第一部分:硼替佐米對卵巢去除小鼠骨質(zhì)丟失的保護(hù)作用及其機(jī)制研究目的:蛋白酶體抑制劑類藥物如硼替佐米(Bortezomib)臨床上常作為抗腫瘤藥物使用,其對體內(nèi)各種酶活性的改變可能對骨代謝調(diào)節(jié)相關(guān)通路有相當(dāng)?shù)恼{(diào)節(jié)作用,但作為治療骨質(zhì)疏松藥物尚缺乏研究證實(shí)。本研究部分,我們通過向去除卵巢小鼠的腹腔內(nèi)注射硼替佐米,探究硼替佐米對去卵巢小鼠骨質(zhì)丟失的保護(hù)作用。方法:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分組設(shè)置為(1)假手術(shù)組(SHAM);(2)去卵巢骨量丟失組(OVX);(3)去卵巢骨量丟失+硼替佐米治療(OVX+Bzb)組,每組7只(n=7)。假手術(shù)組僅做卵巢周圍組織切除,另外2組小鼠行卵巢切除術(shù)。術(shù)后第21天開始,OVX組每周兩次注射2%DMSO溶劑,OVX+Bzb組每周兩次腹腔注射溶解于2%DMSO溶液的硼替佐米(Bortezomib),硼替佐米劑量標(biāo)準(zhǔn)為0.5mg/kg,為期4周。4周后將小鼠統(tǒng)一處死,取出雙側(cè)股骨,股骨經(jīng)多聚甲醛固定5天后,將小鼠按組別全數(shù)行股骨Micro-CT檢查并行骨結(jié)構(gòu)參數(shù)分析,切片制成后后行HE、TRAP、免疫組織化學(xué)染色,檢測股骨干骺端骨小梁及其周圍破骨細(xì)胞數(shù)目變化,以及Smurf1和...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．小鼠股骨Ｍｉｃｒｏ－ＣＴ骨結(jié)構(gòu)分析參數(shù)??表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，＊，＜０．０１）??

?Ｕ．０２０－??－ｒ－?〇ｉ５－?丁??ｔ?ｉ〇－ｉ〇－??Ｉ??ｏ．ｏｓ－???，?——?０．００－Ｉ?＾?１?１???ＳＨＡＭ?ＯＶＸ?ＯＶＸ＋Ｂｚｂ?ＳＨＡＭ?ＯＶＸ?ＯＶＸ＋Ｂｚｂ??ＢＳ／ＴＶ?ＢＶ／ＴＶ??＊＊?＊??１５－．??；??２０－｜?＊＊??＊＊??？＾....

圖６．小鼠股骨Ｓｍｕｒｆｌ、Ｓｍｕｒｆ２免疫組化染色??

硼替佐米治療骨質(zhì)疏松癥及其機(jī)制研究?第一部分??ｗ?ｗ－?ｗ．??■細(xì)／鐵墨屬ｉｒ劚??ＳＨＡＭ?ＯＶＸ?ＯＶＸ＋Ｂｚｂ??圖５．小鼠股骨ＴＲＡＰ染色??ＴＲＡＰ染色結(jié)果提示ＯＶＸ組小鼠骨小梁處破骨細(xì)胞數(shù)量明顯多于ＳＨＡＭ組，ＯＶＸ＋Ｂｚｂ組??小鼠破骨細(xì)胞數(shù)目少于ＯＶＸ組小鼠。....

圖５．小鼠股骨ＴＲＡＰ染色??

硼替佐米治療骨質(zhì)疏松癥及其機(jī)制研究?第一部分??ｗ?ｗ－?ｗ．??■細(xì)／鐵墨屬ｉｒ劚??ＳＨＡＭ?ＯＶＸ?ＯＶＸ＋Ｂｚｂ??圖５．小鼠股骨ＴＲＡＰ染色??ＴＲＡＰ染色結(jié)果提示ＯＶＸ組小鼠骨小梁處破骨細(xì)胞數(shù)量明顯多于ＳＨＡＭ組，ＯＶＸ＋Ｂｚｂ組??小鼠破骨細(xì)胞數(shù)目少于ＯＶＸ組小鼠。....

圖７?．?ＩｎＭ硼替佐米對ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１細(xì)胞的ＡＬＰ表達(dá)及活力的影響??

右時(shí)對細(xì)胞樣本分別進(jìn)行ＡＬＰ堿性磷酸酶染色及活力測定，??當(dāng)細(xì)胞誘導(dǎo)至２１天左右時(shí)，可在顯微鏡下視野內(nèi)觀察到一定數(shù)量黑色鈣結(jié)節(jié)，對細(xì)??胞樣本進(jìn)行茜素紅Ｓ染色及定量檢測，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，加入硼替佐米干預(yù)過后的??ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１細(xì)胞的堿性磷酸酶表達(dá)與活力升高，其顯色的鈣結(jié)節(jié)數(shù)量也明....

本文編號(hào)：3931513