優(yōu)化3T3L1細胞成脂誘導(dǎo)模型并初步探討miR-222-3p對脂肪生成的作用
發(fā)布時間:2022-02-13 12:08
一、研究背景肥胖是由機體能量攝入超過能量消耗而造成的一類代謝綜合征,具有白色脂肪組織(WAT)過度沉積、中性脂肪細胞異常增殖及分化失衡的主要表現(xiàn)。同時由于脂肪組織具備調(diào)節(jié)體溫、儲存能量、緩沖機械沖擊等作用,而肥胖加劇了脂肪組織的炎癥效應(yīng),致使一些心血管疾病如高血壓、血栓等的發(fā)病率同死亡率都增高。細胞生物學(xué)方面,前脂肪細胞是一類同時具有增殖及分化為成熟脂肪細胞能力的前體細胞,此種前體細胞在不同的生長因子、激素等的作用下,經(jīng)歷有絲分裂克隆期、生長停滯期、進一步的克隆期、終末分化四個階段,細胞本身的成纖維狀態(tài)發(fā)生改變,通過胞質(zhì)內(nèi)甘油三酯聚集形成成熟脂肪細胞,這一過程,稱為“成脂分化”,該過程一直是肥胖研究領(lǐng)域的熱點。為了能夠直觀地了解細胞分化內(nèi)部脂質(zhì)累積的過程,需要在體外建立數(shù)量可控,分化較為穩(wěn)定的成熟脂肪細胞分化模型。小鼠的3T3L1細胞源于18天左右胎齡的Swiss小鼠胚胎,能夠在適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)條件下分化為成熟脂肪細胞,同時將其移植入小鼠的體內(nèi)后也可以進行單一分化,能模擬活體脂肪組織,因此3T3-L1成纖維細胞系一直是最廣泛用來進行相關(guān)體外研究的細胞系之一[1,2]。經(jīng)典的3T3-L1前脂肪...
【文章來源】:湖北中醫(yī)藥大學(xué)湖北省
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
經(jīng)典激素“雞尾酒“誘導(dǎo)分化3T3L1細胞示意圖
不同葡萄糖濃度對3T3-L1細胞成脂肪分化的影響
湖北中醫(yī)藥大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文143.2不同誘導(dǎo)劑的作用時間對小鼠3T3L1前脂肪細胞成脂分化率的影響經(jīng)典“雞尾酒”方法創(chuàng)立以來,很多學(xué)者對條件進行了改良,但很多方法改良后運用到不同實驗室后都未能顯示相同的效果,如有學(xué)者將誘導(dǎo)液Ⅰ處理時間延長到72小時,誘導(dǎo)分化率達到了90%以上[35],但是在本實驗條件下嘗試后,延長到72小時的效果不如原先的48小時,特別是在36h后觀察細胞發(fā)現(xiàn)卷邊死亡情況。因此旨在研究誘導(dǎo)液Ⅱ?qū)毎T導(dǎo)率的影響,染色結(jié)果顯示:A組:(2DAY)、B組:(3DAY)、C組:(4DAY)相對于對照組都有載脂的脂肪細胞形成,而B組視野內(nèi)的陽性細胞明顯多于A組和C組,脂滴密度也相對較高,而延長時間到4天顯然沒有得到比2天更高的分化率(圖3),細胞計數(shù)結(jié)果為:A組:2DAY(59.2%±2.2%)、B組:3DAY(86.2%±1.9%)、C組:4DAY(60.2%±3.3%)、D組(0%),可以看出使用低糖誘導(dǎo),各組的分化率都提高,而B組增加誘導(dǎo)劑Ⅱ作用時間到3天,顯著提高了視野中陽性細胞所占比例。(*P<0.05)圖3誘導(dǎo)劑Ⅱ作用時間對3T3-L1細胞成脂肪分化的影響Figure2Resultsofdifferenttimepointsduringadipogenicdifferentiationof3T3-L1cells
【參考文獻】:
期刊論文
[1]MIRE: A GRAPHICAL R PACKAGE FOR MICRORNARELATED ANALYSIS[J]. Xing-qi Yan1, Kang Tu2,3, Lu Xie3, Yi-xue Li2,3, Bin Yin1, Yan-hua Gong1, Jian-gang Yuan1, Bo-qin Qiang1, and Xiao-zhong Peng1 1National Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100005 2Bioinformatics Center, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031 3Shanghai Center for Bioinformation Technology, Shanghai 200235. Chinese Medical Sciences Journal. 2008(04)
本文編號:3623167
【文章來源】:湖北中醫(yī)藥大學(xué)湖北省
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
經(jīng)典激素“雞尾酒“誘導(dǎo)分化3T3L1細胞示意圖
不同葡萄糖濃度對3T3-L1細胞成脂肪分化的影響
湖北中醫(yī)藥大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文143.2不同誘導(dǎo)劑的作用時間對小鼠3T3L1前脂肪細胞成脂分化率的影響經(jīng)典“雞尾酒”方法創(chuàng)立以來,很多學(xué)者對條件進行了改良,但很多方法改良后運用到不同實驗室后都未能顯示相同的效果,如有學(xué)者將誘導(dǎo)液Ⅰ處理時間延長到72小時,誘導(dǎo)分化率達到了90%以上[35],但是在本實驗條件下嘗試后,延長到72小時的效果不如原先的48小時,特別是在36h后觀察細胞發(fā)現(xiàn)卷邊死亡情況。因此旨在研究誘導(dǎo)液Ⅱ?qū)毎T導(dǎo)率的影響,染色結(jié)果顯示:A組:(2DAY)、B組:(3DAY)、C組:(4DAY)相對于對照組都有載脂的脂肪細胞形成,而B組視野內(nèi)的陽性細胞明顯多于A組和C組,脂滴密度也相對較高,而延長時間到4天顯然沒有得到比2天更高的分化率(圖3),細胞計數(shù)結(jié)果為:A組:2DAY(59.2%±2.2%)、B組:3DAY(86.2%±1.9%)、C組:4DAY(60.2%±3.3%)、D組(0%),可以看出使用低糖誘導(dǎo),各組的分化率都提高,而B組增加誘導(dǎo)劑Ⅱ作用時間到3天,顯著提高了視野中陽性細胞所占比例。(*P<0.05)圖3誘導(dǎo)劑Ⅱ作用時間對3T3-L1細胞成脂肪分化的影響Figure2Resultsofdifferenttimepointsduringadipogenicdifferentiationof3T3-L1cells
【參考文獻】:
期刊論文
[1]MIRE: A GRAPHICAL R PACKAGE FOR MICRORNARELATED ANALYSIS[J]. Xing-qi Yan1, Kang Tu2,3, Lu Xie3, Yi-xue Li2,3, Bin Yin1, Yan-hua Gong1, Jian-gang Yuan1, Bo-qin Qiang1, and Xiao-zhong Peng1 1National Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100005 2Bioinformatics Center, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031 3Shanghai Center for Bioinformation Technology, Shanghai 200235. Chinese Medical Sciences Journal. 2008(04)
本文編號:3623167
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