研究目的:生物大分子藥物由于其良好的療效和較低的毒副作用,已成為治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）的重要手段。然而,此類藥物需要長(zhǎng)期注射給藥,由此引起的疼痛、局部紅腫、以及增大的感染風(fēng)險(xiǎn),大大降低了患者的順應(yīng)性。本研究擬通過(guò)制備溶解型微針和水凝膠微針,并以依那西普和抗DEK蛋白核酸適配體DTA為模型藥物,探索微針經(jīng)皮傳遞生物大分子藥物治療RA的可行性。研究方法:本研究先將透明質(zhì)酸（HA）與甲基丙烯酸酐進(jìn)行接枝反應(yīng)得到甲基丙烯酸化透明質(zhì)酸（mHA）,并使用核磁共振儀檢測(cè)其接枝率;再通過(guò)模具法制備出溶解型紫外交聯(lián)微針用于經(jīng)皮傳遞依那西普;使用光學(xué)顯微鏡、掃描電鏡、質(zhì)構(gòu)儀表征微針的形態(tài)和力學(xué)特性;利用皮膚穿刺實(shí)驗(yàn)、臺(tái)盼藍(lán)染色、H&E染色切片、針體溶解實(shí)驗(yàn)以及皮膚恢復(fù)實(shí)驗(yàn)考察微針的皮膚扎入性能、針體溶解釋藥性能和對(duì)皮膚的侵入性;通過(guò)動(dòng)態(tài)光散射和圓二色譜檢測(cè)依那西普在紫外照射下的活性改變;使用磺酰羅丹明B（SRB）熒光標(biāo)記依那西普和熒光定量的方法檢測(cè)微針的載藥量;構(gòu)建佐劑誘導(dǎo)型關(guān)節(jié)炎小鼠模型并監(jiān)測(cè)其體重、足部體積、炎癥因子和病理切片以綜合評(píng)定微針傳遞依那西普的治療效果。另外,通過(guò)延長(zhǎng)接枝反應(yīng)時(shí)間... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：82 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１微針的分類：（Ａ）固體型微針；（Ｂ）包覆型微針；（Ｃ）溶解型微針；（Ｄ）空心微??針；（Ｅ）膨脹性微針??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆＭＮ：?（Ａ）?ｓｏｌｉｄ?ＭＮ；?（Ｂ）?ｃｏａｔｅｄ?ＭＮ；?（Ｃ）．?ｄｉｓｓｏｌｖａｂｌｅ?ＭＮ；?（Ｄ）?ｈｏｌｌｏｗ??

?第一章前言???／?ＲＡ?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ??１?ｗ靖ｒ卿＾?＼?／??＼?Ｄｉｓｓｏｖａｂｌｅ?ＭＮ?＇｜?Ｈｙｄｒｏｇｅｌ?ＭＮ??圖１．２課題設(shè)計(jì)思路??Ｆｉｇｕｒｅ?１．２?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐｒｏｊｅｃｔ?ｄｅｓｉｇｎ．??７??

??３．?１?ｍＨＡ的合成條件確疋??本研宄主要通過(guò)調(diào)節(jié)接枝反應(yīng)時(shí)間來(lái)調(diào)整ＨＡ的接枝率。由于酸酐在水中??的溶解性較差，無(wú)法充分與溶于水中的ＨＡ反應(yīng)。Ｎ，Ｎ’－二甲基甲酰胺能起到共??溶劑的作用，增加酸酐的溶解度『６２］，可顯著提高接枝效率。ｍＨＡ可以將其溶于??交聯(lián)液中并進(jìn)行紫外交聯(lián)觀察足否形成水凝膠以簡(jiǎn)單快速地判斷接枝反應(yīng)是否??成功。將ｍＨＡ溶于交聯(lián)液后，在紫外光激發(fā)下，１?２９５９能快速形成丨＇丨由基，并??催化ｍＨＡ接枝上的乙烯基與ＭＢＡ發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，形成水凝膠［Ｗ１。如圖２．１所??示，宋交聯(lián)的ｍＨＡ溶液呈液態(tài)（左圖），進(jìn)樣瓶?jī)A斜時(shí)，液體發(fā)生流動(dòng)。經(jīng)紫外??交聯(lián)后，ｎｉＨＡ溶液Ｈ丨形成水凝膠，呈現(xiàn)固態(tài)，瓶體傾斜吋液面仍垂直子玻璃壁，??不發(fā)生流動(dòng)（右圖）。用玻璃棒輕觸凝膠，發(fā)現(xiàn)凝膠不同于溶液的粘稠狀，呈光??滑的固體狀。這表明ＨＡ成功接枝上甲基丙烯酸酯基團(tuán)。核磁共振儀能準(zhǔn)確掃描??出氫原子的化學(xué)位移從而確認(rèn)氫原子所處的化學(xué)環(huán)境，以此判斷出其所屬的基??團(tuán)，并根據(jù)其峰面積可確定其在整個(gè)分子中所占比例１６４１。丨ＩＡ和ｍＨＡ的核磁結(jié)??果顯示，與丨１Ａ核磁圖譜相比，ｍＨＡ在５．７４或６．１８的化學(xué)位移處存在兩個(gè)峰，??均代表接枝上的甲基丙烯酸酯的甲基氫，而１．９９處的峰代表ＨＡ單糖單元ＣＨ３ＣＯ??基團(tuán)上的氫（圖２．２）。兩種氫原子的峰面積之比表示ＨＡ分子中接枝上甲基丙烯??酸酯基團(tuán)的比例，即接枝率。經(jīng)計(jì)算，接枝反應(yīng)進(jìn)行８?ｈ，產(chǎn)物的接枝率約為２０％。??圖２．１?ｍＨＡ溶液經(jīng)紫外交聯(lián)形成水凝膠??Ｆｉｇｕｒｅ?２．１?Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｍＨＡ?ｈｙｄｒｏｇｅｌ?ｂｙ?ＵＶ?ｃｒｏｓｓｌｉｎｋ．??２


本文編號(hào)：3520107