目的:本實驗通過體外培養(yǎng)大鼠INS-1細(xì)胞,并進(jìn)行不同的分組干預(yù),從而探討血管緊張素（1-7）能否通過下調(diào)JNK/Caspase-3 mRNA的表達(dá)減少INS-1細(xì)胞凋亡,為糖尿病的臨床治療提供理論依據(jù)。方法:根據(jù)細(xì)胞說明書,按一定比例配置適合INS-1細(xì)胞的1640完全培養(yǎng)基,將大鼠INS-1胰島素瘤細(xì)胞株接種于預(yù)先加入3ml完全培養(yǎng)基的25T的培養(yǎng)瓶中,置于恒溫細(xì)胞孵箱中,據(jù)細(xì)胞生長狀況,每24-48小時更換培養(yǎng)液1次,用含0.25%EDTA的胰蛋白酶進(jìn)行消化、傳代。選取傳代到4-5代的細(xì)胞開始實驗操作,所有組別的細(xì)胞在相同條件下共同孵化12小時,然后按不同干預(yù)條件隨機(jī)將細(xì)胞分為A、B、C、D、E,5組,A組不給予干預(yù),作參照,B組加入終濃度為10^-5mol/L的Ang（1-7）,C組加入終濃度為30mmol/L的高糖溶液,D組10^-5mol/L的Ang（1-7）+30mmol/L的高糖（先用Ang（1-7）預(yù)先干預(yù)30min,再進(jìn)行高糖溶液干預(yù)）,E組10^-5mol/L的Ang（1-7）+30mmol/L高糖+10... 

【文章來源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
常用縮寫詞中英文對照表
前言
1 材料與方法
    1.1 實驗細(xì)胞
    1.2 主要試劑
    1.3 主要儀器
    1.4 主要試劑配制方法
2 研究方法
    2.1 大鼠INS-1 胰島素瘤細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 細(xì)胞的消化與傳代
    2.3 INS-1 細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇
    2.4 實驗分組
    2.5 流式檢測INS-1 細(xì)胞凋亡率
    2.6 real-timePCR定量檢測JNK、Caspase-3 mRNA
    2.7 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 鏡下觀察各組大鼠INS-1 細(xì)胞一般生長狀況
    3.2 大鼠INS-1 細(xì)胞凋亡率的比較
    3.3 各組細(xì)胞中JNK、Caspase-3 mRNA的表達(dá)水平
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Ang（1-7）減輕棕櫚酸誘導(dǎo)的Min6細(xì)胞損傷[J]. 陸春麗,胡東輝,褚加成,周夏利,陳巍巍,孫明謹(jǐn).  中國病理生理雜志. 2018(11)
[2]多囊卵巢綜合征患者外周血Ang-（1-7）、AngⅡ/Ang-（1-7）比值與胰島素抵抗及脂代謝的相關(guān)性研究[J]. 左宏玲,李曉冬,杜彥芳,姚玉潔,趙金釵,王宇,張媛,王慧穎,段曉芬.  中華生殖與避孕雜志. 2017(05)
[3]血管緊張素1-7在骨骼肌細(xì)胞糖代謝中作用的研究[J]. 劉暢,信中,曹曦,楊芳遠(yuǎn),楊金奎.  中國糖尿病雜志. 2017(01)
[4]血管緊張素1-7對2型糖尿病大鼠胰島素抵抗的影響及機(jī)制[J]. 何軍華,劉航,王麗,吳慧璐,丹妮,郭紅,李興.  中國藥物與臨床. 2017(01)
[5]奧美沙坦保護(hù)糖尿病db/db小鼠腎臟的研究[J]. 楊秀紅,郭黎莉,李亞秋,馮聰聰,金惠敏.  老年醫(yī)學(xué)與保健. 2016 (02)
[6]絲膠對Fas介導(dǎo)的糖尿病大鼠胰島β細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用[J]. 劉東波,魏萌,張艷,喬躍兵,陳志宏.  中國老年學(xué)雜志. 2015(18)
[7]ACE2/Ang-（1-7）改善肝細(xì)胞糖代謝[J]. 曹曦,楊芳遠(yuǎn),史婷婷,謝榮榮,信中,楊金奎.  首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2014(06)
[8]血管緊張素-（1-7）對胰島素分泌細(xì)胞株NIT-1增殖的影響[J]. 王曉云,徐明彤,林秀紅,宛彥,任萌,李焱,嚴(yán)勵.  中山大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2013(04)
[9]Ang（1-7）及培哚普利對糖尿病視網(wǎng)膜TGF-β1表達(dá)的影響[J]. 劉娜,蔡可麗.  山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2013(05)
[10]血管緊張素Ⅱ?qū)σ葝u凋亡及Fas/Fas-L表達(dá)影響的實驗研究[J]. 劉銳,代文杰,周毅,宋春芳,邢軍.  哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2008(05)

碩士論文
[1]糖尿病心肌病患者血清ACE2和Ang-（1-7）變化及意義的臨床研究[D]. 王曉玉.山東大學(xué) 2014



本文編號：3368582