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樹豆內(nèi)酯A調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin/runx-2信號(hào)通路促進(jìn)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2021-10-11 20:20
  骨質(zhì)疏松癥是多種原因引起的一種全身骨骼代謝性疾病,以骨量減少、骨組織微細(xì)結(jié)構(gòu)受損為主要特征,導(dǎo)致脆性骨折的風(fēng)險(xiǎn)增加。骨組織形成的減少、骨質(zhì)吸收增多是骨質(zhì)疏松的主要病因。Wnt/β-catenin/Runx-2信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞的分化、生長、凋亡等過程,是骨代謝過程中重要的信號(hào)系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模罕窘M前期從具有增強(qiáng)骨丟失小鼠骨密度的樹豆脂溶性部位中分離到了具有促成骨細(xì)胞分化活性、增強(qiáng)小鼠骨密度的菧類單體成分樹豆內(nèi)酯A (CLA)。為了探討CLA促進(jìn)成骨的分子機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)以人骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(hBMSCs)為模型,探討CLA對定向誘導(dǎo)的hMSCs成骨分化的影響,具體探討其對成骨分化信號(hào)通路的影響,為CLA用于治療骨質(zhì)疏松癥的藥物開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)方法:(1)CLA對hMSCs增殖的作用:生長狀態(tài)良好的第4-6代hBMSCs細(xì)胞和不同濃度CLA在生長培養(yǎng)基中共同培養(yǎng)48 h或72 h。CCK-8法檢測細(xì)胞活力,評價(jià)CLA對細(xì)胞增殖的影響;(2)CLA對hBMSCs成骨分化作用:生長狀態(tài)良好的hBMSCs第5代細(xì)胞在不同濃度CLA存在下,用成骨分化培養(yǎng)液對hBMSCs進(jìn)行成骨分化誘... 

【文章來源】:廣州中醫(yī)藥大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:51 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 骨骼生長發(fā)育概述
    1.2 骨重塑過程
    1.3 骨重塑中成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞相互作用
    1.4 成骨分化的相關(guān)Wnt信號(hào)通路
    1.5 調(diào)控Wnt信號(hào)通路的主要信號(hào)因子
    1.6 Wnt信號(hào)通路的調(diào)控
    1.7 Wnt信號(hào)通路對成骨的調(diào)控
    1.8 Wnt對MSCs成骨分化的調(diào)節(jié)
    1.9 中醫(yī)對骨重塑的認(rèn)識(shí)
    1.10 樹豆對骨方面疾病的作用研究
第二章 樹豆內(nèi)酯A對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響
    第一節(jié) 樹豆內(nèi)酯A對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖活力的影響
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)討論
    第二節(jié) CLA對人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hBMSCs)的成骨分化影響
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.4 實(shí)驗(yàn)討論
第三章 樹豆內(nèi)酯A對Wnt/β-catenin/runx-2/Osterix信號(hào)通路的影響
    第一節(jié) CLA對Wnt/β-catenin/runx-2/Osterix信號(hào)通路主要基因表達(dá)的研究
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 試驗(yàn)方法
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)討論
    第二節(jié) CLA對Wnt/β-catenin/runx-2/Osterix信號(hào)通路主要蛋白表達(dá)的研究
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 試驗(yàn)方法
        3.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.4 實(shí)驗(yàn)討論
結(jié)語
參考文獻(xiàn)
附錄
在校期間發(fā)表文章情
致謝
統(tǒng)計(jì)學(xué)審核證明


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的中醫(yī)治療探究[J]. 張志軍,高繼霞,楊宏偉,鄭德和.  求醫(yī)問藥(下半月). 2013(02)
[3]中藥單體及其有效成分對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞增殖和分化的研究進(jìn)展[J]. 許宏斌,張曉剛,路霞.  中國醫(yī)藥指南. 2012(07)
[4]體外誘導(dǎo)豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向尿路上皮細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 陳亮,丁明霞,左毅剛.  昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2011(11)
[5]兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的研究[J]. 王新莊,和小娥,閆穎穎,任衛(wèi)青,何俊丹,呂婧玉.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(10)
[6]兔BMSCs體外培養(yǎng)及誘導(dǎo)為成骨細(xì)胞的研究[J]. 秦桂美.  中醫(yī)臨床研究. 2011(19)
[7]Gd3+對原代培養(yǎng)的小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨分化和成脂分化的影響(英文)[J]. 張金超,谷廣其,孫靜,張群,郝曉紅,王書香.  無機(jī)化學(xué)學(xué)報(bào). 2011(06)
[8]小鼠骨髓干細(xì)胞分化為小膠質(zhì)細(xì)胞的在體研究[J]. 劉華巖,王軍,張朝東.  山東醫(yī)藥. 2009(16)
[9]BMSC向肝細(xì)胞分化及重建肝功能的研究進(jìn)展[J]. 楊晉翔,李志鋼,邱岳,張偉.  北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)(中醫(yī)臨床版). 2009(02)
[10]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向血管平滑肌樣細(xì)胞的誘導(dǎo)[J]. 杜振宗,任華,張超紀(jì),宋劍非,鄭民,林峰.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2009(01)



本文編號(hào):3431177

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