發(fā)布時(shí)間：2021-09-28 06:43

　　第一部分目的:觀察杜仲葉提取物山奈酚（Kae）對(duì)卵巢去勢(shì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成骨的影響。方法:首先,按照常規(guī)建立卵巢去勢(shì)大鼠模型及獲取普通健康雌性SD大鼠,常規(guī)飼養(yǎng)8周,引頸處死大鼠后取后肢,無(wú)菌操作下從股骨和脛骨中沖洗出骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）,按照常規(guī)方法予以進(jìn)行體外培養(yǎng),傳至第3代后將其分為三組:正常對(duì)照組（Control）、骨質(zhì)疏松模型組（OVX）和山奈酚干預(yù)組（OVX+Kae）。Control組使用未行過(guò)卵巢去勢(shì)手術(shù)的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,在體外誘導(dǎo)成骨;OVX組使用卵巢去勢(shì)模型大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,體外誘導(dǎo)成骨;OVX+Kae組是在OVX組的基礎(chǔ)上添加Kae對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行藥物干預(yù)。MTT法檢測(cè)Kae的細(xì)胞毒性,茜素紅染色觀察誘導(dǎo)成骨的情況,并檢測(cè)誘導(dǎo)成骨后的細(xì)胞中堿性磷酸酶（ALP）的活力水平。同時(shí)使用實(shí)時(shí)定量PCR（qPCR）法檢測(cè)各組細(xì)胞中Runx2和Osterix的mRNA相對(duì)轉(zhuǎn)錄水平以及通過(guò)蛋白質(zhì)免疫印記法（WB）檢測(cè)各組細(xì)胞中Runx2和Osterix蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:1、不同干預(yù)濃度山奈酚對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞均有不同程度的細(xì)胞毒性,且具有明... 

【文章來(lái)源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：93 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

不同干預(yù)濃度的山奈酚對(duì)BMSCs的抑制率影響

第一部分 山奈酚促進(jìn)卵巢去勢(shì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化同干預(yù)濃度山奈酚對(duì) BMSCs 誘導(dǎo)成骨的影響用成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨轉(zhuǎn)化，不同行干預(yù)，在成骨誘導(dǎo) 15 天后，使用茜素紅對(duì)成骨細(xì)胞進(jìn)行染色，-E 所示：不同濃度的山奈酚干預(yù)下的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在誘導(dǎo)成骨均可見(jiàn)不同數(shù)量的鈣結(jié)節(jié)沉積 (400×)。如圖 2.F 所示：當(dāng)山奈酚干10 和 100μM 時(shí)，鈣結(jié)節(jié)數(shù)量相比 0 和 0.1μM 時(shí)明顯增加，呈現(xiàn)一賴性。結(jié)合 MTT 結(jié)果，提示山奈酚的最佳干預(yù)濃度為 10μM，后續(xù)μM 山奈酚進(jìn)行干預(yù)。

山奈酚促進(jìn)卵巢去勢(shì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成SCs 誘導(dǎo)成骨后 ALP 水平的影響奈酚干預(yù)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成骨結(jié)果詳見(jiàn)圖 3：相比于正常大鼠，卵巢去勢(shì)后，細(xì)胞中堿性磷酸酶活力水平顯著下降（勢(shì)大鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在誘導(dǎo)成骨后高（p<0.05 vs. OVX 組）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3411425