發(fā)布時(shí)間：2021-12-23 02:50

　　背景:現(xiàn)代社會(huì)由于過(guò)度食用高脂食物造成肥胖人群越來(lái)越多。過(guò)量的膳食脂肪會(huì)增加脂肪和非脂肪組織的脂質(zhì)含量,并通過(guò)脂肪毒性引起組織慢性炎癥,導(dǎo)致細(xì)胞功能障礙和死亡。線粒體功能異常和過(guò)量的氧化應(yīng)激可能是肥胖等因素導(dǎo)致遲發(fā)性性腺功能低下的主要發(fā)病機(jī)制。由于睪酮合成限速步驟在線粒體完成,且睪丸間質(zhì)細(xì)胞具有較高的基礎(chǔ)自噬活性,研究表明白藜蘆醇（RSV）對(duì)代謝性疾病的治療效應(yīng)與其調(diào)節(jié)自噬作用有關(guān),但自噬機(jī)制在高脂飲食（HFD）導(dǎo)致肥胖小鼠睪酮合成減退及RSV保護(hù)效應(yīng)中的作用亟待研究。目的:研究高脂飲食引起的肥胖相關(guān)代謝性疾病對(duì)睪酮合成的不利影響,以及白藜蘆醇對(duì)男性生殖系統(tǒng)保護(hù)效應(yīng)中的自噬機(jī)制及作用,并從體外調(diào)節(jié)TM3細(xì)胞的自噬水平及誘導(dǎo)氧化應(yīng)激,進(jìn)一步研究自噬介導(dǎo)的白藜蘆醇減輕線粒體功能異常和氧化應(yīng)激、保護(hù)睪酮合成通路的機(jī)制,從而闡明自噬在白藜蘆醇保護(hù)高脂飲食小鼠睪丸Leydig細(xì)胞功能中的作用。方法:60只8周齡的雄性C57BL/6J雄鼠,隨機(jī)分為四組:分別給以高脂飲食（HFD group）或高脂飲食添加白藜蘆醇的（HFD+RSV group,400 mg/kg/day）灌胃,對(duì)照組用基礎(chǔ)飼糧不添... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Ctrl組（正常飲食），Ctrl+RSV組（正常飲食+白藜蘆醇），HFD組（高脂飲食），HFD+RSV組（高脂飲食+白藜蘆醇）小鼠睪丸組織HE染色結(jié)果

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文30表達(dá)弱于Ctrl組，在HFD+RSV組中表達(dá)較HFD組有明顯上調(diào)。由于Ctrl+RSV組的參數(shù)和睪丸結(jié)構(gòu)與Ctrl組沒(méi)有顯著差異，因此未進(jìn)一步測(cè)試其他指標(biāo)。圖2Ctrl組（正常飲食），Ctrl+RSV組（正常飲食+白藜蘆醇），HFD組（高脂飲食），HFD+RSV組（高脂飲食+白藜蘆醇）小鼠睪丸組織免疫組化3β-HSD的染色結(jié)果，Leydig細(xì)胞陽(yáng)性染色部分呈棕色顆粒，生精小管呈陰性。Fig.2Theresultsof3β-HSDantibodylabeledLeydigcellsbyimmunohistochemistryinCtrlgroup,Ctrl+RSVgroup，HFDgroupandHFD+RSVgroup，whichwerestainedbrown..Scalebar=50μm.3.1.3白藜蘆醇對(duì)小鼠睪酮合成能力的保護(hù)作用體外分離小鼠Leydig細(xì)胞后，通過(guò)放射免疫測(cè)定法檢測(cè)上清液中的睪酮水平，與Ctrl組相比，HFD組顯著下調(diào)，而與HFD組相比，在HFD+RSV組中上調(diào)。加入膽固醇和人絨毛膜促性腺激素（HCG）分別刺激睪酮的合成和分泌。結(jié)果表明，三組小鼠的睪丸間質(zhì)細(xì)胞分泌的睪酮水平顯著增加，兩組之間的差異與血清睪酮水平的變化一致（圖3）。

安徽醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文31圖3原代細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)，將提取出的小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞懸液分為（a）陰性對(duì)照組（-），（b）膽固醇治療組（22-Hydroxycholesterol2μM）和（c）HCG組（10ng/ml），三組不同處理因素刺激睪酮分泌功能后，在37°C的振蕩水浴中浸泡3小時(shí)。分離上清液，將其用于放射免疫測(cè)定（RIA）以測(cè)量睪酮。（均數(shù)±SD）顯著差異表示如下：與Ctrl組相比，*P<0.05,；與HFD組相比，#P<0.05。Fig.3Primarycellfunctionexperiments,themousetesticularmesenchymalcellsuspensionwasdividedinto(a)negativecontrolgroup(-),(b)cholesteroltreatmentgroup(22-Hydroxycholesterol2μM)and(c)HCGgroup(10ng/ml),threegroupsofdifferentprocessingfactorsstimulatetestosteronesecretionfunction,soakinashakingwaterbathat37°Cfor3hours.Thesupernatantwasseparatedandusedinaradioimmunoassay(RIA)tomeasuretestosterone.(meanData±SD)Significantdifferenceswereexpressedasfollows:*P<0.05versusCtrlgroup;#P<0.05versusHFDgroup.


本文編號(hào)：3547627