目的1.基于TMT蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)鑒定類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis,RA）和骨性關(guān)節(jié)炎（Osteoarthritis,OA）膝關(guān)節(jié)滑膜組織中差異性表達(dá)蛋白,并篩選可作為RA診斷治療的潛在標(biāo)志物。2.探討嗅素結(jié)構(gòu)域家族蛋白4（Olfactomedin-domain family 4,OLFM4）在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞（Rheumatoid Arthritis Fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS）炎癥發(fā)生發(fā)展過程中的生物學(xué)功能及分子機(jī)制。方法1.利用TMT定量蛋白組學(xué)技術(shù)鑒定并篩選OA與RA患者膝關(guān)節(jié)滑膜組織中差異表達(dá)蛋白,通過GO功能富集和KEGG通路富集分析,結(jié)合GEO datebase數(shù)據(jù)庫里的測序信息,利用GEO2R算法,篩選出目的基因。2.收集OA、RA患者膝關(guān)節(jié)滑膜組織,利用WB、RT-q PCR、IHC等技術(shù)驗(yàn)證滑膜組織中OLFM4的表達(dá)水平。3.利用免疫熒光共定位技術(shù)檢測目的基因表達(dá)細(xì)胞種類及位置,用DAPI染核,vimentin作為RA-FLS細(xì)胞標(biāo)志物,來確定目的基因OLFM4的表達(dá)。4.提取OA、R... 

【文章來源】：延安大學(xué)陜西省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

實(shí)驗(yàn)和分析流程圖

A B 圖 2 OA、RA患者檢驗(yàn)指標(biāo)統(tǒng)計(jì)Fig.2 Statistics of OA and RA Patient Test Indicators中C反應(yīng)蛋白水平；B：OA、RA患者血液中類風(fēng)濕因子水平；C水平；A患者滑膜組織蛋白質(zhì)樣品TMT定量蛋白組學(xué)結(jié)果量蛋白組學(xué)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果患者膝關(guān)節(jié)滑膜組織分別隨機(jī)分為 3 組，每組約 3相同質(zhì)量的樣本混勻，提取組織蛋白并進(jìn)行WB。，組間平行性好、組織蛋白提取成功并滿足實(shí)驗(yàn)需.2KD處，RA和OA患者組織中差異蛋白數(shù)量比較明RAOA0

圖 2 OA、RA患者檢驗(yàn)指標(biāo)Statistics of OA and RA Patient白水平；B：OA、RA患者血液中類水平；組織蛋白質(zhì)樣品TMT定量蛋學(xué)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果節(jié)滑膜組織分別隨機(jī)分為 的樣本混勻，提取組織蛋白行性好、組織蛋白提取成功RA和OA患者組織中差異蛋

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Olfactomedin-4 in digestive diseases: A mini-review[J]. Xin-Yu Wang,Sheng-Hui Chen,Ya-Nan Zhang,Cheng-Fu Xu.  World Journal of Gastroenterology. 2018(17)



本文編號：3360451