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血管緊張素(1-7)/Mas受體軸通過調(diào)控ATP敏感性鉀通道對(duì)抗高糖引起的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷

發(fā)布時(shí)間:2023-10-04 01:11
  目的研究血管緊張素(1-7)[Ang(1-7)]/Mas受體軸能否通過調(diào)控ATP敏感性鉀通道(KATP通道)對(duì)抗高糖引起的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)損傷。方法應(yīng)用40 mmol/L葡萄糖(高糖)作用HUVEC 24 h建立糖尿病血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型,應(yīng)用蛋白免疫印跡法檢測KATP通道蛋白的表達(dá)水平,CCK-8檢測細(xì)胞存活率,乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH活性,Hoechst33258核染色熒光顯微鏡照相法檢測凋亡細(xì)胞數(shù)量,雙氯熒光素染色熒光顯微鏡照相法測定細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平,羅丹明123染色熒光顯微鏡照相法測定線粒體膜電位(MMP),ELISA檢測培養(yǎng)液中白細(xì)胞介素1β(IL-1β)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)的分泌水平。結(jié)果高糖分別作用HUVEC 124 h,從3 h起KATP通道蛋白的表達(dá)水平呈時(shí)間依賴性降低,在24 h時(shí)KATP通道蛋白的表達(dá)下降最明顯。20μmol/L Ang(1-7)和高糖共處理HUVEC 24 h可抑制高糖對(duì)K

【文章頁數(shù)】:8 頁

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 實(shí)驗(yàn)分組
    1.4 KATP通道蛋白表達(dá)水平測定
    1.5 LDH活性和細(xì)胞存活率測定
    1.6 細(xì)胞凋亡檢測
    1.7 細(xì)胞內(nèi)活性氧水平測定
    1.8 線粒體膜電位水平測定
    1.9 炎癥因子分泌水平測定
    1.1 0 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 HG抑制內(nèi)皮細(xì)胞KATP通道蛋白的表達(dá)
    2.2 Ang (1-7) /Mas受體軸對(duì)抗HG引起的內(nèi)皮細(xì)胞KATP通道蛋白表達(dá)減少
    2.3 KATP通道介導(dǎo)Ang (1-7) /Mas受體軸對(duì)抗HG引起的細(xì)胞毒性作用
    2.4 KATP通道介導(dǎo)Ang (1-7) /Mas受體軸對(duì)抗HG引起的細(xì)胞凋亡
    2.5 KATP通道介導(dǎo)Ang (1-7) /Mas受體軸對(duì)抗HG引起的細(xì)胞內(nèi)ROS過度生成
    2.6 KATP通道介導(dǎo)Ang (1-7) /Mas受體軸對(duì)抗HG引起的MMP丟失
    2.7 KATP通道介導(dǎo)Ang (1-7) /Mas受體軸對(duì)抗HG引起的炎癥因子分泌增加
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本文編號(hào):3851016

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