發(fā)布時(shí)間：2022-02-22 18:56

　　目的探討骨質(zhì)疏松骨髓病理微環(huán)境對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）生物學(xué)特性的影響。方法通過皮下注射過量地塞米松（Dex）建立激素型骨質(zhì)疏松動物模型,并分離正常小鼠MSCs進(jìn)行體外培養(yǎng)。分別收集小鼠骨質(zhì)疏松模型組（OP組）及對照組（NC組）骨髓液,處理正常培養(yǎng)MSCs。細(xì)胞增殖能力以CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測;細(xì)胞凋亡水平通過脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法（TUNEL）檢測;細(xì)胞遷移能力通過劃痕實(shí)驗(yàn)及transwell實(shí)驗(yàn)檢測;成骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞分化情況分別以茜素紅染色及油紅O染色鑒定;以實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Realtime PCR）檢測成骨細(xì)胞特異性基因(Osterix（Osx）、Ⅰ型膠原（Colla1）及脂肪細(xì)胞特異性基因（aP2、Glut4）的表達(dá);Western blot檢測成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子（Osx、Runx2）及脂肪細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子（C/EBPα、 PPARγ）的蛋白水平。結(jié)果 Dex連續(xù)注射5周后小鼠出現(xiàn)明顯骨丟失表型。OP組骨髓液處理下MSCs增殖能力明顯下降,而凋亡細(xì)胞數(shù)量隨處理時(shí)間的增加而增加。遷移能力明顯下降,遷移細(xì)胞數(shù)顯著減少（P<0.05）。此外OP組骨髓液顯著降... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,43(01)

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動物及材料
    1.2 方法
        1.2.1 動物模型建立
        1.2.2 骨質(zhì)疏松骨髓液收集
        1.2.3 MSCs體外培養(yǎng)及分化
        1.2.4 細(xì)胞增殖檢測
        1.2.5 細(xì)胞凋亡檢測
        1.2.6 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)
        1.2.7 Transwell實(shí)驗(yàn)
        1.2.8 細(xì)胞分化誘導(dǎo)
        1.2.9 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Realtime PCR)
        1.2.10 Western blot
        1.2.11 茜素紅染色
        1.2.12 油紅O染色
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 骨質(zhì)疏松病理骨髓液抑制MSCs增殖
    2.2 骨質(zhì)疏松病理骨髓液促進(jìn)MSCs凋亡
    2.3 骨質(zhì)疏松病理骨髓液抑制MSCs遷移
    2.4 骨質(zhì)疏松病理骨髓液抑制MSCs成骨分化
    2.5 骨質(zhì)疏松病理骨髓液促進(jìn)MSCs成脂分化
    2.6 骨質(zhì)疏松病理骨髓液影響MSCs分化相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]調(diào)節(jié)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的微環(huán)境因素研究進(jìn)展[J]. 陳雪,鄧子翔,牛云飛.  實(shí)用骨科雜志. 2018(08)
[2]骨質(zhì)疏松骨髓微環(huán)境的影像研究進(jìn)展[J]. 吳興,湯光宇.  國際醫(yī)學(xué)放射學(xué)雜志. 2016(04)
[3]骨髓造血干細(xì)胞微環(huán)境[J]. 唐紅梅,馬靜,韓代書.  細(xì)胞生物學(xué)雜志. 2008(03)

碩士論文
[1]CKIP-1調(diào)控骨質(zhì)疏松大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化能力的研究[D]. 龍燕鳴.廣西醫(yī)科大學(xué) 2019



本文編號：3640037