n-3脂肪酸對PM 2.5 暴露的糖尿病大鼠氧化應(yīng)激和炎癥的影響
發(fā)布時間：2021-12-02 13:50
目的本研究旨在探討環(huán)境細顆粒物(fine particulate matter,PM2.5)暴露對2型糖尿�。╰ype 2 diabetes mellitus,T2DM）大鼠炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激的影響,以及n-3多不飽和脂肪酸（polyunsaturated fatty acids,PUFA）干預(yù)對其是否有改善作用。方法1.動物分組和處理:在本實驗中通過腹腔注射鏈脲佐菌素（streptozotocin,STZ）和高脂高糖飼料喂養(yǎng)的方法建立T2DM大鼠模型,以隨機血糖≥16.7mmol/L為T2DM建模成功的標(biāo)準(zhǔn)。將70只雄性四周齡SD大鼠根據(jù)體重隨機分為2組:對照組（NC）8只,造模組（MD）62只,并分別飼喂普通飼料和高脂高糖飼料6周,對MD組大鼠進行一次性腹腔注射STZ（30 mg/kg）。1周后,將T2DM造模成功的大鼠（共54只,造模成功率為87%）按照血糖隨機分為T2DM對照組、PM2.5氣管滴注對照組、玉米油對照組（corn oil control group,CO）、魚油（fishoil,FO）低、中、高劑量組（FOL、FOM、F...
【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：84 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
圖２．１?ＢＣＡ蛋白定量標(biāo)準(zhǔn)曲線??２．２．１３氧化應(yīng)激指標(biāo)的檢測??
?材料與方法???體表面，再加入待測標(biāo)本（抗原），形成抗原抗體復(fù)合物，洗滌未結(jié)合的物質(zhì)，??然后加入酶標(biāo)二抗，三者形成抗體－抗原－酶復(fù)合物，最后加入酶作用的底物，根??據(jù)顯色反應(yīng)來進行抗原的定量分析。??試劑盒組成：微孔酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、樣本稀釋液、檢測抗體－ＨＲＰ、２〇ｘ洗滌??緩沖液、底物Ａ、底物Ｂ、終止液、封板膜。??實驗步驟：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出在室溫平衡２０?ｍｉｎ后使用。將２０倍濃??縮洗滌液用純水２０倍稀釋后備用。在酶標(biāo)板上設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，在各標(biāo)??準(zhǔn)品孔和樣本孔分別加入５０?ｐＬ梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本。再每孔加入１００?ｐＬ??辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體，混勻后，將反應(yīng)孔用封板膜封住，于３７°Ｃ恒溫箱??溫育６０?ｍｉｎ。洗板５次后，依次每孔加入底物Ａ、Ｂ各５０?ｐＬ。３７°Ｃ避光孵育１５??ｍｉｎ后，每孔各加入５０隊終止液，于４５０?ｎｍ波長處測定各孔ＯＤ值。以所測??標(biāo)準(zhǔn)品的ＯＤ值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖??２．２－２．６，得到直線回歸方程，將樣品的ＯＤ值代入方程，計算出樣品的濃度。??１８０??１６０?．?ｙ?＝?１５４．１９ｘ－１９．４１??Ｒ２?＝?０．９９７?＾??１４０?？??？１２０??苞１〇〇．?／??制?ｚ??＾?６０??４０?■?ＪＴ??２０?＊??０?０．２?０．４?０．６?０．８?１?１．２?１．４??〇Ｄ４５０ｎｍ??圖２．２血清ＴＮＦ－ａ標(biāo)準(zhǔn)曲線??１５??
?材料與方法???ＩＳＯ?１??ｙ?＝?１２９．９１ｘ－?１９．７４７??１６０?＇?Ｒ２＝?０．９９２?＾??１４０?－??？１２０??ｉ?１００?■?／??Ｘ??儀?６０??４０?－?／ｆ??２。??０?■?ｉ?ｉ?ｉ?ｋ?Ｉ?ｉ?ｉ?ｉ??０?０．２?０．４?０．６?０．８?１?１．２?１．４?１．６??＾－＾４５０ｎｍ??圖２．３肝臟ＴＮＦ－ａ標(biāo)準(zhǔn)曲線??３５??ｙ?＝?３４．８２９ｘ－４．１６８９??３０－?Ｒ－０－９９５５?＾??ｉ２０－??趔１５?＿?ｚ??崁?ｚ??ｉｏ?？??：??０?■?Ｔ＿?Ｉ?Ｉ?＂?Ｉ?ｂ?ｉ??０?０．２?０．４?０．６?０．８?１?１．２??〇Ｄ４５〇ｎｍ??圖２．４血清ＩＬ－１０標(biāo)準(zhǔn)曲線??１６??
