類風濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis,RA）是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎癥為病理特征的慢性系統(tǒng)性自身免疫病,目前其發(fā)病機制尚不明確。大量研究表明,RA發(fā)病機制和疾病進程與固有免疫細胞、適應(yīng)性免疫細胞和成纖維樣滑膜細胞（fibroblast-like synoviocyte,FLS）等各種細胞以及腫瘤壞死因子（tumor neurosis factor,TNF）和前列腺素E2（prostaglandin E2,PGE2）等炎性介質(zhì)共同作用密切相關(guān)。色氨酸（tryptophan,Trp）作為哺乳動物體內(nèi)的必需氨基酸,通過參與蛋白質(zhì)和核酸合成維持細胞生理活動,以及產(chǎn)生活性代謝物等對機體的免疫調(diào)節(jié)功能發(fā)揮重要作用。機體95%以上的Trp通過犬尿氨酸途徑（kynurenine pathway,KP）代謝,已有研究表明KP代謝異常在RA的病理機制中發(fā)揮重要作用。色氨酸-2,3-雙加氧酶2（tryptophan-2,3-dioxygenase2,TDO2）、吲哚-2,3-雙加氧酶1（indoleamine-2,3-dioxygenase1,IDO1）和吲哚-2,3-雙加氧酶2（indolea... 

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表(Abbreviation)
摘要
Abstract
1 前言
2 實驗材料
    2.1 動物
    2.2 細胞株
    2.3 藥物與試劑
    2.4 主要溶液配制
    2.5 儀器與設(shè)備
3 實驗方法
    3.1 免疫組化法檢測DBA/1小鼠組織中TDO2蛋白的表達
    3.2 RT-qPCR法檢測DBA/1小鼠組織中TDO2的mRNA表達
    3.3 DBA/1小鼠脾臟和淋巴結(jié)免疫細胞的分離
    3.4 流式細胞術(shù)檢測DBA/1小鼠脾臟T、B細胞亞群、NK和DC中TDO2表達
    3.5 成像流式細胞術(shù)檢測DBA/1小鼠脾臟T、B細胞亞群、NK和DC中TDO2表達
    3.6 小鼠腹腔巨噬細胞的分離、原代培養(yǎng)和鑒定
    3.7 激光共聚焦法檢測DBA/1小鼠PM中 TDO2 的表達
    3.8 小鼠CIA模型的建立
    3.9 CIA小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)測定
    3.10 CIA小鼠踝關(guān)節(jié)、脾臟和肝臟病理的觀察
    3.11 RT-qPCR法檢測CIA小鼠腹腔巨噬細胞中TDO2 mRNA的表達
    3.12 Raw264.7細胞株的分組處理
    3.13 RT-q PCR法檢測Raw264.7細胞中TDO2和EP4的mRNA表達
    3.14 比色法檢測Raw264.7細胞上清中Kyn含量
    3.15 流式細胞術(shù)檢測Raw264.7細胞的吞噬功能
    3.16 統(tǒng)計學處理
4 結(jié)果
    4.1 DBA/1小鼠各種組織中TDO2 mRNA和蛋白表達
    4.2 TDO2在DBA/1小鼠脾臟和腸系膜淋巴結(jié)免疫細胞中的表達
    4.3 TDO2在DBA/1小鼠免疫細胞中的表達
    4.4 TDO2在DBA/1小鼠PM中的表達
    4.5 CIA小鼠的整體指標評價和病理學變化
        4.5.1 CIA小鼠整體指標的評價
        4.5.2 CIA小鼠踝關(guān)節(jié)、脾臟和肝臟的病理學變化
    4.6 TDO2在CIA小鼠踝關(guān)節(jié)、脾臟和肝臟中的表達
    4.7 TDO2在CIA小鼠脾臟和腸系膜淋巴結(jié)免疫細胞中的表達
        4.7.1 TDO2小鼠在CIA小鼠脾臟T細胞亞群中的表達
        4.7.2 TDO2在CIA小鼠脾臟B細胞亞群中的表達
        4.7.3 TDO2在CIA小鼠脾臟DC和NK細胞中的表達
        4.7.4 TDO2在CIA小鼠腸系膜淋巴結(jié)免疫細胞中的表達
    4.8 TDO2在CIA小鼠PM細胞中的表達
    4.9 TDO2 siRNA最佳序列的選擇
    4.10 TDO2對Raw264.7細胞吞噬功能的影響
    4.11 PGE2不同濃度刺激后對Raw264.7細胞的吞噬能力以及對TDO2表達和酶活性的影響
        4.11.1 不同濃度PGE2刺激后對Raw264.7細胞吞噬能力的影響
        4.11.2 不同濃度PGE2刺激后對Raw264.7細胞TDO2 mRNA和蛋白表達的影響
        4.11.3 不同濃度PGE2刺激后對Raw264.7細胞TDO2酶活性的影響
    4.12 EP4 選擇性激動劑對Raw264.7吞噬功能和TDO2 mRNA表達和活性的影響
        4.12.1 EP4 選擇性激動劑CAY10598對Raw264.7的吞噬功能的影響
        4.12.2 CAY10598對Raw264.7細胞TDO2 mRNA表達的影響
        4.12.3 CAY10598對Raw264.7的TDO2酶,活性的影響
    4.13 TDO2對Raw264.7細胞EP4mRNA表達的影響
5 討論
6 結(jié)論
7 參考文獻
附錄
致謝
綜述:色氨酸-2,3-雙加氧酶2:治療癌癥、神經(jīng)退行性疾病和炎癥的潛在靶點
    參考文獻


【參考文獻】：
博士論文
[1]G蛋白偶聯(lián)受體激酶2介導(dǎo)PGE2-EP4-cAMP-CREB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)異常參與CIA小鼠巨噬細胞極化及CP-25的作用[D]. 楊雪枝.安徽醫(yī)科大學 2019

碩士論文
[1]革巴向IgD-IgDR抑制劑，IgD-Fc-Ig融合蛋白對小鼠膠原性關(guān)節(jié)炎的治療作用及對T細胞活性的調(diào)控[D]. 張靜.安徽醫(yī)科大學 2019



本文編號：3658658