背景和研究目的:糖尿病（Diabetes mellitus,DM）是一類以血糖持續(xù)升高為特征的代謝性疾病,臨床上依據(jù)其對胰島素依賴與否可分為Ⅰ型糖尿病（Type 1 diabetes mellitus,T1DM）和Ⅱ型糖尿�。═ype 2 diabetes mellitus,T2DM）。糖尿病晚期可出現(xiàn)多器官損傷如糖尿病足、眼疾、腎病及心肌病等。糖尿病的治療根據(jù)其類型不同、是否伴有并發(fā)癥等而不同。一般地,Ⅰ型糖尿病需要長期給予胰島素醫(yī)治,Ⅱ型糖尿病的防治是在調(diào)節(jié)飲食結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上,通過對促進胰島素分泌或增強胰島素敏感性或延遲食物吸收等藥物進行單用或聯(lián)合應(yīng)用,嚴(yán)重者也可給予胰島素治療。因此,研發(fā)可以有效防治糖尿病的新型藥物具有重大意義。BefA（Beta cell expansion factor A）是一種由人體腸道細菌產(chǎn)生的蛋白,研究顯示該蛋白具有促進胰島β細胞增殖的作用,提示其可能具有潛在的治療糖尿病的價值。在本研究中,我們首先構(gòu)建了原核BefA表達載體,利用大腸桿菌BL21系統(tǒng)進行蛋白表達與提純,進而獲得較高純度的BefA重組蛋白,并通過灌胃給藥方式觀察了該重組蛋白對小鼠Ⅰ型和Ⅱ型... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．１重組菌株ＢＬ２１－ｐＥＴ２８Ｃ－ＢｅｆＡ正確性驗證

?第３章結(jié)果與分析???８５－９０％之間。此外，ＢｅｆＡ蛋白在裂解液上清（條帶３）中的表達量相對與裂解??液沉淀（條帶４）比例更高，說明ＢｅｆＡ蛋白為上清表達，這一特性降低了蛋白??發(fā)酵和純化的難度，提高了?ＢｅｆＡ蛋白在后續(xù)研究及開發(fā)中的潛力。??Ｍ?１?２?３?４?５??Ｊ｜??一—ｒ￣ｒｗ??一－＂ＷＳＳ?ｒ??２５ｋＤ［?－二Ｈ??—＇丨?＿＿?１．１１１．１１?ｍｉ?ｊｔｍｔｍ．??圖３．２純化獲得ＢｅｆＡ蛋白的純度檢測。Ｍ：蛋白Ｍａｒｋｅｒ；?１：誘導(dǎo)前菌體：２：誘導(dǎo)后菌體；??３：裂解液上清；４：裂解液沉淀；５：上清純化后蛋白。??３．３驗證純化獲得ＢｅｆＡ蛋白的條帶位置??為進一步驗證目的蛋白位置，我們以Ｈｉｓ為一抗做了?Ｗｅｓｔｅｍ－ｂｌｏｔ實驗，結(jié)??果顯示２５?ｋＤ處有ＢｅｆＡ目的條帶，說明我們純化的蛋白完全正確（圖３．３）。??Ｍ?１?２?３?４?５??圖３．３驗證純化獲得ＢｅｆＡ蛋白的條帶位置。Ｍ：蛋白Ｍａｒｋｅｒ；?１：誘導(dǎo)前菌體？，２：誘導(dǎo)后??菌體；３：裂解液上清；４：裂解液沉淀；５：上清純化后蛋白。??１８??

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【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3404458