不同碘營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)對(duì)甲狀腺細(xì)胞P38/MAPK通路介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的作用及機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2022-07-08 13:57
目的從細(xì)胞水平探討不同碘營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)對(duì)人正常甲狀腺細(xì)胞P38/MAPK通路介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的作用及在這一過(guò)程中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激所起的作用。方法體外培養(yǎng)人正常甲狀腺細(xì)胞株(Nthy-ori-3-1),取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,培養(yǎng)于六孔板中,待細(xì)胞相互接觸,融合度達(dá)100%時(shí),以此做為實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象,進(jìn)行不同濃度的碘化鉀及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制劑(4-PBA)、P38/MAPK通路阻斷劑(SB203580)干預(yù),運(yùn)用Western-blot測(cè)定干預(yù)后p-P38、PEKR、IRE1、ATF6蛋白的表達(dá)水平,運(yùn)用Real Time PCR檢測(cè)細(xì)胞中MCP-1 mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果1.(1)相對(duì)于適碘狀態(tài),不良碘營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)(高碘、低碘、碘波動(dòng)狀態(tài))p-P38蛋白、MCP-1 mRNA的表達(dá)量均顯著升高(P<0.05);(2)高碘狀態(tài)相對(duì)低碘狀態(tài),p-P38蛋白、MCP-1 mRNA的表達(dá)顯著升高(P<0.05);(3)高碘狀態(tài)與碘波動(dòng)狀態(tài)、低碘狀態(tài)與碘波動(dòng)狀態(tài)之間p-P38蛋白、MCP-1 mRNA的表達(dá)無(wú)顯著區(qū)別(P>0.05);(4)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白(PERK、IER1、ATF6)的表達(dá)量在各組...
【文章頁(yè)數(shù)】:69 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞
中文摘要
英文摘要
前言
實(shí)驗(yàn)一:不同碘營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)對(duì)甲狀腺細(xì)胞P38/MAPK通路介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的作用
1 材料
1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
1.2 主要實(shí)驗(yàn)材料、試劑及配制
2 方法
2.1 人正常甲狀腺細(xì)胞株培養(yǎng)
2.2 實(shí)驗(yàn)分組
2.3 蛋白提取
2.4 Western-blot檢測(cè)細(xì)胞中PERK、IRE1、ATF6、p-P38蛋白的表達(dá)量
2.5 RNA提取
2.6 Real TimePCR檢測(cè)細(xì)胞中MCP-1mRNA的表達(dá)量
2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 各分組p-P38蛋白及MCP-1mRNA表達(dá)量的比較
3.2 各分組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白表達(dá)量的比較
4 討論
實(shí)驗(yàn)二:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對(duì)不良碘營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的作用
1 材料
1.1 4-PBA(內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制劑)的配制
1.2 實(shí)驗(yàn)儀器、實(shí)驗(yàn)材料、其它試劑及配制
2 方法
2.1 實(shí)驗(yàn)分組
2.2 其他實(shí)驗(yàn)方法
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 各分組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白表達(dá)量的比較
3.2 各分組p-P38蛋白及MCP-1mRNA表達(dá)量的比較
4 討論
實(shí)驗(yàn)三:P38/MAPK通路介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的作用
1 材料
1.1 干預(yù)液配制
1.2 實(shí)驗(yàn)儀器、實(shí)驗(yàn)材料、其它試劑及配制
2 方法
2.1 實(shí)驗(yàn)分組
2.2 其他實(shí)驗(yàn)方法
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 各分組p-P38蛋白及MCP-1mRNA表達(dá)量的比較
3.2 各分組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白表達(dá)量的比較
4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]細(xì)胞因子IFN-γ、IL-6、IL-17和TGF-β1在Graves病發(fā)病中的作用[J]. 李紅林,高美華,鄭云會(huì),楊士軍,劉艷秋,陸衛(wèi)平. 中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2015(02)
[2]Graves病患者血清25(OH)D水平及其與甲狀腺激素和自身抗體的相關(guān)性[J]. 韓英,程耀科,陳玉娟,李詠梅,江雁瓊,張少峰. 中國(guó)臨床研究. 2013(07)
[3]細(xì)胞凋亡與自身免疫性甲狀腺病的關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 韋華,王民登. 右江醫(yī)學(xué). 2006(03)
[4]細(xì)胞內(nèi)炎癥信號(hào)通路交匯作用研究進(jìn)展[J]. 劉輝,姚詠明. 感染.炎癥.修復(fù). 2003(04)
本文編號(hào):3657152
【文章頁(yè)數(shù)】:69 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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中文摘要
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實(shí)驗(yàn)一:不同碘營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)對(duì)甲狀腺細(xì)胞P38/MAPK通路介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)的作用
1 材料
1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
1.2 主要實(shí)驗(yàn)材料、試劑及配制
2 方法
2.1 人正常甲狀腺細(xì)胞株培養(yǎng)
2.2 實(shí)驗(yàn)分組
2.3 蛋白提取
2.4 Western-blot檢測(cè)細(xì)胞中PERK、IRE1、ATF6、p-P38蛋白的表達(dá)量
2.5 RNA提取
2.6 Real TimePCR檢測(cè)細(xì)胞中MCP-1mRNA的表達(dá)量
2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 各分組p-P38蛋白及MCP-1mRNA表達(dá)量的比較
3.2 各分組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)蛋白表達(dá)量的比較
4 討論
實(shí)驗(yàn)二:內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激對(duì)不良碘營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的作用
1 材料
1.1 4-PBA(內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激抑制劑)的配制
1.2 實(shí)驗(yàn)儀器、實(shí)驗(yàn)材料、其它試劑及配制
2 方法
2.1 實(shí)驗(yàn)分組
2.2 其他實(shí)驗(yàn)方法
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 各分組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白表達(dá)量的比較
3.2 各分組p-P38蛋白及MCP-1mRNA表達(dá)量的比較
4 討論
實(shí)驗(yàn)三:P38/MAPK通路介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的作用
1 材料
1.1 干預(yù)液配制
1.2 實(shí)驗(yàn)儀器、實(shí)驗(yàn)材料、其它試劑及配制
2 方法
2.1 實(shí)驗(yàn)分組
2.2 其他實(shí)驗(yàn)方法
2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3 結(jié)果
3.1 各分組p-P38蛋白及MCP-1mRNA表達(dá)量的比較
3.2 各分組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白表達(dá)量的比較
4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]細(xì)胞因子IFN-γ、IL-6、IL-17和TGF-β1在Graves病發(fā)病中的作用[J]. 李紅林,高美華,鄭云會(huì),楊士軍,劉艷秋,陸衛(wèi)平. 中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2015(02)
[2]Graves病患者血清25(OH)D水平及其與甲狀腺激素和自身抗體的相關(guān)性[J]. 韓英,程耀科,陳玉娟,李詠梅,江雁瓊,張少峰. 中國(guó)臨床研究. 2013(07)
[3]細(xì)胞凋亡與自身免疫性甲狀腺病的關(guān)系研究進(jìn)展[J]. 韋華,王民登. 右江醫(yī)學(xué). 2006(03)
[4]細(xì)胞內(nèi)炎癥信號(hào)通路交匯作用研究進(jìn)展[J]. 劉輝,姚詠明. 感染.炎癥.修復(fù). 2003(04)
本文編號(hào):3657152
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/nfm/3657152.html
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