MiR-150通過(guò)NKT細(xì)胞和T細(xì)胞對(duì)小鼠糖尿病發(fā)生和發(fā)展的影響
發(fā)布時(shí)間:2023-11-04 10:44
目的探討miR-150通過(guò)NKT細(xì)胞和T細(xì)胞對(duì)小鼠糖尿病發(fā)生和發(fā)展的影響。方法利用miR-150基因敲除的小鼠(miR-150 knock-out,miR-150KO)和野生型正常對(duì)照C57BL/6J小鼠(Wild type,WT),采用鏈脲佐菌素(Streptozocin,STZ)注射150mg/kg/只來(lái)制備糖尿病小鼠模型,然后觀察miR-150KO和WT小鼠血糖和糖尿病發(fā)病率變化以及對(duì)不同免疫細(xì)胞的影響,α-半乳糖酰基鞘氨醇(α-galcer)6μg/只注射,觀察對(duì)STZ誘導(dǎo)的WT和miR-150KO小鼠糖尿病發(fā)病率的影響以及NKT和T細(xì)胞細(xì)胞因子的變化。選擇年齡(6-10周)匹配的雄性miR-150KO和WT小鼠各24只,注射前12h做饑餓處理,記錄小鼠體重,每只小鼠體重約20g。MiR-150基因敲除小鼠和正常C57小鼠各分為四組每組miR-150KO和WT小鼠各6只:STZ單獨(dú)組、STZ+α-galcer組、STZ+DMSO溶劑對(duì)照組以及檸檬酸緩沖液溶劑對(duì)照組。監(jiān)測(cè)小鼠尾血標(biāo)本的非空腹血糖,注射當(dāng)天為第0天,記錄小鼠血糖數(shù)值,然后每隔3天分別測(cè)量記錄,連續(xù)2次血糖水平≥13...
【文章頁(yè)數(shù)】:57 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第1章 實(shí)驗(yàn)研究
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
1.1.3 主要溶液配置
1.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 T1DM小鼠造模
1.2.2 PCR基因型鑒定
1.2.3 Real-time PCR鑒定mi R-150基因敲除
1.2.4 流式細(xì)胞術(shù)分析
1.2.5 ELISA檢測(cè)
1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
1.3 結(jié)果
1.3.1 mi R-150 KO小鼠基因鑒定
1.3.2 mi R-150 KO小鼠基因敲除Real-time PCR驗(yàn)證
1.3.3 mi R-150缺失增加了T1DM的發(fā)生率
1.3.4 STZ誘導(dǎo)沒(méi)有增加mi R-150KO小鼠的自身抗體水平
1.3.5 STZ處理使mi R-150KO小鼠NKT升高Treg細(xì)胞減少
1.3.6 STZ誘導(dǎo)mi R-150KO小鼠總T細(xì)胞中IFN-γ和IL-17 增加
1.3.7 α-galcer顯著降低了STZ誘導(dǎo)mi R-150KO小鼠發(fā)生T1DM
1.3.8 α-galcer激活WT和mi R-150KO小鼠的NKT細(xì)胞
1.3.9 α-galcer減少mi R-150KO小鼠總T細(xì)胞中IL-17的表達(dá)
1.4 討論
參考文獻(xiàn)
第2章 綜述
2.1 micro RNA
2.1.1 micro RNA簡(jiǎn)介
2.1.2 micro RNA研究進(jìn)展
2.2 T細(xì)胞
2.2.1 T細(xì)胞簡(jiǎn)介
2.2.2 T細(xì)胞研究進(jìn)展
2.3 NKT細(xì)胞
2.3.1 NKT細(xì)胞簡(jiǎn)介
2.3.2 NKT細(xì)胞研究進(jìn)展
2.4 1型糖尿病
2.4.1 T1DM簡(jiǎn)介
2.4.2 TIDM研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
結(jié)論
致謝
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
作者簡(jiǎn)介
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集
本文編號(hào):3860148
【文章頁(yè)數(shù)】:57 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第1章 實(shí)驗(yàn)研究
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
1.1.3 主要溶液配置
1.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 T1DM小鼠造模
1.2.2 PCR基因型鑒定
1.2.3 Real-time PCR鑒定mi R-150基因敲除
1.2.4 流式細(xì)胞術(shù)分析
1.2.5 ELISA檢測(cè)
1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
1.3 結(jié)果
1.3.1 mi R-150 KO小鼠基因鑒定
1.3.2 mi R-150 KO小鼠基因敲除Real-time PCR驗(yàn)證
1.3.3 mi R-150缺失增加了T1DM的發(fā)生率
1.3.4 STZ誘導(dǎo)沒(méi)有增加mi R-150KO小鼠的自身抗體水平
1.3.5 STZ處理使mi R-150KO小鼠NKT升高Treg細(xì)胞減少
1.3.6 STZ誘導(dǎo)mi R-150KO小鼠總T細(xì)胞中IFN-γ和IL-17 增加
1.3.7 α-galcer顯著降低了STZ誘導(dǎo)mi R-150KO小鼠發(fā)生T1DM
1.3.8 α-galcer激活WT和mi R-150KO小鼠的NKT細(xì)胞
1.3.9 α-galcer減少mi R-150KO小鼠總T細(xì)胞中IL-17的表達(dá)
1.4 討論
參考文獻(xiàn)
第2章 綜述
2.1 micro RNA
2.1.1 micro RNA簡(jiǎn)介
2.1.2 micro RNA研究進(jìn)展
2.2 T細(xì)胞
2.2.1 T細(xì)胞簡(jiǎn)介
2.2.2 T細(xì)胞研究進(jìn)展
2.3 NKT細(xì)胞
2.3.1 NKT細(xì)胞簡(jiǎn)介
2.3.2 NKT細(xì)胞研究進(jìn)展
2.4 1型糖尿病
2.4.1 T1DM簡(jiǎn)介
2.4.2 TIDM研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
結(jié)論
致謝
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
作者簡(jiǎn)介
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集
本文編號(hào):3860148
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