目的探討Wnt/β-catenin通路在促卵泡激素β亞基（follicle-stimulating hormoneβ-subunit,FSHβ）增強(qiáng)骨形成蛋白9（bone morphogenetic protein 9,BMP9）誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells,MSCs）成骨分化的作用。方法 C3H10T1/2細(xì)胞為研究對(duì)象,通過(guò)堿性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色方法檢測(cè)Ad-GFP對(duì)照組、Ad-FSHβ實(shí)驗(yàn)組、Ad-BMP9實(shí)驗(yàn)組、Ad-BMP9+Ad-FSHβ實(shí)驗(yàn)組或Ad-BMP9+Ad-FSHβ+XAV-939實(shí)驗(yàn)組等各研究組ALP表達(dá);茜素紅S染色（alizarin red s,ARS）方法檢測(cè)各研究組鈣鹽小節(jié)沉積;實(shí)時(shí)熒光定量多聚核苷酸鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time quantitative polymerase chain reaction,q PCR）技術(shù)檢測(cè)各研究組cyclin D1轉(zhuǎn)錄。結(jié)果單獨(dú)的Ad-FSHβ實(shí)驗(yàn)組骨形成早、晚期標(biāo)志物（ALP和鈣鹽小結(jié)）與AdGFP對(duì)照組相比無(wú)顯著差異;單獨(dú)的Ad-BMP... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2020,26(12)北大核心CSCD

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FSHβ對(duì)BMP9誘導(dǎo)的MSCs成骨分化中ALP和鈣鹽小結(jié)的影響

圖1 FSHβ對(duì)BMP9誘導(dǎo)的MSCs成骨分化中ALP和鈣鹽小結(jié)的影響本研究使用Wnt信號(hào)抑制劑XAV-939進(jìn)一步驗(yàn)證筆者的猜想。XAV-939可結(jié)合ADP-核糖基化酶催化域穩(wěn)定Axin，降低β-catenin穩(wěn)定性，因此在該通路中起阻滯劑功能。首先，本研究檢測(cè)了XAV-939處理后各研究組中Wnt/β-catenin下游基因的轉(zhuǎn)錄。和預(yù)期一樣(圖3),XAV-939處理后，降低了細(xì)胞中BMP9誘導(dǎo)的cyclin D1的轉(zhuǎn)錄水平(P<0.01)，也降低了Ad-BMP9與XAV-939聯(lián)合實(shí)驗(yàn)組中cyclin D1的轉(zhuǎn)錄水平(P<0.05)，提示XAV-939降低了FSHβ增強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)的Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。另外，顯色實(shí)驗(yàn)顯示各研究組中ALP的表達(dá)和cyclin D1轉(zhuǎn)錄有相似的變化，提示XAV-939抑制了FSHβ協(xié)同BMP9誘導(dǎo)成骨的作用。

XAV-939(1μmol/L)處理后各組中cyclin D1 mRNA和ALP的表達(dá)檢測(cè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]FSHβ在BMP9誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化中的作用研究[J]. 成亞琳,曾繼濤,黃敏,劉俊銀,涂小林,劉宏.  中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志. 2019(06)



本文編號(hào)：3470577