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基于新型可注射性水凝膠包裹INS-1 832/13細(xì)胞構(gòu)建生物人工胰腺的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2025-02-08 21:13
  目的隨著糖尿病患病率的增加,為有效避免目前臨床“外源性”胰島素治療頻繁注射、必須反復(fù)監(jiān)測(cè)血糖以及及時(shí)調(diào)整劑量等缺點(diǎn),本文旨在通過(guò)合成一種新型可注射性葡萄糖敏感性水凝膠生物材料,包裹胰島瘤細(xì)胞INS-1 832/13構(gòu)建生物人工胰腺,期望實(shí)現(xiàn)響應(yīng)周圍葡萄糖濃度水平刺激胰島瘤細(xì)胞分泌胰島素,模仿胰島素生理分泌模式與釋放行為,實(shí)現(xiàn)平穩(wěn)控制血糖。方法以3-丙烯酰胺基苯硼酸(AAPBA)和N-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)為原料,馬來(lái);暇厶(Dex-Ma)為交聯(lián)劑,基于過(guò)硫酸銨(APS)和四甲基乙二胺(TMEDA)氧化還原體系,于37℃溫和條件下合成乳白色水凝膠。通過(guò)調(diào)整AAPBA和NIPAM單體投料比,交聯(lián)劑量以及氧化還原催化體系濃度,合成低溫下呈液態(tài),37℃下呈凝膠狀的溫敏性水凝膠。利用紅外光譜(FT-IR)分析材料的分子結(jié)構(gòu);掃描電鏡(SEM)對(duì)材料進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢測(cè);并對(duì)材料的溶脹性,流變學(xué)特性以及體外胰島素釋放行為進(jìn)行分析;通過(guò)四甲基偶氮唑鹽(MTT)法評(píng)價(jià)材料的生物相容性;谏鲜鲂阅苤笜(biāo)的評(píng)估,選取出生物相容性良好,材料性能較佳的投料體系,包裹一種克隆性分泌胰島素的β細(xì)胞系INS-1 ...

【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
1 對(duì)象和方法
    1.1 試劑與儀器
        1.1.1 主要試劑
        1.1.2 主要儀器
    1.2 3-丙烯酰胺基苯硼酸(AAPBA)的合成
        1.2.1 丙烯酰氯的制備
        1.2.2 AAPBA的合成
    1.3 馬來(lái);暇厶(Dex-Ma)的合成
    1.4 N-異丙基丙烯酰胺(NIPAM)的重結(jié)晶
    1.5 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)的合成
        1.5.1 交聯(lián)劑Dex-Ma濃度的確定
        1.5.2 單體投料比的確定
    1.6 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)的表征
        1.6.1 紅外光譜(FT-IR)
        1.6.2 掃描電鏡(SEM)測(cè)定
        1.6.3 溶脹性能測(cè)定
        1.6.4 流變學(xué)特性測(cè)定
    1.7 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)胰島素體外釋放實(shí)驗(yàn)
        1.7.1 負(fù)載胰島素P(AAPBA-Dex-NIPAM)水凝膠的合成
        1.7.2 胰島素標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定
        1.7.3 負(fù)載胰島素P(AAPBA-Dex-NIPAM)水凝膠體外釋放實(shí)驗(yàn)
    1.8 MTT法測(cè)試水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)的細(xì)胞毒性
        1.8.1 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(NIH3T3)細(xì)胞的培養(yǎng)
        1.8.2 MTT法測(cè)試水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)的細(xì)胞毒性
    1.9 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)包裹胰島瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        1.9.1 胰島瘤細(xì)胞INS-1 832/13的培養(yǎng)
        1.9.2 水凝膠包裹INS-1 832/13細(xì)胞
        1.9.3 水凝膠包裹細(xì)胞的SEM測(cè)定
        1.9.4 吖啶橙/溴化乙錠(AO/EB)雙熒光染色觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況
        1.9.5 ELISA法檢測(cè)包裹細(xì)胞胰島素分泌情況
2 結(jié)果
    2.1 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)
    2.2 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)形態(tài)學(xué)測(cè)定
    2.3 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)溶脹性能的測(cè)定
    2.4 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)流變學(xué)特性的測(cè)定
    2.5 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)胰島素體外釋放實(shí)驗(yàn)
    2.6 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)的細(xì)胞相容性
    2.7 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)包裹胰島瘤細(xì)胞掃描電鏡實(shí)驗(yàn)
    2.8 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)包裹胰島瘤細(xì)胞熒光染色實(shí)驗(yàn)
    2.9 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)包裹胰島瘤細(xì)胞胰島素分泌情況
3 討論
    3.1 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)
    3.2 水凝膠P(AAPBA-Dex-NIPAM)細(xì)胞學(xué)相關(guān)測(cè)試
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述 胰島細(xì)胞移植再生工程的研究進(jìn)展
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào):4031997

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