【參考文獻】：
期刊論文
[1]糖料甘蔗品質(zhì)評定新指標(biāo)—甘蔗葡聚糖的形成、危害及檢測方法[J]. 胡玉玫,蟻細苗,曾練強,李凱,梁達奉. 甘蔗糖業(yè). 2012(02)
碩士論文
[1]n-3脂肪酸對PM2.5暴露的T2DM大鼠部分代謝指標(biāo)的影響[D]. 宋春蕾.鄭州大學(xué) 2017
[2]DHA抑制2型糖尿病大鼠肝臟炎癥改善胰島素抵抗的機制研究[D]. 何天博.河北醫(yī)科大學(xué) 2013
本文編號：3528567
【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校
【文章頁數(shù)】：84 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
圖２．１?ＢＣＡ蛋白定量標(biāo)準(zhǔn)曲線??２．２．１３氧化應(yīng)激指標(biāo)的檢測??
?材料與方法???體表面，再加入待測標(biāo)本（抗原），形成抗原抗體復(fù)合物，洗滌未結(jié)合的物質(zhì)，??然后加入酶標(biāo)二抗，三者形成抗體－抗原－酶復(fù)合物，最后加入酶作用的底物，根??據(jù)顯色反應(yīng)來進行抗原的定量分析。??試劑盒組成：微孔酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、樣本稀釋液、檢測抗體－ＨＲＰ、２〇ｘ洗滌??緩沖液、底物Ａ、底物Ｂ、終止液、封板膜。??實驗步驟：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出在室溫平衡２０?ｍｉｎ后使用。將２０倍濃??縮洗滌液用純水２０倍稀釋后備用。在酶標(biāo)板上設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，在各標(biāo)??準(zhǔn)品孔和樣本孔分別加入５０?ｐＬ梯度濃度標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本。再每孔加入１００?ｐＬ??辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體，混勻后，將反應(yīng)孔用封板膜封住，于３７°Ｃ恒溫箱??溫育６０?ｍｉｎ。洗板５次后，依次每孔加入底物Ａ、Ｂ各５０?ｐＬ。３７°Ｃ避光孵育１５??ｍｉｎ后，每孔各加入５０隊終止液，于４５０?ｎｍ波長處測定各孔ＯＤ值。以所測??標(biāo)準(zhǔn)品的ＯＤ值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖??２．２－２．６，得到直線回歸方程，將樣品的ＯＤ值代入方程，計算出樣品的濃度。??１８０??１６０?．?ｙ?＝?１５４．１９ｘ－１９．４１??Ｒ２?＝?０．９９７?＾??１４０?？??？１２０??苞１〇〇．?／??制?ｚ??＾?６０??４０?■?ＪＴ??２０?＊??０?０．２?０．４?０．６?０．８?１?１．２?１．４??〇Ｄ４５０ｎｍ??圖２．２血清ＴＮＦ－ａ標(biāo)準(zhǔn)曲線??１５??
?材料與方法???ＩＳＯ?１??ｙ?＝?１２９．９１ｘ－?１９．７４７??１６０?＇?Ｒ２＝?０．９９２?＾??１４０?－??？１２０??ｉ?１００?■?／??Ｘ??儀?６０??４０?－?／ｆ??２。??０?■?ｉ?ｉ?ｉ?ｋ?Ｉ?ｉ?ｉ?ｉ??０?０．２?０．４?０．６?０．８?１?１．２?１．４?１．６??＾－＾４５０ｎｍ??圖２．３肝臟ＴＮＦ－ａ標(biāo)準(zhǔn)曲線??３５??ｙ?＝?３４．８２９ｘ－４．１６８９??３０－?Ｒ－０－９９５５?＾??ｉ２０－??趔１５?＿?ｚ??崁?ｚ??ｉｏ?？??：??０?■?Ｔ＿?Ｉ?Ｉ?＂?Ｉ?ｂ?ｉ??０?０．２?０．４?０．６?０．８?１?１．２??〇Ｄ４５〇ｎｍ??圖２．４血清ＩＬ－１０標(biāo)準(zhǔn)曲線??１６??
【參考文獻】：
期刊論文
[1]糖料甘蔗品質(zhì)評定新指標(biāo)—甘蔗葡聚糖的形成、危害及檢測方法[J]. 胡玉玫,蟻細苗,曾練強,李凱,梁達奉. 甘蔗糖業(yè). 2012(02)
碩士論文
[1]n-3脂肪酸對PM2.5暴露的T2DM大鼠部分代謝指標(biāo)的影響[D]. 宋春蕾.鄭州大學(xué) 2017
[2]DHA抑制2型糖尿病大鼠肝臟炎癥改善胰島素抵抗的機制研究[D]. 何天博.河北醫(yī)科大學(xué) 2013
本文編號：3528567
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