優(yōu)化3T3L1細(xì)胞成脂誘導(dǎo)模型并初步探討miR-222-3p對(duì)脂肪生成的作用
發(fā)布時(shí)間:2022-02-13 12:08
一、研究背景肥胖是由機(jī)體能量攝入超過(guò)能量消耗而造成的一類代謝綜合征,具有白色脂肪組織(WAT)過(guò)度沉積、中性脂肪細(xì)胞異常增殖及分化失衡的主要表現(xiàn)。同時(shí)由于脂肪組織具備調(diào)節(jié)體溫、儲(chǔ)存能量、緩沖機(jī)械沖擊等作用,而肥胖加劇了脂肪組織的炎癥效應(yīng),致使一些心血管疾病如高血壓、血栓等的發(fā)病率同死亡率都增高。細(xì)胞生物學(xué)方面,前脂肪細(xì)胞是一類同時(shí)具有增殖及分化為成熟脂肪細(xì)胞能力的前體細(xì)胞,此種前體細(xì)胞在不同的生長(zhǎng)因子、激素等的作用下,經(jīng)歷有絲分裂克隆期、生長(zhǎng)停滯期、進(jìn)一步的克隆期、終末分化四個(gè)階段,細(xì)胞本身的成纖維狀態(tài)發(fā)生改變,通過(guò)胞質(zhì)內(nèi)甘油三酯聚集形成成熟脂肪細(xì)胞,這一過(guò)程,稱為“成脂分化”,該過(guò)程一直是肥胖研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。為了能夠直觀地了解細(xì)胞分化內(nèi)部脂質(zhì)累積的過(guò)程,需要在體外建立數(shù)量可控,分化較為穩(wěn)定的成熟脂肪細(xì)胞分化模型。小鼠的3T3L1細(xì)胞源于18天左右胎齡的Swiss小鼠胚胎,能夠在適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)條件下分化為成熟脂肪細(xì)胞,同時(shí)將其移植入小鼠的體內(nèi)后也可以進(jìn)行單一分化,能模擬活體脂肪組織,因此3T3-L1成纖維細(xì)胞系一直是最廣泛用來(lái)進(jìn)行相關(guān)體外研究的細(xì)胞系之一[1,2]。經(jīng)典的3T3-L1前脂肪...
【文章來(lái)源】:湖北中醫(yī)藥大學(xué)湖北省
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
經(jīng)典激素“雞尾酒“誘導(dǎo)分化3T3L1細(xì)胞示意圖
不同葡萄糖濃度對(duì)3T3-L1細(xì)胞成脂肪分化的影響
湖北中醫(yī)藥大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文143.2不同誘導(dǎo)劑的作用時(shí)間對(duì)小鼠3T3L1前脂肪細(xì)胞成脂分化率的影響經(jīng)典“雞尾酒”方法創(chuàng)立以來(lái),很多學(xué)者對(duì)條件進(jìn)行了改良,但很多方法改良后運(yùn)用到不同實(shí)驗(yàn)室后都未能顯示相同的效果,如有學(xué)者將誘導(dǎo)液Ⅰ處理時(shí)間延長(zhǎng)到72小時(shí),誘導(dǎo)分化率達(dá)到了90%以上[35],但是在本實(shí)驗(yàn)條件下嘗試后,延長(zhǎng)到72小時(shí)的效果不如原先的48小時(shí),特別是在36h后觀察細(xì)胞發(fā)現(xiàn)卷邊死亡情況。因此旨在研究誘導(dǎo)液Ⅱ?qū)?xì)胞誘導(dǎo)率的影響,染色結(jié)果顯示:A組:(2DAY)、B組:(3DAY)、C組:(4DAY)相對(duì)于對(duì)照組都有載脂的脂肪細(xì)胞形成,而B(niǎo)組視野內(nèi)的陽(yáng)性細(xì)胞明顯多于A組和C組,脂滴密度也相對(duì)較高,而延長(zhǎng)時(shí)間到4天顯然沒(méi)有得到比2天更高的分化率(圖3),細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果為:A組:2DAY(59.2%±2.2%)、B組:3DAY(86.2%±1.9%)、C組:4DAY(60.2%±3.3%)、D組(0%),可以看出使用低糖誘導(dǎo),各組的分化率都提高,而B(niǎo)組增加誘導(dǎo)劑Ⅱ作用時(shí)間到3天,顯著提高了視野中陽(yáng)性細(xì)胞所占比例。(*P<0.05)圖3誘導(dǎo)劑Ⅱ作用時(shí)間對(duì)3T3-L1細(xì)胞成脂肪分化的影響Figure2Resultsofdifferenttimepointsduringadipogenicdifferentiationof3T3-L1cells
