目的:研究系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血單個核細(xì)胞中mi R-326、mi R-330-5p及其靶基因DNMT1的表達(dá)水平,以及其與SLE患者的臨床疾病活動度關(guān)系,初步探索mi R-326和mi R-330-5p調(diào)控DNMT1的表達(dá)在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的作用機制,為SLE的診斷和病情判讀提供可靠的實驗室指標(biāo)。方法:首先,選取符合系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者72例,根據(jù)系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者系統(tǒng)性紅斑狼瘡的活動度評分(Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index,SLEDAI)標(biāo)準(zhǔn),可以將SLE病例組分為高活動組21例(SLEDAI≥15分),中活動組25例(15分>SLEDAI≥10分)和低活動組26例(10分>SLEDAI≥5分),同時選取健康人群40例作為對照組,收集SLE病例組和健康對照組外周血單個核細(xì)胞,提取總RNA。采用實時熒光定量PCR技術(shù)(Quentitative Real-time,q PCR)技術(shù)檢測mi R-326、mi R-330-5p以及...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 研究背景
        1.1.1 系統(tǒng)性紅斑狼瘡的概況
        1.1.2 系統(tǒng)性紅斑狼瘡的病因及發(fā)病機制
        1.1.3 系統(tǒng)性紅斑狼瘡的治療
    1.2 MicroRNA
        1.2.1 miRNA與系統(tǒng)性紅斑狼瘡
        1.2.2 miR-326/miR-330-5p與系統(tǒng)性紅斑狼瘡
    1.3 DNMT1與系統(tǒng)性紅斑狼瘡
第二章 實驗材料與試劑
    2.1 實驗設(shè)備與儀器
    2.2 試劑與耗材
第三章 實驗及研究方法
    3.1 研究對象
        3.1.1 系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的選擇標(biāo)準(zhǔn)
        3.1.2 健康對照組的選擇標(biāo)準(zhǔn)
        3.1.3 健康對照組的排除標(biāo)準(zhǔn)
    3.2 實驗方法
        3.2.1 SLE患者實驗室指標(biāo)及測定
        3.2.2 密度梯度法(Ficoll)分離外周血的單個核細(xì)胞(PBMCs)
        3.2.3 totalRNA的提取
        3.2.4 mRNA逆轉(zhuǎn)錄體系的配制
        3.2.5 合成引物及擴增體系的配制
        3.2.6 m RNA實時熒光定量PCR檢測
        3.2.7 miRNA逆轉(zhuǎn)錄合成c DNA
        3.2.8 miRNA實時熒光定量PCR檢測
    3.3 實驗數(shù)據(jù)整理及統(tǒng)計學(xué)分析
        3.3.1 實驗數(shù)據(jù)分析
        3.3.2 統(tǒng)計分析
第四章 實驗結(jié)果
    4.1 .SLE患者常規(guī)實驗室項目檢測評表
    4.2 Real-time PCR檢測miR-326和mi R-330-5p在 SLE患者PBMCs中的表達(dá)
    4.3 Real-time PCR檢測DNMT1在SLE患者PBMCs中的表達(dá)
    4.4 miR-326、miR-330-5p與 DNMT1 之間的相關(guān)性分析及對SLE的診斷價值
    4.5 DNMT1mRNA與 SLEDAI的相關(guān)性分析
    4.6 miR-326、miR-330-5p與 SLEDAI的相關(guān)性分析
第五章 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮略詞表
在學(xué)期間的研究成果
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3881659