隨著社會(huì)的發(fā)展,人們還不能完全適應(yīng)日趨豐富的飲食,糖尿病的發(fā)病率逐年上升,目前已成為繼腫瘤、心血管疾病之后嚴(yán)重影響人類(lèi)健康的疾病。小型豬的胰島素肽鏈氨基酸組成和人類(lèi)最為相近,自身的糖代謝、脂代謝的特點(diǎn)也與人類(lèi)接近,小型豬是研究糖尿病及其并發(fā)癥研究的理想模型動(dòng)物。N-乙基-N-亞硝基脲（ENU）是一種較強(qiáng)的基因誘變劑,能在相對(duì)較短的時(shí)間內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)生大量隨機(jī)突變表型,進(jìn)一步通過(guò)表型篩選及遺傳試驗(yàn)可能獲得具有特殊表型的突變系動(dòng)物,可用于建立人類(lèi)遺傳性疾病研究新模型。本研究采用巴馬小型豬作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,通過(guò)ENU誘變劑篩選建立大型哺乳動(dòng)物基因突變模型和人類(lèi)疾病動(dòng)物模型。在篩選過(guò)程中通過(guò)對(duì)豬只空腹血糖的定時(shí)監(jiān)測(cè),獲得一頭血糖偏高的種公豬。通過(guò)近親繁殖的方式,經(jīng)過(guò)數(shù)代凈化,建立高血糖家系。本論文主要研究?jī)?nèi)容:（1）以85mg/lkg劑量直接在巴馬豬公豬陰囊部位注射ENU誘變劑,獲得可提供誘變精液的種公豬。目前已建立一個(gè)可遺傳的血糖持續(xù)偏高家系2907家系,其G1代2907種公豬24個(gè)月空腹血糖持續(xù)6.3mmol/L水平以上。G3、G4代連續(xù)6個(gè)月的餐前血糖平均值分別為5.56 mmol/L和6.59 ... 

【文章頁(yè)數(shù)】：93 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 綜述
    1.1 糖尿病和糖尿病動(dòng)物模型的研究現(xiàn)狀
        1.1.1 糖尿病的簡(jiǎn)介
        1.1.2 現(xiàn)有的糖尿病動(dòng)物模型
    1.2 小型豬糖尿病模型的研究狀況
        1.2.1 我國(guó)主要小型豬品種介紹
        1.2.2 小型豬在糖尿病動(dòng)物模型的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)
        1.2.3 小型豬在糖尿病研究中應(yīng)用
    1.3 ENU誘變與育種
        1.3.1 表型驅(qū)動(dòng)法建模
        1.3.2 ENU誘變法建模
    1.4 本研究的技術(shù)路線(xiàn)、目的和意義
        1.4.1 本研究的技術(shù)路線(xiàn)
        1.4.2 本研究的目的
        1.4.3 本研究的意義
第二章 巴馬小型豬高血糖家系種公豬的選育與建系
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2.2 主要儀器
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    2.4 結(jié)果與分析
    2.5 討論
        2.5.1 2907家系種公豬的維持問(wèn)題
        2.5.2 2907家系選育成功的可行性問(wèn)題
        2.5.3 血糖偏高家系進(jìn)一步培育的策略
        2.5.4 血糖偏高家系仔豬護(hù)理
    2.6 結(jié)論
    2.7 附圖
第三章 巴馬小型豬高血糖家系生理生化及血糖相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定
    3.1 引言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組
        3.2.2 主要試劑與儀器
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3.4 結(jié)果與分析
    3.5 討論
    3.6 結(jié)論
第四章 巴馬小型豬高血糖家系組織病理學(xué)觀察和轉(zhuǎn)錄組測(cè)序
    4.1 引言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組
        4.2.2 主要試劑與儀器
        4.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    4.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
        4.3.1 參考基因組比對(duì)分析
        4.3.2 轉(zhuǎn)錄組裝和新樣本預(yù)測(cè)
        4.3.3 差異表達(dá)基因GO功能分析
        4.3.4 SNP和INDEL的注釋
        4.3.5 可變性剪切事件統(tǒng)計(jì)
    4.4 結(jié)果與分析
        4.4.1 一次性注射鏈脲佐菌素誘導(dǎo)巴馬小型豬糖尿病模型
        4.4.2 肝臟、胰臟和皮膚組織的提取
        4.4.3 肝臟、胰腺和皮膚組織切片結(jié)果
        4.4.4 RNA抽提和純化
        4.4.5 測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果
        4.4.6 正常對(duì)照組和血糖偏高豬的差異
        4.4.7 肝臟差異基因相關(guān)通路分析
        4.4.8 熒光定量PCR驗(yàn)證結(jié)果
    4.5 討論
        4.5.1 小型豬糖尿病模型的建立問(wèn)題
        4.5.2 巴馬小型豬活體取肝臟和胰臟組織
        4.5.3 肝臟、胰臟和皮膚組織病理學(xué)觀察
        4.5.4 肝臟轉(zhuǎn)錄組高通量測(cè)序
    4.6 結(jié)論
    4.7 附表和圖
第五章 總結(jié)
參考文獻(xiàn)
英文縮寫(xiě)詞表
論文發(fā)表情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]針刺對(duì)視網(wǎng)膜變性大鼠感光細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化的影響[J]. 馬瑞玲,吳根誠(chéng),張仁.  中國(guó)針灸. 2015(11)
[2]糖尿病動(dòng)物模型研究進(jìn)展及在中藥研究中的應(yīng)用[J]. 成龍,申竹芳,孫桂波,孫曉波.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2015(08)
[3]一次性靜脈注射高劑量鏈脲佐菌素建立1型糖尿病小型豬模型[J]. 崔永春,李凱,張宏,劉曉鵬,袁衛(wèi)民,李巨波,吳愛(ài)麗,唐躍.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2014(04)
[4]五指山小型豬誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的前景分析[J]. 胡鵬飛,李向臣,關(guān)偉軍,馬月輝.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2014(07)
[5]血管代謝物在糖尿病心血管并發(fā)癥早期診斷中的應(yīng)用[J]. 陳鯤,粟芃芃,邱楚英,王雪君,湯愷,秦嘉裕,王子純,周伯春.  廣州大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2014(02)
[6]巴馬小型豬在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 龐琳琳,張會(huì)永,楊關(guān)林.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2014(01)
[7]多次小劑量STZ誘導(dǎo)的成年鼠糖尿病指標(biāo)的自發(fā)恢復(fù)[J]. 李如江,邱曙東,田宏,周生偉.  動(dòng)物學(xué)研究. 2013(03)
[8]二甲雙胍對(duì)STZ誘導(dǎo)小鼠AD樣癥狀的保護(hù)作用的研究[J]. 宋金芝,熊慧,丁玲,鄭晨,王景景,鄧艷秋.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2013(06)
[9]糖尿病患者血脂4項(xiàng)和凝血4項(xiàng)指標(biāo)的變化及臨床意義[J]. 徐立民.  中國(guó)傷殘醫(yī)學(xué). 2013(01)
[10]老年糖尿病并發(fā)癥的臨床分析[J]. 何永靜.  當(dāng)代醫(yī)學(xué). 2012(31)

