發(fā)布時間：2022-08-08 11:25

　　目的:在胰島β細(xì)胞中,P2Y嘌呤受體（P2YR）的激活可以產(chǎn)生葡萄糖依賴性的促胰島素分泌作用,我們課題組之前的研究發(fā)現(xiàn)P2YR調(diào)控的胰島素分泌是通過AC/c AMP/Epac/Kv通道信號途徑實現(xiàn)的,本實驗通過全細(xì)胞膜片鉗記錄技術(shù)和檢測胰島素分泌量的實驗來證明3-磷酸肌醇激酶（PI3K）參與了P2YR/AC/c AMP/Epac/Kv通道信號途徑,從而進(jìn)一步完善了P2YR調(diào)控胰島素分泌的機制。方法:（1）大鼠斷頭處死后,用75%的酒精消毒腹部皮膚,將腹部剖開,在膽管上剪個小口,向胰腺內(nèi)注入已準(zhǔn)備好的膠原酶P,然后將胰腺組織剝離下來,放入38℃恒溫水浴中讓其消化11分鐘后,終止消化,在1200轉(zhuǎn)每分鐘的條件下離心3分鐘,棄去上清,再加10ml的1077分離液,在3200轉(zhuǎn)每分鐘的條件下離心23分鐘,在體式鏡下挑取質(zhì)量比較好的胰島（淡白色、透光率小、質(zhì)感強、直徑在100-300um間）。將分離得到的胰島用DispaseⅡ消化成胰島細(xì)胞,所得胰島和細(xì)胞一般可在一周內(nèi)使用。（2）分別用不同藥物干預(yù)胰島β細(xì)胞,用膜片鉗技術(shù)檢測各組藥物對胰島β細(xì)胞電壓依賴性鉀通道（Kv）的影響。（3）將分得的胰島... 

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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常用縮寫詞中英文對照表
前言
1 材料與方法
    1.1 藥品與試劑
    1.2 溶液的配制
    1.3 主要實驗儀器
    1.4 動物
    1.5 大鼠胰島的分離純化與培養(yǎng)
    1.6 大鼠胰島β細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
    1.7 檢測胰島素分泌實驗
    1.8 膜片鉗實驗
    1.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理
2 結(jié)果
    2.1 大鼠胰島和β細(xì)胞的分離及培養(yǎng)
    2.2 cAMP/Epac參與了P2Y受體對Kv通道的抑制作用
    2.3 P2Y受體對Kv通道的作用依賴于PI3K途徑
    2.4 PI3K是聯(lián)系Epac和Kv通道之間的一個起關(guān)鍵作用的分子
    2.5 PI3K參與了P2Y受體調(diào)控的胰島素分泌
3 討論
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]2型糖尿病患者住院費用構(gòu)成及其相關(guān)因素研究[D]. 荊文華.山東大學(xué) 2014



本文編號：3671420