目的:1.探討扁蒴藤素在體外對破骨細(xì)胞分化和功能的影響并闡述相關(guān)機(jī)制;2.研究扁蒴藤素改善卵巢切除骨質(zhì)疏松模型小鼠骨量丟失的作用,研究腹腔注射扁蒴藤素后小鼠體內(nèi)骨組織結(jié)構(gòu)及血清炎癥因子的變化。方法:1.體外實(shí)驗(yàn):首先使用CKK8試劑盒檢測不同濃度的Pristimerin（0nM、5nM、10nM、25nM、50nM、75nM）在1、3、5天對小鼠BMMCs增殖的影響。在使用RANKL和M-CSF誘導(dǎo)BMMCs向破骨細(xì)胞分化過程中給予不同濃度的Pristimerin進(jìn)行干預(yù),5天后行TRAP染色及Actin環(huán)細(xì)胞骨架染色。通過骨板吸收實(shí)驗(yàn)檢測Pristimerin對破骨細(xì)胞功能的影響。通過實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot檢測Pristimerin對NFATc1和c-Fos等破骨活性相關(guān)基因表達(dá)的影響作用。最后用Western blot方法檢測NF-κB和MAPKs通路蛋白在Pristimerin處理后表達(dá)的變化。2.體內(nèi)實(shí)驗(yàn):通過切除C57小鼠（7周）雙側(cè)卵巢建立骨質(zhì)疏松模型,將小鼠分為3組:假手術(shù)組、切除卵巢組、切除卵巢+Pristimerin組。切除卵巢后第3天開始給藥,采用... 

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

CKK-8結(jié)果顯示，Pristimerin使用濃度在75nM以內(nèi)時(shí)對細(xì)胞增殖沒有影響

如圖，在BMMCs向破骨細(xì)胞分化過程中，Pristimerin可以抑制破骨細(xì)胞的形成，且濃度越大，抑制效應(yīng)越明顯（*示P＜0.05）

如圖所示，隨著Pristimerin濃度的增加，其抑制骨吸收的功能也越來越強(qiáng)（*示P＜0.05）


本文編號：3674039