目的研究依達(dá)拉奉（EDA）對過氧化氫（H₂O₂）誘導(dǎo)的成骨細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的影響,為骨質(zhì)疏松的治療提供依據(jù)。方法取24 h內(nèi)新生SD大鼠頭蓋骨進(jìn)行成骨細(xì)胞原代培養(yǎng),傳代至第3代進(jìn)行成骨細(xì)胞鑒定。將鑒定后的成骨細(xì)胞分別用H₂O₂或（和）EDA以不同濃度作用2、4、6 h進(jìn)行MTT法檢測細(xì)胞增殖情況;選擇合適的作用濃度和作用時(shí)間進(jìn)行H₂O₂誘導(dǎo)成骨細(xì)胞氧化損傷模型的建立,測定超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、堿性磷酸酶（ALP）等指標(biāo),分析EDA對H2O2誘導(dǎo)成骨細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的影響。同時(shí)通過免疫印跡法測定藥物處理分組后bax,bcl-2凋亡相關(guān)蛋白的變化。用SPSS 23.0軟件進(jìn)行方差分析。結(jié)果 400μmol/L H₂O₂作用4 h是建立成骨細(xì)胞氧化應(yīng)激模型的適宜濃度和作用時(shí)間。MTT顯示,不同濃度（10、20、40、80μmol/L）EDA作用2、4、6 h成骨細(xì)胞成活率均高于空白組,差異均有統(tǒng)計(jì)... 

【文章來源】：中國慢性病預(yù)防與控制. 2020,28(10)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

不同組成骨細(xì)胞MTT檢測細(xì)胞成活率

H2O2組MDA濃度較空白對照組升高，SOD活力較空白對照組明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），氧化應(yīng)激模型成立。將成骨細(xì)胞預(yù)先用EDA(0、10、20、40、80μmol/L）處理，然后建立成骨細(xì)胞氧化應(yīng)激模型，MDA濃度隨EDA濃度增加而逐漸下降，SOD活力則逐漸升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見圖3和圖4。圖4 雙氧水（H2O2）或（和）依達(dá)拉奉（EDA）處理后成骨細(xì)胞的超氧化物歧化酶（SOD）檢測

western blot結(jié)果顯示，成骨細(xì)胞在EDA處理后，進(jìn)行H2O2誘導(dǎo)成骨細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷，bax蛋白表達(dá)隨EDA濃度增加而減少，條帶灰度值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；凋亡相關(guān)蛋白bcl-2蛋白表達(dá)隨EDA濃度增加而增加，條帶灰度值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05),bcl-2與bax比值符合抗凋亡機(jī)制，見圖6。3 討論


本文編號：3586294