類風濕關節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種以關節(jié)滑膜惡性病變?yōu)橹饕±硖卣鞯南到y(tǒng)性全身自身免疫病(Autoimmune disease,AID),其主要表現(xiàn)為小關節(jié)滑膜侵襲性、對稱性炎癥導致的關節(jié)損傷,繼而導致軟骨以及骨的破壞,最終會導致關節(jié)僵直、畸形以及功能障礙,其具體發(fā)病機制目前尚未闡明。諸多研究表明巨噬細胞是引起RA的關鍵免疫細胞之一,在RA的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要作用。巨噬細胞是機體抵御外源性損傷的第一道防線。一般認為巨噬細胞起源于單核細胞的分化。但是,近期研究發(fā)現(xiàn),不同組織或者器官中的巨噬細胞并不是完全來自于循環(huán)的單核細胞。其中卵黃囊(yalk sac)以及胎肝(fetal liver)是胚胎期巨噬細胞的兩種主要起源。關節(jié)滑膜巨噬細胞(Synovial macrophages,SM)的起源尚不清楚。重要的是,不同起源的SM,包括胚胎源滑膜巨噬細胞(Embryonic SM,ESM)以及骨髓源滑膜巨噬細胞(Bone marrow SM,BMSM)在RA患者以及在膠原誘導性關節(jié)炎(Collagen-induced arthritis,CIA)動物模型中的作...

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
Abstract
1 前言
2 實驗材料
    2.1 動物和臨床樣本
    2.2 試劑
    2.3 儀器與設備
3 實驗方法
    3.1 小鼠CIA模型的制備
    3.2 骨髓嵌合體模型的制備
    3.3 免疫組化法檢測CX3CR1⁺/GFP小鼠SM的早期表達
    3.4 流式細胞術檢測CX3CR1⁺/GFP小鼠個體發(fā)育階段中不同起源的SM的動態(tài)變化
    3.5 CCR2-/-模型檢測循環(huán)單核細胞對Ly6C⁺SM的比例影響
    3.6 流式細胞術檢測CX3CR1⁺/GFP小鼠ESM、BMSM的吞噬能力
    3.7 實時熒光定量法檢測CX3CR1⁺/GFP小鼠ESM、BMSM的炎性因子表達
    3.8 流式細胞術檢測CX3CR1⁺/GFP小鼠ESM、BMSM的原位增殖能力
    3.9 免疫組化檢測CX3CR1⁺/GFP小鼠ESM、BMSM的原位增殖能力
    3.10 骨髓嵌合體模型中探究骨髓細胞對ESM、BMSM比例的影響
    3.11 流式細胞術、HE染色和Masson染色檢測ESM、BMSM在CIA中的表型
    3.12 免疫熒光、HE染色觀察RA、OA組織病理情況
    3.13 流式細胞術檢測RA患者滑膜中不同起源SM的比例及極化趨勢
    3.14 統(tǒng)計學處理
4 結果
    4.1 CX3CR1⁺/GFP小鼠胚胎期SM的出現(xiàn)
    4.2 CX3CR1⁺/GFP小鼠不同發(fā)育階段SM的個體發(fā)育
    4.3 ESM、BMSM功能及表型的比較
    4.4 骨髓嵌合體模型中骨髓細胞對SM的影響
    4.5 CIA小鼠關節(jié)滑膜病理的HE及Masson染色情況
    4.6 CIA小鼠各病程中ESM、BMSM的動態(tài)變化
    4.7 CIA小鼠各病程中ESM、BMSM的極化狀態(tài)
    4.8 RA、OA患者關節(jié)滑膜病理及ESM、BMSM定位情況
    4.9 RA患者滑膜中ESM、BMSM比例
    4.10 RA患者ESM、BMSM的極化狀態(tài)
5 討論
    5.1 滑膜巨噬細胞新起源的發(fā)現(xiàn)
    5.2 ESM、BMSM在小鼠個體發(fā)育過程中的動態(tài)變化
    5.3 ESM、BMSM的細胞特征及表型差異
    5.4 ESM、BMSM在RA滑膜中的表型
6 結論
7 參考文獻
附錄
致謝
綜述 成纖維樣滑膜細胞與巨噬樣滑膜細胞的個體發(fā)育及功能
    參考文獻



本文編號：3871299