類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis,RA）是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎癥為病理特征的慢性系統(tǒng)性自身免疫病,目前其發(fā)病機(jī)制尚不明確。大量研究表明,RA發(fā)病機(jī)制和疾病進(jìn)程與固有免疫細(xì)胞、適應(yīng)性免疫細(xì)胞和成纖維樣滑膜細(xì)胞（fibroblast-like synoviocyte,FLS）等各種細(xì)胞以及腫瘤壞死因子（tumor neurosis factor,TNF）和前列腺素E2（prostaglandin E2,PGE2）等炎性介質(zhì)共同作用密切相關(guān)。色氨酸（tryptophan,Trp）作為哺乳動(dòng)物體內(nèi)的必需氨基酸,通過參與蛋白質(zhì)和核酸合成維持細(xì)胞生理活動(dòng),以及產(chǎn)生活性代謝物等對(duì)機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)功能發(fā)揮重要作用。機(jī)體95%以上的Trp通過犬尿氨酸途徑（kynurenine pathway,KP）代謝,已有研究表明KP代謝異常在RA的病理機(jī)制中發(fā)揮重要作用。色氨酸-2,3-雙加氧酶2（tryptophan-2,3-dioxygenase2,TDO2）、吲哚-2,3-雙加氧酶1（indoleamine-2,3-dioxygenase1,IDO1）和吲哚-2,3-雙加氧酶2（indolea... 

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表(Abbreviation)
摘要
Abstract
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 動(dòng)物
    2.2 細(xì)胞株
    2.3 藥物與試劑
    2.4 主要溶液配制
    2.5 儀器與設(shè)備
3 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 免疫組化法檢測DBA/1小鼠組織中TDO2蛋白的表達(dá)
    3.2 RT-qPCR法檢測DBA/1小鼠組織中TDO2的mRNA表達(dá)
    3.3 DBA/1小鼠脾臟和淋巴結(jié)免疫細(xì)胞的分離
    3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測DBA/1小鼠脾臟T、B細(xì)胞亞群、NK和DC中TDO2表達(dá)
    3.5 成像流式細(xì)胞術(shù)檢測DBA/1小鼠脾臟T、B細(xì)胞亞群、NK和DC中TDO2表達(dá)
    3.6 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的分離、原代培養(yǎng)和鑒定
    3.7 激光共聚焦法檢測DBA/1小鼠PM中 TDO2 的表達(dá)
    3.8 小鼠CIA模型的建立
    3.9 CIA小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)測定
    3.10 CIA小鼠踝關(guān)節(jié)、脾臟和肝臟病理的觀察
    3.11 RT-qPCR法檢測CIA小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中TDO2 mRNA的表達(dá)
    3.12 Raw264.7細(xì)胞株的分組處理
    3.13 RT-q PCR法檢測Raw264.7細(xì)胞中TDO2和EP4的mRNA表達(dá)
    3.14 比色法檢測Raw264.7細(xì)胞上清中Kyn含量
    3.15 流式細(xì)胞術(shù)檢測Raw264.7細(xì)胞的吞噬功能
    3.16 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
4 結(jié)果
    4.1 DBA/1小鼠各種組織中TDO2 mRNA和蛋白表達(dá)
    4.2 TDO2在DBA/1小鼠脾臟和腸系膜淋巴結(jié)免疫細(xì)胞中的表達(dá)
    4.3 TDO2在DBA/1小鼠免疫細(xì)胞中的表達(dá)
    4.4 TDO2在DBA/1小鼠PM中的表達(dá)
    4.5 CIA小鼠的整體指標(biāo)評(píng)價(jià)和病理學(xué)變化
        4.5.1 CIA小鼠整體指標(biāo)的評(píng)價(jià)
        4.5.2 CIA小鼠踝關(guān)節(jié)、脾臟和肝臟的病理學(xué)變化
    4.6 TDO2在CIA小鼠踝關(guān)節(jié)、脾臟和肝臟中的表達(dá)
    4.7 TDO2在CIA小鼠脾臟和腸系膜淋巴結(jié)免疫細(xì)胞中的表達(dá)
        4.7.1 TDO2小鼠在CIA小鼠脾臟T細(xì)胞亞群中的表達(dá)
        4.7.2 TDO2在CIA小鼠脾臟B細(xì)胞亞群中的表達(dá)
        4.7.3 TDO2在CIA小鼠脾臟DC和NK細(xì)胞中的表達(dá)
        4.7.4 TDO2在CIA小鼠腸系膜淋巴結(jié)免疫細(xì)胞中的表達(dá)
    4.8 TDO2在CIA小鼠PM細(xì)胞中的表達(dá)
    4.9 TDO2 siRNA最佳序列的選擇
    4.10 TDO2對(duì)Raw264.7細(xì)胞吞噬功能的影響
    4.11 PGE2不同濃度刺激后對(duì)Raw264.7細(xì)胞的吞噬能力以及對(duì)TDO2表達(dá)和酶活性的影響
        4.11.1 不同濃度PGE2刺激后對(duì)Raw264.7細(xì)胞吞噬能力的影響
        4.11.2 不同濃度PGE2刺激后對(duì)Raw264.7細(xì)胞TDO2 mRNA和蛋白表達(dá)的影響
        4.11.3 不同濃度PGE2刺激后對(duì)Raw264.7細(xì)胞TDO2酶活性的影響
    4.12 EP4 選擇性激動(dòng)劑對(duì)Raw264.7吞噬功能和TDO2 mRNA表達(dá)和活性的影響
        4.12.1 EP4 選擇性激動(dòng)劑CAY10598對(duì)Raw264.7的吞噬功能的影響
        4.12.2 CAY10598對(duì)Raw264.7細(xì)胞TDO2 mRNA表達(dá)的影響
        4.12.3 CAY10598對(duì)Raw264.7的TDO2酶,活性的影響
    4.13 TDO2對(duì)Raw264.7細(xì)胞EP4mRNA表達(dá)的影響
5 討論
6 結(jié)論
7 參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述:色氨酸-2,3-雙加氧酶2:治療癌癥、神經(jīng)退行性疾病和炎癥的潛在靶點(diǎn)
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]G蛋白偶聯(lián)受體激酶2介導(dǎo)PGE2-EP4-cAMP-CREB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)異常參與CIA小鼠巨噬細(xì)胞極化及CP-25的作用[D]. 楊雪枝.安徽醫(yī)科大學(xué) 2019

碩士論文
[1]革巴向IgD-IgDR抑制劑，IgD-Fc-Ig融合蛋白對(duì)小鼠膠原性關(guān)節(jié)炎的治療作用及對(duì)T細(xì)胞活性的調(diào)控[D]. 張靜.安徽醫(yī)科大學(xué) 2019



本文編號(hào)：3658658