目的探究巨噬細(xì)胞表面Toll樣受體2（TLR2）在介導(dǎo)金黃色葡萄球菌（SA）誘導(dǎo)哮喘炎癥反應(yīng)中的分子機(jī)制。方法通過SA刺激小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞系建立炎癥反應(yīng)模型,分別用TLR2小干擾RNA（si RNA）和磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）抑制劑3-甲基腺嘌呤（3-MA）處理。Western blot法檢測(cè)細(xì)胞裂解液中TLR2、髓樣分化因子88（My D88）、PI3K、核因子κBp65（NF-κBp65）磷酸化的NF-κBp65（p-NF-κBp65）以及自噬蛋白beclin-1和微管相關(guān)蛋白1輕鏈3B（LC3B）的水平,ELISA檢測(cè)細(xì)胞上清液腫瘤壞死因子α（TNF-α）和白細(xì)胞介素6（IL-6）的分泌水平,激光共聚焦顯微鏡觀察自噬溶酶體的數(shù)量。結(jié)果 SA刺激巨噬細(xì)胞活化TLR2等多種信號(hào)通路。TLR2 si RNA顯著抑制PI3K、p-NF-κBp65以及自噬蛋白beclin-1和LC3B的表達(dá),此外,自噬溶酶體的數(shù)量和TNF-α和IL-6的分泌也顯著減少。3-MA在抑制自噬和炎癥反應(yīng)方面與TLR2 si RNA的作用效果相同。結(jié)論 TLR2通過PI3K信號(hào)通路調(diào)控金黃色葡萄球... 

【文章來源】：細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017,33(09)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2細(xì)胞轉(zhuǎn)染和篩選
        1.2.3 RNA干擾TLR2的水平
        1.2.4 自噬實(shí)驗(yàn)觀察
        1.2.5 Western blot法檢測(cè)巨噬細(xì)胞中NF-κBp63、p-NF-κBp65、TLR2、PI3K、LC3B、beclin-1的蛋白水平
        1.2.6 ELISA檢測(cè)巨噬細(xì)胞上清液TNF-α和IL-6水平
        1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 SA刺激RAW264.7巨噬細(xì)胞活化多種信號(hào)通道
    2.2 TLR2調(diào)控巨噬細(xì)胞PI3K和NF-κB信號(hào)通路以及自噬作用和促炎癥細(xì)胞因子的分泌
    2.3 PI3K信號(hào)通路參與調(diào)控巨噬細(xì)胞自噬作用和NF-κB信號(hào)通路及其介導(dǎo)的促炎癥細(xì)胞因子的分泌
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]PI3K、NF-κB和STAT1在支氣管哮喘兒童外周血單個(gè)核細(xì)胞的表達(dá)和臨床意義[J]. 石惠玲,劉杰波,蘆愛萍.  中國當(dāng)代兒科雜志. 2016(07)



本文編號(hào)：3419309