發(fā)布時(shí)間：2022-07-20 15:25

　　目的探索S100A4和S100A6 mRNA在成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞分化中表達(dá)及意義。方法將MC3T3-E1細(xì)胞分成成骨誘導(dǎo)組和對照組,在有或無成骨誘導(dǎo)液的培養(yǎng)基中培養(yǎng)3、7、14和21天時(shí),分別檢測各時(shí)間段的茜素紅染色和堿性磷酸酶染色情況,使用TRIZOL法提取細(xì)胞總RNA,通過real time RT-PCR的方法檢測S100A4、S100A6、堿性磷酸酶（ALP）、骨保護(hù)素（OPG）及核因子-κβ受體活化因子配體（RANKL）mRNA表達(dá)情況。RAW264.7細(xì)胞分成破骨細(xì)胞誘導(dǎo)組和對照組,在有破骨細(xì)胞誘導(dǎo)液的培養(yǎng)基中培養(yǎng)1、3和5天時(shí),收集各時(shí)間段細(xì)胞,通過real time RT-PCR的方法檢測S100A4、S100A6及酒石酸抗酸性磷酸酶（TRAP） mRNA等表達(dá)情況。結(jié)果與未加誘導(dǎo)液組作為對照,MC3T3-E1細(xì)胞誘導(dǎo)3、7和14天時(shí),S100A4 mRNA表達(dá)逐漸減弱,而誘導(dǎo)21天時(shí)S100A4 mRNA表達(dá)比14天時(shí)要增加;S100A6 mRNA表達(dá)在誘導(dǎo)7天和14天時(shí)較低,在3天和21天時(shí)表達(dá)逐漸較高,兩者在各時(shí)間段比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與未加... 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1.實(shí)驗(yàn)材料與試劑:
    2.MC3T3-E1細(xì)胞培養(yǎng):
    3.茜素紅染色:
    4.堿性磷酸酶染色:
    5.總RNA提取和real time RT-PCR:
    6.RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng):
    7.TRAP染色:
    8.總RNA提取和real time RT-PCR:
    9.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:
結(jié) 果
    1.茜素紅染色結(jié)果:
    2.堿性磷酸酶染色結(jié)果:
    3.MC3T3-E1細(xì)胞成骨誘導(dǎo)中細(xì)胞real time RT-RCR結(jié)果:
    4.TRAP染色結(jié)果:
    5.RAW264.7細(xì)胞分化中real time RT-RCR結(jié)果:
討 論



本文編號：3664244