發(fā)布時(shí)間：2021-11-27 03:52

　　類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid arthritis,RA）是以對(duì)稱性多關(guān)節(jié)炎為臨床特征的慢性炎癥性疾病。病理特征是關(guān)節(jié)滑膜的炎癥和增生,伴骨、軟骨的侵蝕。其發(fā)病機(jī)制尚不明確,表觀遺傳學(xué)可能是未來的研究方向。RA成纖維樣滑膜細(xì)胞（Fibroblast-like synoviocytes,FLS）作為滑膜炎的主要組成細(xì)胞,它的侵襲和抗凋亡特性,以及調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)和慢性炎癥的能力,最終使它成為關(guān)節(jié)炎的主要參與者。了解RA-FLS的表觀遺傳特性可能有助于我們識(shí)別RA新的診斷和預(yù)后標(biāo)志物以及治療靶點(diǎn)。近年來,micro RNA（mi RNA）在RA-FLS中的功能研究成為RA機(jī)制研究的熱點(diǎn)。我們前期研究發(fā)現(xiàn)mi R-146a在RA患者的成纖維樣滑膜細(xì)胞中表達(dá)下調(diào),這引起了我們的興趣。mi R-146a在RA中到底扮演一個(gè)什么角色呢?是促炎基因還是抑炎基因呢?生物信息學(xué)預(yù)測(cè)和雙熒光素酶報(bào)告基因都證實(shí)白介素-1受體相關(guān)激酶1（Interleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1）、腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（Tumor necrosis factor r... 

【文章來源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：112 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

RA-FLS和Ctrl-FLS細(xì)胞

RA-FLS和Ctrl-FLS中miR-146amRNA水平

??竟?澩鋃哉?質(zhì)粒組，Mimic-miR-146a—轉(zhuǎn)染miR-146a過表達(dá)質(zhì)粒組，Inhibitor-NC—轉(zhuǎn)染干擾對(duì)照質(zhì)粒組，Inhibitor-miR-146a—轉(zhuǎn)染miR-146a干擾質(zhì)粒組。轉(zhuǎn)染24h后采用RT-qPCR檢測(cè)miR-146a表達(dá)量，以檢測(cè)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率。由圖1-3可見，與Mimic-NC組相比，Mimic-miR-146a組miR-146a表達(dá)量明顯上升(p<0.001)，表明miR-146a過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染成功，miR-146a表達(dá)量顯著增加；另一方面，與Inhibitor-NC組相比，Inhibitor-miR-146a組miR-146a表達(dá)量明顯下降(p<0.001)，表明miR-146a干擾質(zhì)粒轉(zhuǎn)染成功，miR-146a表達(dá)受到顯著抑制。圖1-3miR-146a質(zhì)粒轉(zhuǎn)染RA-FLS（四）miR-146a對(duì)RA-FLS增殖的作用在RA-FLS轉(zhuǎn)染質(zhì)粒后，分別在0h、24h、48h和72h以CCK8法檢測(cè)細(xì)胞活力。各組在各時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)吸光度(OD)值如表1-1所示，生長(zhǎng)曲線如圖1-4所示。結(jié)果顯示，與Mimic-NC組相比，Mimic-miR-146a組在0hOD值相等，沒有統(tǒng)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)；在24h和48h時(shí)，Mimic-miR-146a組OD值減低，但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)；在72h時(shí)，Mimic-miR-146a組OD值顯著減低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)。同時(shí)，結(jié)果還顯示，與Inhibitor-NC組相比，0h時(shí)Inhibitor-miR-146a組OD值基本一致，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)；24h時(shí)Inhibitor-miR-146a組OD值升高，但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)；在48h和72h時(shí)，Inhibitor-miR-146a組明顯升高，并且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。結(jié)果說明，與Mimic-NC組相比，Mimic-miR-146a組增殖能力減弱；另外，與Inhibitor-NC組相比，Inhibitor-miR-146a組增殖能力增強(qiáng)。說明過表達(dá)miR-146a能抑制RA-FLS的增殖能力，而抑制miR-146a會(huì)增強(qiáng)RA-FLS的增殖能力。


本文編號(hào)：3521512