博士論文
[1]整合轉(zhuǎn)錄組及全基因組重測(cè)序方法鑒定影響豬脂肪沉積的關(guān)鍵基因及其變異[D]. 邢凱.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]糖尿病早期診斷肽類(lèi)生物標(biāo)志物候選物的基礎(chǔ)研究[D]. 蘇銳.北京理工大學(xué) 2014
[3]新一代測(cè)序在中國(guó)青少年起病的成人型糖尿病致病基因檢測(cè)中的應(yīng)用[D]. 劉一靜.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2014
[4]中西醫(yī)治療2型糖尿病的知識(shí)圖譜分析[D]. 王淑斌.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[5]高脂誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激對(duì)小鼠腸道菌群改變與炎癥反應(yīng)的影響[D]. 喬藝.江南大學(xué) 2014
[6]2型糖尿病相關(guān)的代謝組學(xué)和生物信息學(xué)研究[D]. 黃建華.中南大學(xué) 2014
[7]宏基因組數(shù)據(jù)分析中的統(tǒng)計(jì)方法研究[D]. 常秦.山東大學(xué) 2012
[8]RNA-seq數(shù)據(jù)的處理與應(yīng)用[D]. 王立坤.吉林大學(xué) 2012
[9]高血糖動(dòng)物模型的建立及其影響因素研究[D]. 王竹.中國(guó)疾病預(yù)防控制中心 2009

碩士論文
[1]2型糖尿病患者患病情況及慢性并發(fā)癥的相關(guān)因素分析[D]. 王月娟.吉林大學(xué) 2015
[2]ENU誘變巨結(jié)腸小鼠模型的分子機(jī)制研究[D]. 糜婷.揚(yáng)州大學(xué) 2014
[3]2型糖尿病與血脂及載脂蛋白水平關(guān)系的Meta分析[D]. 馬文艷.山西醫(yī)科大學(xué) 2014
[4]巴馬香豬血液生理生化指標(biāo)參考標(biāo)準(zhǔn)的建立及ENU誘變下血液指標(biāo)異常個(gè)體的篩選[D]. 李亮.第三軍醫(yī)大學(xué) 2013
[5]高脂高糖誘導(dǎo)巴馬小型豬2型糖尿病及肝臟轉(zhuǎn)錄組研究[D]. 夏吉瀚.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[6]版納微型豬糖尿病模型建立及其PKB的表達(dá)研究[D]. 王月婷.南華大學(xué) 2012
[7]基于RNA-Seq技術(shù)的人轉(zhuǎn)錄組分析研究[D]. 陳超.中南大學(xué) 2011
[8]超敏C-反應(yīng)蛋白與糖尿病血管病變及中醫(yī)證型相關(guān)性研究[D]. 張常波.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3677446