目的本研究主要從細胞水平探討整合素αvβ5在高糖/oxLDL狀態(tài)下誘導HLSECs功能障礙的分子機制及相關(guān)信號途徑。方法體外培養(yǎng)HLSECs并用葡萄糖（25mM,24h）/ox-LDL（100μg/ml,24h）處理,分別使用αvβ5抑制劑RGDfv,FAK抑制劑DF228,ERK抑制劑PD98059進行干預。MTT比色法用于檢測HLSECs活力并確定實驗分組;采用RT-PCR,Western blotting和免疫熒光技術(shù)檢測整合素αvβ5,FAK,ERK,VN的表達水平;掃描電子顯微鏡檢測葡萄糖/ox-LDL對HLSECs的影響。采用SPSS21.0軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。結(jié)果1.葡萄糖或oxLDL作用下,整合素αv,整合素β5,FAK,ERK,VN的表達均以時間及濃度依賴方式增加,且在葡萄糖濃度25mM,24h,oxLDL濃度100μg/ml,24h時升高最明顯,此時的細胞活力最強。兩者同時作用時升高更為顯著（P<0.05）。2.使用整合素αvβ5抑制劑RGDfv對各組細胞進行干預時,ERK,FAK及VN的表達下調(diào)。使用FAK抑制劑DF228干預HLSECs,ERK及... 

【文章來源】：甘肅中醫(yī)藥大學甘肅省

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

蛋白標準曲線圖

圖 2 倒置相差顯微鏡下正常 HLSECs 的形態(tài)Fig. 2. The shape of HLSECs (×200)2.2 CD31 相關(guān)抗原鑒定肝竇內(nèi)皮細胞免疫熒光方法檢測結(jié)果鏡下顯示，CD31（綠色）均勻地分布于 HLSECs 的細胞質(zhì)和細胞膜中（圖 3A），而在陰性對照組未見綠色熒光熒光分布（圖 3B）。

高糖/oxLDL 狀態(tài)下整合素 αvβ5 通過 FAK/ERK 信號途徑誘導肝竇毛細血管化第 2 章 實驗結(jié)果內(nèi)皮細胞的形態(tài)肝竇內(nèi)皮細胞在倒置相差顯微鏡下觀察顯示：細胞形態(tài)扁平、細胞核突起位于中央，細胞間緊密靠攏，呈“鵝卵石”樣結(jié)構(gòu)。

【參考文獻】：
期刊論文
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