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HIF-1α和miR-210在百草枯中毒致肺纖維化中對(duì)上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2021-09-29 12:20
  背景和目的:百草枯(PQ)中毒誘導(dǎo)的不可逆的肺纖維化是患者死亡的主要原因。上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)在肺纖維化的形成中發(fā)揮重要作用。本研究探討缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)及其靶基因micro RNA-210(miR-210)在PQ中毒致肺纖維化中對(duì)EMT的作用,及HIF-1α和miR-210之間的相互調(diào)控關(guān)系。方法:將SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和模型組,模型組按50 mg/kg給予PQ一次性灌胃,并按中毒后不同時(shí)間點(diǎn)(2、6、12、24、48和72 h)處死分為六個(gè)亞組。體外模型應(yīng)用A549和RLE-6TN細(xì)胞,分別抑制或過表達(dá)HIF-1α和miR-210,并給予相應(yīng)終濃度PQ處理24 h。收集細(xì)胞和大鼠肺組織,western blot、q RT-PCR及免疫共沉淀等技術(shù)檢測(cè)各指標(biāo)變化。結(jié)果:PQ中毒后,體內(nèi)外模型中均有上皮標(biāo)志物ZO-1和E-cadherin表達(dá)減少,間質(zhì)標(biāo)志物α-SMA明顯增多,即發(fā)生了EMT。PQ中毒2 h大鼠肺組織即有HIF-1α表達(dá)顯著升高,一直到72 h均高于對(duì)照組。A549和RLE-6TN細(xì)胞內(nèi)沉默HIF-1α后,上皮標(biāo)志物減少明顯抑制,間質(zhì)標(biāo)志物增多減少... 

【文章來(lái)源】:上海交通大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:119 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

HIF-1α和miR-210在百草枯中毒致肺纖維化中對(duì)上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化的作用研究


PQ染毒后大鼠肺組織HIF-1α表達(dá)變化

肺泡上皮細(xì)胞,生存率,存活率,細(xì)胞的


圖 3 不同濃度 PQ 對(duì)肺泡上皮細(xì)胞生存率的影響Figure 3 Effect of different concentrations of PQ on the survival rate of alveolar epithelialcells注:(A)CCK-8 試劑盒檢測(cè)不同終濃度 PQ 對(duì) A549 細(xì)胞的存活率影響,*與對(duì)照組比

肺泡上皮細(xì)胞,蛋白表達(dá),細(xì)胞內(nèi),細(xì)胞


圖 4 PQ 處理后肺泡上皮細(xì)胞內(nèi) HIF-1α 變化Figure 4 Changes of HIF-1α in alveolar epithelial cells after PQ treatment注:免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè) PQ 處理 A549 和 RLE-6TN 細(xì)胞后,細(xì)胞內(nèi) HIF-1α 蛋白表達(dá)變。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]急性百草枯中毒導(dǎo)致肺纖維化的發(fā)生機(jī)制及治療進(jìn)展[J]. 邵雪,陳江華.  浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2014 (06)
[2]百草枯中毒機(jī)制研究現(xiàn)狀[J]. 田若辰,黃昌保,張錫剛.  中華勞動(dòng)衛(wèi)生職業(yè)病雜志. 2013 (09)



本文編號(hào):3413698

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