不同碘營養(yǎng)狀態(tài)對甲狀腺細胞P38/MAPK通路介導的炎癥反應的作用及機制
發(fā)布時間:2022-07-08 13:57
目的從細胞水平探討不同碘營養(yǎng)狀態(tài)對人正常甲狀腺細胞P38/MAPK通路介導的炎癥反應的作用及在這一過程中內質網應激所起的作用。方法體外培養(yǎng)人正常甲狀腺細胞株(Nthy-ori-3-1),取對數(shù)生長期的細胞,培養(yǎng)于六孔板中,待細胞相互接觸,融合度達100%時,以此做為實驗研究對象,進行不同濃度的碘化鉀及內質網應激抑制劑(4-PBA)、P38/MAPK通路阻斷劑(SB203580)干預,運用Western-blot測定干預后p-P38、PEKR、IRE1、ATF6蛋白的表達水平,運用Real Time PCR檢測細胞中MCP-1 mRNA的表達水平。結果1.(1)相對于適碘狀態(tài),不良碘營養(yǎng)狀態(tài)(高碘、低碘、碘波動狀態(tài))p-P38蛋白、MCP-1 mRNA的表達量均顯著升高(P<0.05);(2)高碘狀態(tài)相對低碘狀態(tài),p-P38蛋白、MCP-1 mRNA的表達顯著升高(P<0.05);(3)高碘狀態(tài)與碘波動狀態(tài)、低碘狀態(tài)與碘波動狀態(tài)之間p-P38蛋白、MCP-1 mRNA的表達無顯著區(qū)別(P>0.05);(4)內質網應激相關蛋白(PERK、IER1、ATF6)的表達量在各組...
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞
中文摘要
英文摘要
前言
實驗一:不同碘營養(yǎng)狀態(tài)對甲狀腺細胞P38/MAPK通路介導的炎癥反應的作用
1 材料
1.1 主要實驗儀器
1.2 主要實驗材料、試劑及配制
2 方法
2.1 人正常甲狀腺細胞株培養(yǎng)
2.2 實驗分組
2.3 蛋白提取
2.4 Western-blot檢測細胞中PERK、IRE1、ATF6、p-P38蛋白的表達量
2.5 RNA提取
2.6 Real TimePCR檢測細胞中MCP-1mRNA的表達量
2.7 統(tǒng)計學分析
3 結果
3.1 各分組p-P38蛋白及MCP-1mRNA表達量的比較
3.2 各分組內質網相關蛋白表達量的比較
4 討論
實驗二:內質網應激對不良碘營養(yǎng)狀態(tài)介導炎癥反應的作用
1 材料
1.1 4-PBA(內質網應激抑制劑)的配制
1.2 實驗儀器、實驗材料、其它試劑及配制
2 方法
2.1 實驗分組
2.2 其他實驗方法
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結果
3.1 各分組內質網應激相關蛋白表達量的比較
3.2 各分組p-P38蛋白及MCP-1mRNA表達量的比較
4 討論
實驗三:P38/MAPK通路介導的炎癥反應對內質網應激的作用
1 材料
1.1 干預液配制
1.2 實驗儀器、實驗材料、其它試劑及配制
2 方法
2.1 實驗分組
2.2 其他實驗方法
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結果
3.1 各分組p-P38蛋白及MCP-1mRNA表達量的比較
3.2 各分組內質網應激相關蛋白表達量的比較
4 討論
結論
參考文獻
綜述
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]細胞因子IFN-γ、IL-6、IL-17和TGF-β1在Graves病發(fā)病中的作用[J]. 李紅林,高美華,鄭云會,楊士軍,劉艷秋,陸衛(wèi)平. 中國免疫學雜志. 2015(02)
[2]Graves病患者血清25(OH)D水平及其與甲狀腺激素和自身抗體的相關性[J]. 韓英,程耀科,陳玉娟,李詠梅,江雁瓊,張少峰. 中國臨床研究. 2013(07)
[3]細胞凋亡與自身免疫性甲狀腺病的關系研究進展[J]. 韋華,王民登. 右江醫(yī)學. 2006(03)
[4]細胞內炎癥信號通路交匯作用研究進展[J]. 劉輝,姚詠明. 感染.炎癥.修復. 2003(04)
本文編號:3657152
【文章頁數(shù)】:69 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
縮略詞
中文摘要
英文摘要
前言
實驗一:不同碘營養(yǎng)狀態(tài)對甲狀腺細胞P38/MAPK通路介導的炎癥反應的作用
1 材料
1.1 主要實驗儀器
1.2 主要實驗材料、試劑及配制
2 方法
2.1 人正常甲狀腺細胞株培養(yǎng)
2.2 實驗分組
2.3 蛋白提取
2.4 Western-blot檢測細胞中PERK、IRE1、ATF6、p-P38蛋白的表達量
2.5 RNA提取
2.6 Real TimePCR檢測細胞中MCP-1mRNA的表達量
2.7 統(tǒng)計學分析
3 結果
3.1 各分組p-P38蛋白及MCP-1mRNA表達量的比較
3.2 各分組內質網相關蛋白表達量的比較
4 討論
實驗二:內質網應激對不良碘營養(yǎng)狀態(tài)介導炎癥反應的作用
1 材料
1.1 4-PBA(內質網應激抑制劑)的配制
1.2 實驗儀器、實驗材料、其它試劑及配制
2 方法
2.1 實驗分組
2.2 其他實驗方法
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結果
3.1 各分組內質網應激相關蛋白表達量的比較
3.2 各分組p-P38蛋白及MCP-1mRNA表達量的比較
4 討論
實驗三:P38/MAPK通路介導的炎癥反應對內質網應激的作用
1 材料
1.1 干預液配制
1.2 實驗儀器、實驗材料、其它試劑及配制
2 方法
2.1 實驗分組
2.2 其他實驗方法
2.3 統(tǒng)計學分析
3 結果
3.1 各分組p-P38蛋白及MCP-1mRNA表達量的比較
3.2 各分組內質網應激相關蛋白表達量的比較
4 討論
結論
參考文獻
綜述
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]細胞因子IFN-γ、IL-6、IL-17和TGF-β1在Graves病發(fā)病中的作用[J]. 李紅林,高美華,鄭云會,楊士軍,劉艷秋,陸衛(wèi)平. 中國免疫學雜志. 2015(02)
[2]Graves病患者血清25(OH)D水平及其與甲狀腺激素和自身抗體的相關性[J]. 韓英,程耀科,陳玉娟,李詠梅,江雁瓊,張少峰. 中國臨床研究. 2013(07)
[3]細胞凋亡與自身免疫性甲狀腺病的關系研究進展[J]. 韋華,王民登. 右江醫(yī)學. 2006(03)
[4]細胞內炎癥信號通路交匯作用研究進展[J]. 劉輝,姚詠明. 感染.炎癥.修復. 2003(04)
本文編號:3657152
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