目的研究50 Hz 0.6 m T低頻脈沖電磁場(pulsed electromagnetic fields,PEMFs)是否通過cAMP/PKA信號通路促進(jìn)成骨細(xì)胞分化。方法體外培養(yǎng)大鼠顱骨成骨細(xì)胞(rat calvarial osteoblasts,ROBs),傳代融合后采用50 Hz 0.6 m T低頻脈沖電磁場處理不同時間后檢測細(xì)胞內(nèi)cAMP濃度及PKA磷酸化水平的變化。使用2’,3’-雙脫氧腺苷(DDA)抑制細(xì)胞內(nèi)腺苷酸環(huán)化酶(AC)活性,檢測經(jīng)低頻脈沖電磁場刺激后細(xì)胞堿性磷酸酶(ALP)活性及成骨性基因轉(zhuǎn)錄的變化;使用KT5720抑制PKA的磷酸化,檢測經(jīng)低頻脈沖電磁場刺激后細(xì)胞成骨性基因轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果采用50 Hz 0.6 m T低頻脈沖電磁場處理20 min后,ROBs內(nèi)cAMP濃度顯著升高,持續(xù)至40 min后迅速下降,至2 h時再次升高,p-PKA亦表現(xiàn)出同樣的變化趨勢,說明低頻脈沖電磁場激活了cAMP/PKA信號通路;使用DDA抑制腺苷酸環(huán)化酶活性后,由低頻脈沖電磁場引起的ALP活性及成骨性基因轉(zhuǎn)錄升高顯著下降,同樣使用KT5720抑制PKA磷酸化后,...

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圖1低頻電磁場細(xì)胞處理儀Fig.1Thedeviceproducingelectromagneticfieldsforcellexposure.

促進(jìn)骨形成，對此本文進(jìn)行了研究，以深入探討電磁場促進(jìn)骨形成的分子機(jī)理。1材料和方法1.1低頻電磁場細(xì)胞處理儀本研究所用低頻電磁場細(xì)胞處理儀由本課題組自行研制，發(fā)明專利號：ZL201110423102.0。整套裝置由計(jì)算機(jī)控制模塊、數(shù)模轉(zhuǎn)化模塊、信號放大模塊、線圈、磁場傳感器和溫度....

圖2低頻脈沖電磁場處理后ROBs內(nèi)cAMP濃度變化

提高成骨性基因轉(zhuǎn)錄的影響，結(jié)果如圖6所示，低頻脈沖電磁場顯著提高了成骨性基因Osx、Col-I、Bmp-2的表達(dá)（**P<0.01，*P<0.05），抑制劑KT5720未對ROBs成骨性基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生明顯影響，而當(dāng)其抑制PKA的活性后，由低頻脈沖電磁場引起的成骨性基因轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)的現(xiàn)....

圖3低頻脈沖電磁場處理后ROBs內(nèi)p-PKA濃度變化

圖4抑制劑DDA對低頻脈沖電磁場處理后ALP活性變化的影響

http://www.j-smu.comJSouthMedUniv,2016,36(11):1508-1513對照組有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（**P<0.01），之后回歸至對照組水平，于2h時再次升高（**P<0.01），說明第二信使cAMP濃度的升高引起了PKA磷酸化水平的變化。2.....

本文編號：3912057