研究背景隨著我國經(jīng)濟發(fā)展,我國肥胖人口總數(shù)已經(jīng)超過美國,成為世界上肥胖人口最多的國家。肥胖會導致多種疾病的發(fā)生,如非酒精性脂肪肝、動脈粥樣硬化、高脂血癥等。肝臟脂代謝紊亂在肥胖、非酒精性脂肪肝、動脈粥樣硬化的發(fā)生中起關鍵作用。肝臟脂質合成的增加會導致VLDL分泌的增多,加速脂肪存儲甘油三酯,引起體重增加。此外,VLDL分泌增多還會導致LDL水平增高,增加動脈粥樣硬化的風險。我們近年來發(fā)現(xiàn)了一個新的脂代謝的調節(jié)因子,腎素（原）受體[（P）RR]。（P）RR是血壓調節(jié)系統(tǒng)腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)的重要成員。我們發(fā)現(xiàn)抑制（P）RR表達可以在轉錄后水平調節(jié)LDLR的蛋白水平以及LDL的攝取。通過計算機分析和實驗證據(jù),我們發(fā)現(xiàn)（P）RR是miR-148a的一個靶基因,且此前研究報道m(xù)iR-148a可以調節(jié)LDL代謝。據(jù)此,我們提出假說認為miR-148a可能通過作用于（P）RR調節(jié)肝臟脂代謝。研究目的明確肝臟（P）RR在體內(nèi)如何調節(jié)脂代謝,以及miR-148a是否通過調節(jié)（P）RR表達及功能,參與調節(jié)脂代謝。方法和結果我們利用糖基化修飾的反義寡核苷酸（GalNAc modified anti... 

【文章來源】：深圳大學廣東省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

-(P)RRASO特異性抑制肝臟(P)RR的表達

圖 3 肝臟(P)RR 抑制阻斷高脂飲食誘導的肥胖和脂肪肝。8 周齡 C57BL/6 分為 3 組，分別通過注射生理鹽水(Saline)、肝臟特異性對照 ASO (G-control)和肝臟特異性(P)RR ASO [G-(P)RR]，高料喂養(yǎng) 14 周。A 每周監(jiān)測小鼠體重并繪制體重曲線，第 14 周小鼠麻醉拍照；B 小動物身體成析儀（EchoMRI）檢測小鼠脂肪和肌肉含量；C&D 第 14 周，小鼠組織（肝臟、腹股溝脂肪、脂肪、腹膜下脂肪和棕色脂肪）取材拍照并稱重；E 肝臟油紅 O（Oil-Red O, ORO）染色和蘇和伊紅（Hematoxylin & Eosin, H&E）染色；F 提取肝臟內(nèi)脂質并檢測其中甘油三酯、膽固醇和脂肪酸的含量； G 實驗結束前 4 天代謝監(jiān)測系統(tǒng)檢測小鼠耗氧量和呼吸商。3.1.4 (P)RR 抑制降低 ACC 和 PDH 的蛋白水平為全面的了解(P)RR 的功能，我們通過相對定量蛋白質組學尋找受(P)RR 抑制的蛋白，并通過基因功能富集分析發(fā)現(xiàn)與脂質生物合成、脂質代謝和膽固醇代謝相蛋白明顯受到(P)RR 抑制的影響。其中 PDH 和 ACC 蛋白下降明顯。PDH 是將丙酮

圖 4 (P)RR 抑制降低 ACC 和 PDH 的蛋白水平。8 周齡 C57BL/6 分為 3 組，分別通過皮下注射鹽水(Saline)、肝臟特異性對照 ASO (G-control)和肝臟特異性(P)RR ASO [G-(P)RR]，高脂飼料14 周。Western Blot 檢測肝臟中 PDHA、PDHB、ACCα/β 的蛋白水平，ACCα/β、PDHA 和 PDH蛋白豐度均經(jīng)過同一樣品中的 β-actin 定量歸一。（n=6， Mean±SEM, *P<0.05; ***P<0.001，G-(vs G-control）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Non-alcoholic fatty liver disease: What the clinician needs to know[J]. Mariana Verdelho Machado,Helena Cortez-Pinto.  World Journal of Gastroenterology. 2014(36)



本文編號：3538700