發(fā)布時(shí)間：2021-08-31 02:44

　　目的:激活血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2（Angiotensin-converting enzyme 2,ACE2）/血管緊張素1-7（Angiotensin 1-7,A1-7）/Mas信號(hào)通路可以改善胰島微循環(huán),保護(hù)β細(xì)胞。然而,其活化是否減少代謝應(yīng)激下β細(xì)胞去分化,目前并未見(jiàn)報(bào)導(dǎo)。本實(shí)驗(yàn)主要探討該通路對(duì)β細(xì)胞去分化的影響。方法:1.根據(jù)Cre/Loxp原理,建立β細(xì)胞遺傳譜系標(biāo)記技術(shù)。采用PCR和免疫熒光技術(shù)鑒定β細(xì)胞遺傳譜系標(biāo)記技術(shù)的建立。2.高脂飼養(yǎng)β細(xì)胞遺傳譜系標(biāo)記小鼠,行腹腔注射葡萄糖耐量試驗(yàn)（intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT）和腹腔注射胰島素耐量試驗(yàn)（intraperitoneal insulin tolerance test,IPITT）檢測(cè)小鼠的葡萄糖耐量和胰島素敏感性,采用免疫熒光和q-PCR技術(shù)觀察β細(xì)胞分化狀態(tài),并檢測(cè)胰島局部ACE2/A1-7/Mas軸活性。3.建立體內(nèi)外代謝應(yīng)激模型,通過(guò)ACE2基因敲除或通過(guò)外源給予A1-7調(diào)控ACE2/A1-7/Mas軸活性,觀察ACE2/A1-7/Mas信號(hào)通路對(duì)β細(xì)胞去分化的... 

【文章來(lái)源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：144 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

1.PCR鑒定Rosa26小鼠

圖 1.1.2.熒光顯微鏡下觀察 Rosa26 陽(yáng)性小鼠與野生型小鼠凍切片1.2 成功擴(kuò)大 J003573 品系轉(zhuǎn)基因鼠種群。2 只雄性 Ins2-cre 陽(yáng)性小鼠與野生型 C57BL/6J 小鼠交配子代用 PCR 鑒定，成功獲取 Ins2-cre 陽(yáng)性子代，成功擴(kuò)大 J群(見(jiàn)圖 1.2)。

圖 1.1.2.熒光顯微鏡下觀察 Rosa26 陽(yáng)性小鼠與野生型小鼠尾部的冰凍切片1.2 成功擴(kuò)大 J003573 品系轉(zhuǎn)基因鼠種群。2 只雄性 Ins2-cre 陽(yáng)性小鼠與野生型 C57BL/6J 小鼠交配后產(chǎn)生的子代用 PCR 鑒定，成功獲取 Ins2-cre 陽(yáng)性子代，成功擴(kuò)大 J003573 種群(見(jiàn)圖 1.2)。


本文編號(hào)：3374021