目的探討Toll樣受體2對(duì)肥胖小鼠脂肪組織纖維化的影響及其機(jī)制。方法健康雄性C57BL/6J小鼠與Toll樣受體2基因敲除小鼠雜交后獲得Toll樣受體2陽(yáng)性(TLR2^{wild type}小鼠)和Toll樣受體2陰性(TLR2^deficiency小鼠)的雄性7周齡雜交小鼠,分別給予普通飼料或高脂飲食喂養(yǎng),16周后取小鼠附睪周脂肪組織。石蠟切片給予HE染色和Masson染色觀察脂肪細(xì)胞大小及形態(tài)和脂肪組織膠原沉積情況,Western blotting和（或）熒光實(shí)時(shí)定量PCR和（或）免疫組化檢測(cè)各組小鼠脂肪組織1型膠原,6型膠原,Toll樣受體2,骨髓分化因子88,絲裂原活化蛋白激酶P38,磷酸化的絲裂原活化蛋白激酶P38,白細(xì)胞介素6,腫瘤壞死因子α,金屬基質(zhì)蛋白酶1,金屬基質(zhì)蛋白酶組織抑制劑1,白細(xì)胞介素29及F4/80蛋白表達(dá)量和（或）mRNA水平。Raw264.7細(xì)胞和原代巨噬細(xì)胞經(jīng)不同濃度的白細(xì)胞介素6和（或）游離脂肪酸處理后,收集細(xì)胞利用免疫熒光檢測(cè)細(xì)胞表面Toll樣受體2的表達(dá)水平,Western blotting檢測(cè)細(xì)胞骨髓分化因子... 

【文章來(lái)源】：錦州醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

各組小鼠體重及脂肪組織質(zhì)量圖1注：A組：TLR2野生型普通飲食組（TLR2wildtypemicewithcommonchowgroup）,B

敏感性和游離脂肪酸的影響。單因素方差分析后 LSD 法或 Tamhane’s T2 法兩兩比較結(jié)果顯示：與 TLR2 野生型普通飲食組小鼠相比，TLR2 野生型高脂飲食組小鼠空腹血糖、空腹胰島素，和游離脂肪酸升高，胰島素敏感指數(shù)降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與 TLR2 野生型高脂飲食組小鼠相比，TLR2 缺陷高脂飲食組小鼠空腹血糖、空腹胰島素和游離脂肪酸降低，胰島素敏感指數(shù)升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。析因設(shè)計(jì)的方差分析結(jié)果顯示，高脂飲食和 TLR2 基因敲除兩個(gè)因素在對(duì)各組小鼠空腹胰島素，胰島素敏感指數(shù)和 FFA 的影響上存在交互作用（空腹胰島素：F=34.209，P=0.000；胰島素敏感指數(shù)：F=16.699，P=0.000；FFA：F=449.514，P=0.000）。此外根據(jù) IPGTT 試驗(yàn)后血糖曲線，可發(fā)現(xiàn)，與 TLR2 野生型普通飲食小鼠相比，TLR2 野生型高脂飲食組小鼠糖耐量受損。與 TLR2 野生型高脂飲食組小鼠相比，TLR2 缺陷高脂飲食組小鼠體糖耐量得到改善（圖 2）。

（三）各組小鼠附睪周脂肪組織大體，脂肪組織 H&E 染色，Masson染色和 F4/80 免疫組織化學(xué)染色觀察根據(jù)對(duì)組織的大體或脂肪組織切片的染色，可發(fā)現(xiàn)，與 TLR2 野生型普通飲食組小鼠相比，TLR2 野生型高脂飲食組小鼠附睪周脂肪組織體積增大，脂肪細(xì)胞體積增大，脂肪細(xì)胞周?chē)z原沉積增加，脂肪組織表達(dá) F4/80 的巨噬細(xì)胞面積增加。與 TLR2 野生型高脂飲食組小鼠相比，TLR2 缺陷高脂飲食組小鼠附睪周脂肪組織體積增大，脂肪細(xì)胞體積增大，脂肪細(xì)胞周?chē)z原沉積增加，脂肪組織表達(dá) F4/80的巨噬細(xì)胞面積增加（圖 3）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Toll樣受體2基因敲除減輕1型膠原在高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠脂肪組織的沉積[J]. 張浩強(qiáng),王茹,宋冰.  中華內(nèi)分泌代謝雜志. 2017 (05)
[2]TLR2基因敲除下調(diào)高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠脂肪組織炎癥因子表達(dá)和細(xì)胞凋亡[J]. 張浩強(qiáng),王茹,張龍,宋冰.  免疫學(xué)雜志. 2017(02)



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