【目的】探討轉(zhuǎn)錄因子陰陽(yáng)1（YY1）在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）發(fā)病中的作用及其介導(dǎo)RA發(fā)病的免疫學(xué)機(jī)制,為臨床靶向YY1治療RA提供新思路。【方法】30例RA患者和30例骨關(guān)節(jié)炎（OA）患者來(lái)自于福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院風(fēng)濕血液科門診就診的患者,25例健康對(duì)照來(lái)自于福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院體檢中心的健康人群,提取上述患者的外周血單個(gè)核細(xì)胞的總RNA,并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,應(yīng)用western blot技術(shù)檢測(cè)三組人群中YY1蛋白的表達(dá)量,同時(shí)利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)YY1及炎癥因子IL-6的相對(duì)表達(dá)量。27只雄性DBA小鼠來(lái)自福建醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,構(gòu)建膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎（CIA）小鼠模型,并通過(guò)尾靜脈向CIA小鼠分別注射了YY1過(guò)表達(dá)慢病毒（LV-YY1）,YY1干擾慢病毒（LV-YY1-shRNA1,LV-YY1-shRNA2）和慢病毒載體（LV-NC）,應(yīng)用western blot技術(shù)檢測(cè)CIA小鼠的脾臟、淋巴結(jié)中YY1蛋白的表達(dá)量,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)不同慢病毒處理過(guò)的四組CIA小鼠外周血中YY1的相對(duì)表達(dá)量,并通過(guò)炎癥評(píng)分和病變關(guān)節(jié)HE染色來(lái)判斷CIA小鼠的炎癥水平。采用Pat... 

【文章來(lái)源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：57 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

研究假設(shè)模式圖

17圖1.1 YY1在RA患者與CIA小鼠中的表達(dá)情況患者外周血細(xì)胞單個(gè)核細(xì)胞中YY1 mRNA（左）與蛋白質(zhì)（右）的表達(dá)情況；（B脾臟和淋巴結(jié)中YY1 mRNA（左）與蛋白質(zhì)（右）的表達(dá)情況。RA患者與CIA小鼠中，YY1的表達(dá)與IL-6的表達(dá)呈正相關(guān)們進(jìn)一步觀察了在RA患者中，YY1的高表達(dá)是否與炎癥有關(guān)。相關(guān)性示，在RA患者中YY1的表達(dá)與IL-6的表達(dá)呈正相關(guān)（R2=0.5099, 圖1.2

圖1.2 YY1與IL-6的表達(dá)呈正相關(guān)（A）RA患者外周血中，YY1的表達(dá)與IL-6的表達(dá)的相關(guān)性；（B~C）CIA小鼠脾臟和淋巴結(jié)中，YY1的表達(dá)與IL-6的表達(dá)的相關(guān)性。3.4 干擾YY1表達(dá)后，CIA小鼠的炎癥水平下降為進(jìn)一步探索YY1在RA發(fā)病中的作用，我們構(gòu)建CIA小鼠模型，研究YY1對(duì)CIA小鼠體內(nèi)炎癥情況的影響。通過(guò)尾靜脈向CIA小鼠分別注射了YY1過(guò)表達(dá)慢病毒（LV-YY1），YY1干擾慢病毒（LV-YY1-shRNA1, LV-YY1-shRNA2）和慢病毒載體（LV-NC），并收集各組CIA小鼠的外周血單個(gè)核細(xì)胞。Real-time PCR的結(jié)果顯示，與對(duì)照組（LV-NC）的CIA小鼠相比，干擾組（LV-YY1-shRNA2）中YY1的表達(dá)水平顯著降低（P=0.019, 圖1.3A），這證明LV-YY1-shRNA2能夠發(fā)揮干擾YY1的作用。小鼠炎癥評(píng)分的結(jié)果顯示，干擾組（LV-YY1-shRNA2）的炎癥評(píng)分顯著

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]艾灸對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎小鼠Treg/Th17細(xì)胞及其信號(hào)通路的影響[J]. 劉志丹,李曉燕,趙創(chuàng),陳春蘭,李淼,譚倩,張玲,梁薇.  中國(guó)針灸. 2017(10)
[2]骨關(guān)節(jié)炎診斷及治療指南[J].   中華風(fēng)濕病學(xué)雜志. 2010 (06)



本文編號(hào)：3463820