fā)性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎 單個(gè)核細(xì)胞 尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 分布 表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R589.7
【目錄】：

• 致謝4-5
• 摘要5-8
• Abstract8-12
• 前言12-16
• 第一部分 人外周血單個(gè)核細(xì)胞的尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因表達(dá)譜16-25
• 材料與方法16-20
• 結(jié)果20-23
• 討論23-25
• 第二部分 人外周血單個(gè)核細(xì)胞的尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因在原發(fā)性痛風(fēng)患者表達(dá)量變化的意義25-44
• 材料與方法25-27
• 結(jié)果27-39
• 討論39-44
• 結(jié)論44-45
• 附圖45-52
• 參考文獻(xiàn)52-56
• 綜述：尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的研究進(jìn)展56-68
• 參考文獻(xiàn)64-68
• 附錄68-70
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷70-71
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文71

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