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]MIRE: A GRAPHICAL R PACKAGE FOR MICRORNARELATED ANALYSIS[J]. Xing-qi Yan1, Kang Tu2,3, Lu Xie3, Yi-xue Li2,3, Bin Yin1, Yan-hua Gong1, Jian-gang Yuan1, Bo-qin Qiang1, and Xiao-zhong Peng1 1National Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100005 2Bioinformatics Center, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031 3Shanghai Center for Bioinformation Technology, Shanghai 200235. Chinese Medical Sciences Journal. 2008(04)
本文編號(hào):3623167
【文章來(lái)源】:湖北中醫(yī)藥大學(xué)湖北省
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
經(jīng)典激素“雞尾酒“誘導(dǎo)分化3T3L1細(xì)胞示意圖
不同葡萄糖濃度對(duì)3T3-L1細(xì)胞成脂肪分化的影響
湖北中醫(yī)藥大學(xué)2020屆碩士學(xué)位論文143.2不同誘導(dǎo)劑的作用時(shí)間對(duì)小鼠3T3L1前脂肪細(xì)胞成脂分化率的影響經(jīng)典“雞尾酒”方法創(chuàng)立以來(lái),很多學(xué)者對(duì)條件進(jìn)行了改良,但很多方法改良后運(yùn)用到不同實(shí)驗(yàn)室后都未能顯示相同的效果,如有學(xué)者將誘導(dǎo)液Ⅰ處理時(shí)間延長(zhǎng)到72小時(shí),誘導(dǎo)分化率達(dá)到了90%以上[35],但是在本實(shí)驗(yàn)條件下嘗試后,延長(zhǎng)到72小時(shí)的效果不如原先的48小時(shí),特別是在36h后觀察細(xì)胞發(fā)現(xiàn)卷邊死亡情況。因此旨在研究誘導(dǎo)液Ⅱ?qū)?xì)胞誘導(dǎo)率的影響,染色結(jié)果顯示:A組:(2DAY)、B組:(3DAY)、C組:(4DAY)相對(duì)于對(duì)照組都有載脂的脂肪細(xì)胞形成,而B(niǎo)組視野內(nèi)的陽(yáng)性細(xì)胞明顯多于A組和C組,脂滴密度也相對(duì)較高,而延長(zhǎng)時(shí)間到4天顯然沒(méi)有得到比2天更高的分化率(圖3),細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果為:A組:2DAY(59.2%±2.2%)、B組:3DAY(86.2%±1.9%)、C組:4DAY(60.2%±3.3%)、D組(0%),可以看出使用低糖誘導(dǎo),各組的分化率都提高,而B(niǎo)組增加誘導(dǎo)劑Ⅱ作用時(shí)間到3天,顯著提高了視野中陽(yáng)性細(xì)胞所占比例。(*P<0.05)圖3誘導(dǎo)劑Ⅱ作用時(shí)間對(duì)3T3-L1細(xì)胞成脂肪分化的影響Figure2Resultsofdifferenttimepointsduringadipogenicdifferentiationof3T3-L1cells
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]MIRE: A GRAPHICAL R PACKAGE FOR MICRORNARELATED ANALYSIS[J]. Xing-qi Yan1, Kang Tu2,3, Lu Xie3, Yi-xue Li2,3, Bin Yin1, Yan-hua Gong1, Jian-gang Yuan1, Bo-qin Qiang1, and Xiao-zhong Peng1 1National Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100005 2Bioinformatics Center, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031 3Shanghai Center for Bioinformation Technology, Shanghai 200235. Chinese Medical Sciences Journal. 2008(04)
本文編號(hào):3623167
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/nfm/3623167.html
最近更新
教材專著